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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

第10年

当前位置: 阿仪网 > 上海谷研实业有限公司 > 产品展示 > 分子试剂 > 蛋白质研究 > 弱RIPA裂解液

弱RIPA裂解液

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/11/5 9:41:34

产品摘要:弱RIPA裂解液正在出售的产品:1,8-桉叶素Rap2鸟苷酸酶活性分析试剂盒
CAPS; 3-(环已)磺酸H-Ras鸟苷酸酶活性分析试剂盒
巴豆苷(标准品)K-Ras鸟苷酸酶活性分析试剂盒
巴西苏木素(标准品)N-Ras鸟苷酸酶活性分析试剂盒
菝葜皂苷

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产品完善度: 访问次数:563

试剂盒

ATCC细胞

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elisa试剂盒

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生化检测试剂盒

原代细胞

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细胞生物学试剂

分子试剂

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旗舰版网址:http://www.elisaguyan.com

详细内容

操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
产品属性:
中文名称:弱RIPA裂解液
英文名称:RIPA Lysis Buffer(Weak)
产品规格:250mL
产品货号:GOY-F11122
英文名称:RIPA Lysis Buffer(Weak)
产品规格:250mL
RIPA裂解液是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等实验。本产品裂解度较,对膜蛋白、胞浆蛋白、核蛋白、胞浆磷酸化蛋白和各种转录因子均有很好的效果,本产品含有各种蛋白酶和磷酸蛋白酶抑制剂,能有效防止各种蛋白酶对目的蛋白的降解
储存条件:低温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
对于培养细胞样品:
1. 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用数分钟内加入PMSF,使PMSF的终浓度为1mM。
2. 裂解细胞
2.1 对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2后,细胞就会被裂解。
2.2 对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
注意:通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200微升或250微升。
实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2.在适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(*—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
BAD(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克人受体酪氨激酶(RTKs)ELISA试剂盒,
BAX(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克人状腺球蛋白(TG)ELISA试剂盒,
BCL2(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克人受蛋白(PLN)ELISA试剂盒,
Caspase 1 (抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克小鼠嗜粒趋化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA试剂盒,
Caspase-2-G(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克大鼠凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA试剂盒,
Caspase-3(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克大鼠β素(BTC)ELISA试剂盒,
Caspase-4 p20(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克大鼠雌三醇(E3)ELISA试剂盒,
Caspase 6(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克鸡神经胶质纤维性蛋白(GFAP)ELISA试剂盒,
Caspase⁻⁷(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克兔子补体片断3a(C3a)ELISA试剂盒,
Caspase-8(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克赖 氨脱羧酶肉汤
Caspase-9(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克L-天门冬氨钾
Caspase 10(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克BOC-L-脯氨
MYC(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克L-状腺素
TNF alpha(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克二氢杨梅素 Dihydromyricetin
TNF beta(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克T4 DNA聚合酶
Integrin beta 7 整合素β7抗体四苯溴化膦 98%
Integrin Alpha V + Beta1 整合素αVβ1抗体四氢氧化铵 AR,25%水溶液
Integrin Alpha V + Beta 3 整合素αVβ3抗体四化铵 98%
Integrin Alpha V + Beta 5 整合素αVβ5抗体四氢氧化铵 1.0 M in H2O
Integrin alpha E/CD103 整合素αE抗体四硫氢铵 99%
IQGAP1 支架蛋白抗体四醋铵 90%
IRF-1 干扰素调节因子1抗体四氟化铵(二水) 98%
IRAK 白介素-1受体相关激酶1/2抗体三盐盐 98%
弱RIPA裂解液英文名称:D-Serine;D-2-Aminohydracrylic acid;D-2-Amino-3-hydroxypropionic acid;D-β-Hydroxyalanine;(R)-2-Amino-3-hydroxypropionic acid;(R)-(-)-Serine;D-3-Hydroxy-α-alanine
其他名称:D-蚕丝氨基酸;D-2-氨基-3-羟基丙酸;D-β-羟基丙氨酸
CAS号:312-84-5
C3H7NO3=105.09
别:BR
含量:≥99.0%

注意事项:
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后,轻摇时*与细胞充分接触,然后倒掉大部分*,利用剩余的少量*再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。

热门标签:弱RIPA裂解液

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