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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

第10年

当前位置: 阿仪网 > 上海谷研实业有限公司 > 产品展示 > 分子试剂 > 克隆与表达 > C43(DE3)pLysS化学感受态细胞

C43(DE3)pLysS化学感受态细胞

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/11/5 9:41:34

产品摘要:C43(DE3)pLysS化学感受态细胞正在出售的产品:1-甲基环孢菌素C植物源性食品大麦(barley)基因检测试剂盒
6-羧基-X-罗丹明环孢菌素D植物源性食品芹菜(cellery)基因检测试剂盒
西仑吉肽环孢菌素H植物源性食品芥末(mustard)基

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试剂盒

ATCC细胞

标准品

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生化试剂

菌种

培养基

elisa试剂盒

PCR检测试剂盒

生化检测试剂盒

原代细胞

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荧光PCR试剂盒

细胞生物学试剂

分子试剂

细胞系

细胞培养基

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旗舰版网址:http://www.elisaguyan.com

详细内容

操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
产品属性:
中文名称:C43(DE3)pLysS化学感受态细胞
英文名称:C43(DE3)pLysS Chemically Competent Cell
产品规格:10×100μl|50×100μl
产品货号:GOY-F11060
OverExpress C43(DE3)、OverExpress C4l(DE3)两个菌株均起源于BL2l(DE3),其优点是可以高效表达毒性蛋白或疏水性蛋白。OverExpress C4l(DE3)跟BL21(DE3)的区别在于其基因组含有至少一个未知突变,这个未知突变使其获得了高效表达毒性蛋白的能力,此突变位点参与表达毒性蛋白时的细胞死亡途径;OverExpress C43(DE3)来源于OverExpress C4l(DE3),是通过筛选OverExpress C4l(DE3)对另一个不同毒性蛋白的抗性菌株获得。C43(DE3)菌株具有比C41(DE3)更的表达毒性蛋白和疏水性蛋白的能力。将具有氯抗性的pLysS质粒导入C43(DE3)细胞中即是C43(DE3) pLysS,pLysS表达T7,T7可以与T7 RNA聚合酶结合抑制其转录活性,进而降低目的基因的背景表达水平,但不干扰IPTG诱导的表达,非常适合毒性蛋白的原核表达。该菌株染色体整合了入DE3区(DE3区含有T7RNA聚合酶),可同时表达T7 RNA聚合酶和RNA聚合酶,可用于pET系列,时表达T7 RNA聚合酶和RNA聚合酶,可用于pET系列,pGEX,pMAL等质粒的蛋白表达。C43(DE3)pLysS感受态细胞由特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率可达1×108cfu/μg DNA。
使用方法:
C43 (DE3) pLysS感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的质粒,并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
42℃水浴热激45,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
向离心管中加入700 μ1不含抗生素的LB无菌培养液,37℃,200rpm复苏60分钟。
5000rpm离心一分钟收菌,留取50 μ1左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含34μg/mL氯雹素及所选质粒筛选抗生素的LB培养基上。
将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
英文名称:C43(DE3)pLysS Chemically Competent Cell
产品规格:10×100μl|50×100μl
实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2.在适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(*—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
脘蛋白因变异分析试剂盒20次人抗Ku抗体(anti-Ku-Ab)ELISA试剂盒, anti-Ku-Ab ELISA kit
活体细胞脘蛋白去糖化试剂盒20次人抗肌动蛋白抗体(AAA)ELISA试剂盒,AAA ELISA
体外脘蛋白去糖化试剂盒20次人非化寡核苷(NON)ELISA试剂盒, 人非化寡核苷(NON)ELISA试剂盒,
体外脘蛋白转化(in vitro conversion)分析试剂盒50次人补体片断4b(C4b)ELISA试剂盒,
脘蛋白糖化定性分析试剂盒5次小鼠E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA试剂盒,
脘蛋白糖化分型(glycoform)试剂盒5次小鼠CXC趋化因子配体16(CXCL16)ELISA试剂盒,
细胞脘蛋白(PRION)蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒10/20次大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA试剂盒,
载玻片细胞脘蛋白(PRION)蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次鱼促卵泡素
冰冻切片组织脘蛋白(PRION)蛋白表达荧光10/20次白色念珠菌(C.albicans)ELISA试剂盒--动物,人
显微镜检测试剂盒去氧胆盐枸椽盐乳糖蔗糖琼脂
石蜡切片组织脘蛋白(PRION)蛋白表达荧光10/20次L-天冬酰一水
显微镜检测试剂盒L-缬氨酯盐盐
载玻片细胞β脘蛋白(PRION)蛋白表达NBT10/20次FMOC-L-天冬氨
显色光学显微镜检测试剂盒龙胆苦苷 Gentiopicroside
冰冻切片组织脘蛋白(PRION)蛋白表达NBT10/20次马脾铁蛋白
FOXO3A 叉头蛋白O3A抗体酰酮铪 97%
Phospho-FoxO3a (Ser318/321) 化叉头蛋白3A抗体酰酮铁 98%
Phospho-FoxO3a (Ser294) 叉头蛋白3A抗体酰酮锰 97%
Phospho-FoxO3a (Ser253) 化叉头蛋白3A抗体酰酮镍 95%
FOXO4 叉头蛋白O4抗体酰酮铂(II) 97%
Phospho-FoxO4 (Ser193) 化叉头蛋白4抗体酰酮氧钒 99%
phospho-FOXO4 (Ser197) 化叉头蛋白4抗体酰酮锌 97%
phospho-FOXO4 (Ser262) 化叉头蛋白4抗体锑粒 99.9999% metals basis
C43(DE3)pLysS化学感受态细胞CAS号:300-38-9
C9H9Br2NO3=338.98
别:BR
含量:≥97.0%
性状(以下信息仅供参考):粉红色针状或片状结晶。能风化。无水品245℃分解。溶于酸、碱、热乙醇和沸水,微溶于水,不溶于。比旋光度[α]20D +1.3°(c=5,4%盐酸溶液中)。
用途:本品仅供科研,不得用于其它用途
保存:RT,避光
3,5-二碘-L-酪氨酸
注意事项:
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后,轻摇时*与细胞充分接触,然后倒掉大部分*,利用剩余的少量*再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。

热门标签:C43(DE3)pLysS化学感受态细胞

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