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pTG-T载体克隆试剂盒(含感受态细胞)
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/11/5 9:41:34
产品摘要：pTG-T载体克隆试剂盒(含感受态细胞)正在出售的产品：别隐品碱;A-别隐品碱(标准品) 桂皮酸/肉桂酸转基因水稻LibertyLink62品系基因检测试剂盒
LGD-4033 哈巴俄苷水稻样品处理试剂盒
5-溴嘧啶哈巴苷转基因产品NOS基因检测试剂盒
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详细内容
产品属性：
中文名称：pTG-T载体克隆试剂盒(含感受态细胞)
英文名称：pTG-T Vector Cloning Kit with TOP10 Competent Cells
产品规格：20次|60次
产品货号：GOY-F11056
中文名称：pTG-T载体克隆试剂盒(含感受态细胞)
英文名称：pTG-T Vector Cloning Kit with TOP10 Competent Cells
产品规格：20次|60次
产品货号：GOY-F11056
| 本试剂盒适用于PCR产物的克隆，可将PCR产物连接到pTG-T载体上，便于进行下一步实验。DNA段连接是经常出问题的步骤，为了提高连接效率，本试剂盒提供了两种连接Buffer供不同情况选择：10×Ligation Buffer Ⅰ适合置于16℃连接过夜，可获得佳连接效果；2×Ligation Buffer Ⅱ为快速连接Buffer，25℃连接10分钟即可转化，快捷方便。 英文名称：pTG-T Vector Cloning Kit with 0 Competent Cells 产品规格：20次|60次 本试剂盒适用于PCR产物的克隆，可将PCR产物连接到pTG-T载体上，便于进行下一步实验。DNA段连接是经常出问题的步骤，为了提高连接效率，本试剂盒提供了两种连接Buffer供不同情况选择：10×Ligation Buffer Ⅰ适合置于16℃连接过夜，可获得佳连接效果；2×Ligation Buffer Ⅱ为快速连接Buffer，25℃连接10分钟即可转化，快捷方便。 pTG-T是一种高效克隆PCR产物的用载体，它是由一种克隆载体在EcoRV酶切位点处切开，在两侧的3′端添加T而成。由于大部分耐热聚合酶反应时都会在PCR产物的3′端添加一个A，可与pTG-T 3′端的T互补连接，因此可大大提高PCR产物的连接和克隆效率。连接使用的PCR片段3′端应带有A末端，如果是使用pfu等高保真聚合酶扩增的不带A末端的片段，应使用平末端连接试剂盒先加A末端后再连接。 试剂盒中配备了高效率的连接试剂、对照用螺旋质粒和0感受态细胞等，可以方便的连接和转化。带有插入片段的重组子可根据α互补原理，进行蓝白斑筛选，判断载体中有无外源基因的插入（白色克隆为阳性重组克隆，蓝色的为载体自连的克隆，具体筛选原理参考分子克隆等书籍）。克隆后，可使用通用引物T7、SP6进行测序。 保存条件：-20℃保存，避免反复冻融（载体和连接试剂可以适当的分装成小份，防止反复冻融，以保证质量）。感受态细胞需要严格的在⁻⁷0℃冻存。 |
注意事项：
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后，轻摇时*与细胞充分接触，然后倒掉大部分*，利用剩余的少量*再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞，比如在检测凋亡的同时检测细胞周期，只能选用Annexin V-FITC，而不能选用Annexin V-EGFP，因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育，并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片，可以和Annexin V结合，对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后，轻摇时*与细胞充分接触，然后倒掉大部分*，利用剩余的少量*再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞，比如在检测凋亡的同时检测细胞周期，只能选用Annexin V-FITC，而不能选用Annexin V-EGFP，因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育，并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片，可以和Annexin V结合，对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。
实验要点:
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2．在适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的异戊醇（*—异戊醇=25:24:1），异戊醇的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
冰冻切片组织CYP2B1蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次人钙调酶（CaN）ELISA试剂盒,CaN ELISA
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2．在适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的异戊醇（*—异戊醇=25:24:1），异戊醇的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
冰冻切片组织CYP2B1蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次人钙调酶（CaN）ELISA试剂盒,CaN ELISA
石蜡切片组织CYP2B1蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次人水通道蛋白1（AQP-1）ELISA试剂盒,
载玻片细胞CYP2B1蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次人T活化连接蛋白（LAT）ELISA试剂盒,
冰冻切片组织CYP2B1蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次人多聚血清蛋白（PHSA）ELISA试剂盒,
石蜡切片组织CYP2B1蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次小鼠幽门螺旋菌IgG（Hp-IgG）ELISA试剂盒,
细胞CYP2B1蛋白表达比色法定量检测试剂盒10/50 次小鼠抗血小板抗体IgG/M/A（PA-IgG/M/A）ELISA试剂盒,
细胞CYP2B1蛋白表达荧光定量检测试剂盒10/50 次小鼠纤连蛋白（FN）ELISA试剂盒,
CYP2B1蛋白表达西方杂交分析试剂盒5次小鼠游离睾酮（F-TESTO）ELISA试剂盒,
CYP2B1蛋白免疫共沉淀分析试剂盒5次大鼠白血病抑制因子受体（LIFR）ELISA试剂盒,
CYP2B1蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25次L-丙-谷二肽
细胞β淀粉样蛋白（βAMYLOID）蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒10/20次丹参酚A Salvianolic acid A
载玻片细胞βAMYLOID蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次β-倒捻子素 β-Mangostin
冰冻切片组织βAMYLOID蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次Q琼脂糖凝胶FF
石蜡切片组织βAMYLOID蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次硼铅
载玻片细胞βAMYLOID蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次偶氮胂Ⅰ
FGFR4/CD334 成纤维生长因子受体4抗体1,10-菲罗啉(无水) 99%
FGL2 凝血酶原酶抗体亚硝铁 CP
Fibulin 1 “衰老关键蛋白”抗体玫瑰红钠 AR
Fibulin 5 “衰老关键蛋白”抗体罗丹明B AR
human Fibrinogen 可溶性纤维蛋白原罗丹明B 高纯，≥95.0%（HPLC）
human Fibrinogen 人纤维蛋白原抗体半二酚橙 AR
human Fibrinogen 人纤维蛋白原抗体二二硫代氨钠(铜试剂) AR,99.0%
FLASH/CASP8AP2 半胱氨蛋白酶8相关蛋白2抗体氧化锶 AR
pTG-T载体克隆试剂盒(含感受态细胞)D-酪氨酸
pTG-T载体克隆试剂盒(含感受态细胞)D-酪氨酸
英文名称：D-Tyrosine；D-β-p-Hydroxyphenyl-alanine；D-α-Amino-β-p-hydroxyphenyl propionic acid；D-α-Amino-p-hydroxyhydrocinnamic acid；R(+)-Tyrosine；3-(4-Hydroxyphenyl)-D-alanine
其他名称：D-β-对羟基苯基丙氨酸；D-苯酚氨基丙酸；D-β-对羟苯基-α-氨基丙酸；D-干酪氨基酸；3-（4-羟基苯基)-D-丙氨酸；D-α-氨基对羟基氢化
热门标签：pTG-T载体克隆试剂盒(含感受态细胞)
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