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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

第10年

当前位置: 阿仪网 > 上海谷研实业有限公司 > 产品展示 > 分子试剂 > 克隆与表达 > 双链DNA补平和连接试剂盒

双链DNA补平和连接试剂盒

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/11/5 9:41:34

产品摘要:双链DNA补平和连接试剂盒正在出售的产品:BYL719德尔塔林食物三氯蔗糖(sucralose)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒
A66,p110α抑制剂地肤子皂苷Ic药品三氯蔗糖(sucralose)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒
SC-514;IKK

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产品完善度: 访问次数:589

试剂盒

ATCC细胞

标准品

RNA/DNA提取

生化试剂

菌种

培养基

elisa试剂盒

PCR检测试剂盒

生化检测试剂盒

原代细胞

质粒

荧光PCR试剂盒

细胞生物学试剂

分子试剂

细胞系

细胞培养基

抗体

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详细内容

产品属性:
中文名称:双链DNA补平和连接试剂盒
英文名称:Blunting & Ligation Kit
产品规格:10次|20次
产品货号:GOY-F11048
储存条件:冷冻(-20℃)
英文名称:Blunting & Ligation Kit
产品规格:10次|20次
储存条件:冷冻(-20℃)
概述
双链DNA补平和连接试剂盒是利用DNA多聚酶I的Klenow片段多聚酶活性能够补平不互补的5’端突出为基础。对于用2个不同限制性内切酶酶切所获得的片段,可以选择性补平一端。再通过T4 DNA连接酶对平末端DNA进行有效连接,此试剂盒操作简便,全过程可在1h内完成。在连接缓冲液中加入PEG提高平末端DNA的连接效率。连接过程中载体DNA可自环化,片段会连成寡聚体。优化插入片段和载体末端浓度和比率有利于提高正确连接产物的产率。
特点
操作简便,全过程可在1.5 h内完成。
在连接缓冲液中加入PEG提高平末端DNA的连接速率。
应用
连接、转化
注意事项:
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后,轻摇时*与细胞充分接触,然后倒掉大部分*,利用剩余的少量*再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。
实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2.在适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(*—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
冰冻切片组织线粒体复合物III蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次CBZ-L-焦谷氨
石蜡切片组织线粒体复合物III蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次BOC-L-天冬酰
载玻片细胞线粒体复合物III蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次芴氧羰-O-叔丁-L-酪氨
冰冻切片组织线粒体复合物III蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次大豆苷 Daidzin
石蜡切片组织线粒体复合物III蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次钩吻素子 Koumine
细胞线粒体复合物III蛋白表达比色法定量检测试剂盒10/50 次黄杞苷 Aesculetin
细胞线粒体复合物III蛋白表达荧光定量检测试剂盒10/50 次邻-β-D-吡喃葡萄糖苷
线粒体复合物III蛋白表达西方杂交分析试剂盒5次对-N-酰-β-D-氨葡萄糖苷
线粒体复合物III蛋白免疫共沉淀分析试剂盒5次盐林可霉素
线粒体复合物III蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25次人超敏游离雌三醇(uE3)ELISA试剂盒,uE3 ELISA
细胞线粒体复合物IV蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒10/20次人缺血修饰白蛋白(IMA)ELISA试剂盒,
载玻片细胞线粒体复合物IV蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次人假定蛋白LOC433328 ELISA试剂盒,
冰冻切片组织线粒体复合物IV蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次小鼠Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA试剂盒,
石蜡切片组织线粒体复合物IV蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次小鼠8异列腺素(8-iso-PG)ELISA试剂盒,
载玻片细胞线粒体复合物IV蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次大鼠纤溶抑制因子/凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)ELISA试剂盒,
ET-1(whole serum) 内皮素-1抗体(抗血清)4,4,4-三氟酰酯 98%
Ets1/ETS-1 Ets转录因子家族ets1抗体酰氧酯 96%
ETK/BMX 非受体性蛋白酪氨激酶ETK抗体石墨 99.95% metals basis
Phospho-ETK (Tyr40) 化非受体性蛋白酪氨激酶ETK抗体石墨 99%,40nm
Eukaryotic aspartyl protease(Rice) 天冬氨蛋白酶家族蛋白抗体(水稻蛋白的一种)石墨 CP,99.85%
EV71 VP1 肠道病71型/手足口病病抗体石墨 D50<400nm,99.95%
EV71 VP1 (CT) 肠道病71型/手足口病病抗体(C端)石墨 99.95%,8000目
EXPB-2 植物延展素-β镱 99.9%,块状
双链DNA补平和连接试剂盒比旋光度:0°(C=1 in H2O)
氯化物:≤0.020%
硫酸盐:≤0.020%
铵盐:≤0.020%
铁盐:≤10ppm
重金属:≤10ppm
砷盐:≤1ppm
干燥失重:≤0.20%

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