当前位置： 阿仪网 > 上海谷研实业有限公司 > 产品展示 > 分子试剂 > 克隆与表达 > pET-N-GST-Thrombin-C-His质粒
pET-N-GST-Thrombin-C-His质粒
价格：￥电议
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/11/5 9:41:34
产品摘要：pET-N-GST-Thrombin-C-His质粒公司正在热销的产品：宋果灵（华北、一枝蒿庚素）（标准品）洋蓟素/1,3-二咖啡酰奎宁酸血液D比色法定量检测试剂盒
L-gamma-谷氨酰-对-叶黄素D高效液相色谱法定量检测试剂盒
FMOC-3,5-二
L-gamma-谷氨酰-对-叶黄素D高效液相色谱法定量检测试剂盒
FMOC-3,5-二
支付方式：
- 支付宝 微信 银行转账
产品完善度： 访问次数：544
企业档案
会员类型：旗舰版
已获得阿仪网信誉 等级评定
90成长值
(0 -40)基础信誉积累，可浏览访问
(41-90)良好信誉积累，可接洽商谈
(91+ )优质信誉积累，可持续信赖
阿仪网旗舰版会员：10年
工商认证 【已认证】
最后认证时间：
注册号： 【已认证】
法人代表： 【已认证】
参观次数：6822212
详细内容
下列是产品的订购信息!
| 中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
| pET-N-GST-Thrombin-C-His质粒 | pET-N-GST-Thrombin-C-His Plasmid | 1μg|100μg | GOY-F11024 |
产品说明书：
| pET-N-GST-Thrombin-C-His是一种用于表达N端含GST标签(Glutathione S-transferase tag,GST tag)或C端含His标签(His tag)的重组蛋白的原核表达质粒，也可用于表达N端含GST标签并且同时C端含His标签的重组蛋白。GST和His双标签有利于通过GST柱和镍柱两种方法来纯化目的蛋白，使目的蛋白的纯度更高。本质粒N端GST标签后有Thrombin酶切位点，可通过Thrombin蛋白酶切除N端的GST标签。本质粒为卡那抗性。 本质粒含有T7启动子/lac操纵子，可以在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的诱导下高效启动目的蛋白表达。在多克隆位点的面有一个GST标签的编码序列，后面有一个His标签的编码序列，后者含有6个组(6X His)。因此在多克隆位点根据读码框插入不含终止密码子的目的基因就可以表达N端含有GST标签并且C端含有His标签的目的蛋白。也可以在目的基因后面添加终止密码子，这样就可以表达仅在N端含有GST标签的目的蛋白。如果在NdeI和多克隆酶切位点之间按照读码框插入不带有终止密码子的目的基因，这样就可以表达仅C端带有His标签的目的蛋白。 本载体在N端GST标签与多克隆位点之间含有Thrombin蛋白酶识别的6肽序列LVPRGS，对应的核酸序列为CTGGTTCCGCGTGGATCC，因此在目的蛋白纯化后可以利用Thrombin酶切除N端的GST标签。Thrombin蛋白酶酶切发生在六肽序列的R和G之间，因此在酶切去除GST标签的时候会在目的蛋白的N端留下两个额外的氨基酸残基GS。 通常可以采用如GoldBalb GST-tag Purification Resin(YT958)、GST标签蛋白纯化试剂盒(YT959)、GoldBalb His-tag Purification Resin(YT616)或His标签蛋白纯化试剂盒(YT046)等纯化本质粒表达的目的蛋白，也可以使用GST抗体(YT784/YT722)和His-tag抗体(YT789)检测和少量地分离纯化目的蛋白。 使用说明： 1．使用1μg包装的本产品时，请先取少量本质粒转化，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。 2．100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl，共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。 3．pET-N-GST-Thrombin-C-His质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，构建的质粒可以用常规方法转入表达菌株。标签并且C端含有His标签的目的蛋白。也可以在目的基因后面添加终止密码子，这样就可以表达仅在N端含有GST标签的目的蛋白。如果在NdeI和多克隆酶切位点之间按照读码框插入不带有终止密码子的目的基因，这样就可以表达仅C端带有His标签的目的蛋白。 本载体在N端GST标签与多克隆位点之间含有Thrombin蛋白酶识别的6肽序列LVPRGS，对应的核酸序列为CTGGTTCCGCGTGGATCC，因此在目的蛋白纯化后可以利用Thrombin酶切除N端的GST标签。Thrombin蛋白酶酶切发生在六肽序列的R和G之间，因此在酶切去除GST标签的时候会在目的蛋白的N端留下两个额外的氨基酸残基GS。 通常可以采用如GoldBalb GST-tag Purification Resin(YT958)、GST标签蛋白纯化试剂盒(YT959)、GoldBalb His-tag Purification Resin(YT616)或His标签蛋白纯化试剂盒(YT046)等纯化本质粒表达的目的蛋白，也可以使用GST抗体(YT784/YT722)和His-tag抗体(YT789)检测和少量地分离纯化目的蛋白。 使用说明： 1．使用1μg包装的本产品时，请先取少量本质粒转化，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。 2．100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl，共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。 3．pET-N-GST-Thrombin-C-His质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，构建的质粒可以用常规方法转入表达菌株。 |
产品特点：
低温非冻型保存，不破坏病毒的外壳，方便长途运输。
适用于各种拭子样品，包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽喉拭子、阴道拭子等。
可以用于H1N1流感病毒和其他任何可以用拭子取样的病毒。
可以用柱式病毒DNA提取试剂盒或柱式病毒RNA提取试剂盒提取病毒核酸。
试剂本身安全环保无毒。
储存条件：常温，有效期一年。
使用方法：
注意：标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一容器)。
鼻拭子的采集：将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处，停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中，弃去拭子尾部，拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集：用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，将棉签浸入步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中，弃去拭子尾部，拧紧螺旋盖。
直接在一容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封；每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上，连同一容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二容器)内，拧紧盖，在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本，可以放在同一个二容器内。二容器要承受不少于95 KPa的压力，内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二容器摆放在用运输箱内(或疫苗运输箱)，放入冰排，然后以柔软物质填充，并密封，由人(2人)运送，不得邮寄，好使用车。
采集的标本若不能在24小时内送达，则应尽快在⁻⁷0℃以下保存。无⁻⁷0℃条件的，需在4℃冰箱短时间暂存，并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃～-40℃时不稳定，故长期保存好在⁻⁷0℃温度以下进行。
载玻片细胞NF KAPPA B P50蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次大鼠脂酶A2（PL-A2）ELISA试剂盒,
低温非冻型保存，不破坏病毒的外壳，方便长途运输。
适用于各种拭子样品，包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽喉拭子、阴道拭子等。
可以用于H1N1流感病毒和其他任何可以用拭子取样的病毒。
可以用柱式病毒DNA提取试剂盒或柱式病毒RNA提取试剂盒提取病毒核酸。
试剂本身安全环保无毒。
储存条件：常温，有效期一年。
使用方法：
注意：标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一容器)。
鼻拭子的采集：将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处，停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中，弃去拭子尾部，拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集：用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，将棉签浸入步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中，弃去拭子尾部，拧紧螺旋盖。
直接在一容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封；每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上，连同一容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二容器)内，拧紧盖，在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本，可以放在同一个二容器内。二容器要承受不少于95 KPa的压力，内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二容器摆放在用运输箱内(或疫苗运输箱)，放入冰排，然后以柔软物质填充，并密封，由人(2人)运送，不得邮寄，好使用车。
采集的标本若不能在24小时内送达，则应尽快在⁻⁷0℃以下保存。无⁻⁷0℃条件的，需在4℃冰箱短时间暂存，并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃～-40℃时不稳定，故长期保存好在⁻⁷0℃温度以下进行。
载玻片细胞NF KAPPA B P50蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次大鼠脂酶A2（PL-A2）ELISA试剂盒,
冰冻切片组织NF KAPPA B P50蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次大鼠15脂加氧酶（15-LO/LOX）ELISA试剂盒,
石蜡切片组织NF KAPPA B P50蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次猪主要组织相容性复合体Ⅲ类（MHCⅢ/SLAⅢ）ELISA试剂盒,
载玻片细胞NF KAPPA B P50蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次凋亡蛋白酶激活因子1（Apaf-1）ELISA试剂盒－－动物，人
冰冻切片组织NF KAPPA B P50蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次60%/L蛋白胨肉汤 用于副溶血性弧菌的增菌培养
石蜡切片组织NF KAPPA B P50蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次L-谷氨单钠盐
细胞NF KAPPA B P50蛋白表达比色法定量检测试剂盒10/50 次D-苯丙氨酯盐盐
细胞NF KAPPA B P50蛋白表达荧光定量检测试剂盒10/50 次BOC-L-缬氨
NF KAPPA B P50蛋白表达西方杂交分析试剂盒5次丹参酮Ⅰ Tanshi I
NF KAPPA B P50蛋白免疫共沉淀分析试剂盒5次人血管内皮生长因子D（VEGF-D）ELISA试剂盒,
NF KAPPA B P50蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25次人中期因子（MK）ELISA试剂盒,MK ELISA kit
细胞RHO 蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒10/20次人抗补体1q抗体（C1q）ELISA试剂盒, C1q ELISA kit
载玻片细胞RHO 蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次人免疫反应性生长激素（irGH）ELISA试剂盒,irGH ELISA
冰冻切片组织RHO 蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次人糖原化酶同工酶BB（GP-BB）ELISA试剂盒,GP-BB ELISA
石蜡切片组织RHO 蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次人血红蛋白β亚（HB-β）ELISA试剂盒,
DRD4 多巴受体D4抗体二氢 99%
DRD5/Dopamine Receptor D5 多巴受体D5抗体二氢 Kosher, FCC, ≥99%
DBC1 膀胱癌缺失因1二苄 97%
Phospho-DBC1 (Thr454) 化膀胱癌缺失因1二苄 ≥98%, FCC
DBH 多巴β羟化酶抗体正癸 ≥98%, FCC, FG
DCC 结肠直肠癌缺失因抗体癸 natural, ≥92%
DCIR/CLEC4A C型凝集素结构域家族4成员A抗体庚酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)
DCN/Decorin 核心蛋白聚糖抗体庚酯 CP,97%
pET-N-GST-Thrombin-C-His质粒英文名称：L-Proline；L-2-Pyrrolidinecarboxylic acid；(S)-Pyrrolidine-2-carboxylic acid；H-Pro-OH
pET-N-GST-Thrombin-C-His质粒英文名称：L-Proline；L-2-Pyrrolidinecarboxylic acid；(S)-Pyrrolidine-2-carboxylic acid；H-Pro-OH
其他名称：L-氢化吡咯甲酸；L-吡咯烷-2-羧酸；四氢吡咯-2-羧酸
CAS号：147-85-3
C5H9NO2=115.13
别：BR
含量：≥99.0%
比旋光度：-84.5～-86.8º
PH：5.5～7.0
操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
热门标签：pET-N-GST-Thrombin-C-His质粒
相关文章
相关产品
-
-
-
-
电议
-
电议
