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pET-Dual-N-GST质粒
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/11/5 9:41:34
产品摘要：pET-Dual-N-GST质粒正在出售的产品：Oleanolic acid-3-O-β-D-glucopyranosyl (1→2)-α-L-arabinopyranoside盐酸去氢骆驼蓬碱B2高效液相色谱法定量检测试剂盒
Sapindoside A盐酸
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详细内容
产品属性：
中文名称：pET-Dual-N-GST质粒
英文名称：pET-Dual-N-GST Plasmid
产品规格：1μg|100μg
产品货号：GOY-F11023
中文名称：pET-Dual-N-GST质粒
英文名称：pET-Dual-N-GST Plasmid
产品规格：1μg|100μg
产品货号：GOY-F11023
| pET-Dual-N-GST是一种用于在中高效共表达两种目的蛋白的质粒，其中一种蛋白可以带上GST标签(Glutathione S-transferase tag,GST tag)。本质粒包含两个多克隆位点(MCS)，每个多克隆位点都有一个T7启动子/lac操作子和一个核糖体结合位点(rbs)，因此都可以在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的诱导下高效启动目的蛋白的表达。本质粒为氨苄青抗性。 在共表达两个蛋白的复合物时，通常宜把较难表达的基因克隆到第yi个多克隆位点，并在其N端引物设计时加入PreScission蛋白酶识别的八肽序列(LEVLFQGP)，宜把较易表达的基因克隆到第二个多克隆位点。这样通过GST柱纯化，可分离纯化获得带有GST标签的蛋白复合物，配合使用生产的PreScission Protease4℃酶切过夜，第二天收集穿柱液即可获得蛋白复合物，这为后续进行蛋白复合物的功能检测、蛋白结晶等工作带来了大的便利。PreScission蛋白酶酶切发生在八肽序列的Q和G之间，因此在酶切去除GST标签的时候会在目的蛋白的N端留下两个额外的氨基酸残基GP。当然，本质粒也可以只在第yi个多克隆位点插入目的基因，这样就会仅表达一个含有N端GST标签的目的蛋白。 使用说明： 1．使用1μg包装的本产品时，请先取少量本质粒转化，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。 2．100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl，共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。 3．pET-Dual-N-GST质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，构建的质粒可以用常规方法转入表达菌株。 |
注意事项：
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后，轻摇时*与细胞充分接触，然后倒掉大部分*，利用剩余的少量*再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞，比如在检测凋亡的同时检测细胞周期，只能选用Annexin V-FITC，而不能选用Annexin V-EGFP，因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育，并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片，可以和Annexin V结合，对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后，轻摇时*与细胞充分接触，然后倒掉大部分*，利用剩余的少量*再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞，比如在检测凋亡的同时检测细胞周期，只能选用Annexin V-FITC，而不能选用Annexin V-EGFP，因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育，并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片，可以和Annexin V结合，对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。
实验要点:
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2．在适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的异戊醇（*—异戊醇=25:24:1），异戊醇的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
TNF BETA蛋白表达西方杂交分析试剂盒5次Fmoc-L-天冬酰
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2．在适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的异戊醇（*—异戊醇=25:24:1），异戊醇的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
TNF BETA蛋白表达西方杂交分析试剂盒5次Fmoc-L-天冬酰
TNF BETA蛋白免疫共沉淀分析试剂盒5次开环异落叶松树脂酚 Secoisolariciresinol
TNF BETA蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25次人菌抗体IgG（Brucella Ab IgG）ELISA试剂盒,Brucella Ab I
载玻片细胞NF KAPPA B P65蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次人游离状腺素（FT4）ELISA试剂盒,FT4 ELISA
冰冻切片组织NF KAPPA B P65蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次人1,5-脱水葡萄糖醇/1,5-脱水山梨（1,5-AG）ELISA试剂盒,1,5-AG ELISA
石蜡切片组织NF KAPPA B P65蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次人尿嘧啶核苷化酶1（UPP1）ELISA试剂盒,UPP1 ELISA
载玻片细胞NF KAPPA B P65蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次人N-酰-β-D-氨葡萄糖苷酶（NAG）ELISA试剂盒,
冰冻切片组织NF KAPPA B P65蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次人L-乳脱氢酶（L-LDH）ELISA试剂盒,
石蜡切片组织NF KAPPA B P65蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次人免疫球蛋白E（IgE）ELISA试剂盒,
细胞NF KAPPA B P65蛋白表达比色法定量检测试剂盒10/50 次人不透光相关蛋白（OPAs）ELISA试剂盒,
细胞NF KAPPA B P65蛋白表达荧光定量检测试剂盒10/50 次小鼠葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽（GIP）ELISA试剂盒,
NF KAPPA B P65蛋白表达西方杂交分析试剂盒5次大鼠L-鼠乳脱氢酶（L-LDH） ELISA试剂盒,
NF KAPPA B P65蛋白免疫共沉淀分析试剂盒5次大鼠脂多糖结合蛋白（LBP）ELISA试剂盒,
NF KAPPA B P65蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25次大鼠Toll样受体4（TLR4）ELISA试剂盒,
细胞NF KAPPA B P50蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒10/20次大鼠游离列腺特异性抗原（fPSA）ELISA试剂盒,
DACH2 转录调节因子DACH2抗体正癸 98%
DARPP32 多巴、cAMP调节蛋白抗体琥珀二酯 98%
Phospho-DARPP32 (Thr34) 化多巴/cAMP调节神经蛋白抗体琥珀二酯 99%
Phospho-DARPP32 (Thr75) 化多巴/cAMP调节蛋白抗体琥珀二酯 standard for GC, ≥99.6% (GC)
DRD1 多巴受体D1抗体癸二二酯 98%
DRD2 多巴受体D2抗体癸二二酯 standard for GC
DRD3 多巴受体D3抗体癸 97%
DAT1 多巴转运蛋白抗体癸 ≥95%, FCC, Kosher
pET-Dual-N-GST质粒C8H9NO2=151.16
pET-Dual-N-GST质粒C8H9NO2=151.16
别：BR
含量：≥98.0%
熔点：～290℃
性状(以下信息仅供参考)：结晶性粉末
用途：本品仅供科研，不得用于其它用途
保存：RT
L-脯氨酸
热门标签：pET-Dual-N-GST质粒
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