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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

第10年

当前位置: 阿仪网 > 上海谷研实业有限公司 > 产品展示 > 分子试剂 > 克隆与表达 > pET-N-His-TEV质粒

pET-N-His-TEV质粒

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/11/5 9:41:34

产品摘要:pET-N-His-TEV质粒公司正在热销的产品:蟾酥;华蟾酥基;华蟾精(标准品)细辛脑牛奶A含量比色法定量检测试剂盒
客西茄碱(标准品)细辛鱼肝油A含量比色法定量检测试剂盒
女贞苷(标准品)仙茅苷通用型A含量荧光定量检测试剂盒
夏佛塔苷(标准品)相

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产品完善度: 访问次数:538

试剂盒

ATCC细胞

标准品

RNA/DNA提取

生化试剂

菌种

培养基

elisa试剂盒

PCR检测试剂盒

生化检测试剂盒

原代细胞

质粒

荧光PCR试剂盒

细胞生物学试剂

分子试剂

细胞系

细胞培养基

抗体

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旗舰版网址:http://www.elisaguyan.com

详细内容

产品特点:
低温非冻型保存,不破坏病毒的外壳,方便长途运输。
适用于各种拭子样品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽喉拭子、阴道拭子等。
可以用于H1N1流感病毒和其他任何可以用拭子取样的病毒。
可以用柱式病毒DNA提取试剂盒或柱式病毒RNA提取试剂盒提取病毒核酸。
试剂本身安全环保无毒。
储存条件:常温,有效期一年。
下列是产品的订购信息!
中文名称
英文名称
产品规格
货号
pET-N-His-TEV质粒
pET-N-His-TEV Plasmid
1μg|100μg
GOY-F11020

产品说明书:
pET-N-His-TEV是一种用于表达N端含有His标签(His tag)的原核表达质粒。本质粒N端His标签后含有TEV酶切位点,可通过TEV Protease切除N端的His标签。本质粒为卡那抗性。
本质粒含有T7启动子/lac操纵子,可以在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的诱导下高效启动目的蛋白表达。在多克隆位点的面,带有一个His标签的编码序列,含有6个组(6X His)。因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有His标签的目的蛋白。
本载体在N端His标签与多克隆位点之间含有TEV蛋白酶(TEV Protease)识别的七肽序列ENLYFQG,对应的核酸序列为GAGAACCTGTACTTCCAAGGG,因此可在目的蛋白纯化后用TEV蛋白酶切除N端His标签。TEV蛋白酶酶切发生在七肽序列的Q和G之间,因此在酶切去除His标签的时候目的蛋白的N端会留下一个额外的氨基酸残基G。
通常可以采用如GoldBalb His-tag Purification Resin或His标签蛋白纯化试剂盒等纯化本质粒表达的目的蛋白,也可以使用His-tag抗体检测和少量地分离纯化目的蛋白。
使用说明:
1.使用1μg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2.100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl,共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。
3.pET-N-His-TEV质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,构建的质粒可以用常规方法转入表达菌株。
使用方法:
注意:标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一容器)。
鼻拭子的采集:将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集:用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将棉签浸入步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
直接在一容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封;每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上,连同一容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二容器)内,拧紧盖,在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本,可以放在同一个二容器内。二容器要承受不少于95 KPa的压力,内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二容器摆放在用运输箱内(或疫苗运输箱),放入冰排,然后以柔软物质填充,并密封,由人(2人)运送,不得邮寄,好使用车。
采集的标本若不能在24小时内送达,则应尽快在⁻⁷0℃以下保存。无⁻⁷0℃条件的,需在4℃冰箱短时间暂存,并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃~-40℃时不稳定,故长期保存好在⁻⁷0℃温度以下进行。
操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
细胞CASPASE-10蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒10/20次大鼠可溶性血管粘附分子1(sVCAM-1)ELISA试剂盒,
载玻片细胞CASPASE-10蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次大鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒,
冰冻切片组织CASPASE-10蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒,
石蜡切片组织CASPASE-10蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次大鼠β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)ELISA试剂盒,
载玻片细胞CASPASE-10蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次猪B淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA试剂盒,
冰冻切片组织CASPASE-10蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次骆驼脂蛋白脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒,
石蜡切片组织CASPASE-10蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次山羊肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒,
细胞CASPASE-10蛋白表达比色法定量检测试剂盒10/50 次兔子组(HIS)ELISA试剂盒,
细胞CASPASE-10蛋白表达荧光定量检测试剂盒10/50 次兔子间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA试剂盒,
CASPASE-10蛋白表达西方杂交分析试剂盒5次神经保护因子(CVNPF)ELISA试剂盒--动物,人
CASPASE-10蛋白免疫共沉淀分析试剂盒5次腊样芽胞杆菌选择琼脂础用于腊样芽胞杆菌选择性分离培养
CASPASE-10蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25次贝母素 Peiminine
细胞MYC蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒10/20次L-天冬氨二酯盐盐
载玻片细胞MYC蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次L-精氨酯
冰冻切片组织MYC蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次Fmoc-D-天冬酰
Cyclin F 周期素F抗体正丁 ≥99.9%, FCC
Cyclin G 周期素G抗体水杨丁酯 99%
Cyclin H 周期素H抗体丁酯 ≥99%, FCC
Cystatin 3/CST3 胱抑素C/半胱氨蛋白酶抑制剂C抗体苯缩 98%
Cytoglobin 球蛋白抗体苯缩 98%, Kosher
CYLD 微管结合蛋白CYLD抗体香茅 98%
phospho-CYLD(Ser418) 化微管结合蛋白CYLD抗体香茅 分析标准品, ≥99.0% (GC)
CYP1A1 色素P450 1A1抗体丁香油 CP
pET-N-His-TEV质粒比旋光度:+25±1°(c = 1% in ethanol)
熔点:85~88℃
层析:合格
性状(以下信息仅供参考):结晶性粉末
用途:本品仅供科研,不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)用于蛋白质及多肽等的合成
保存:RT
L-苯甘氨酸
英文名称:L-Phenylglycine;L-(+)-α-Aminophenylacetic acid ;H-Phg-OH;(S)-(+)-2-Phenylglycine;S(+)-α-Aminophenylacetic acid;L-2-Phenylglycine

热门标签:pET-N-His-TEV质粒

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