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His和SUMO双标签质粒
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/11/5 9:41:34
产品摘要：His和SUMO双标签质粒正在出售的产品：胶原蛋白(I型)麦冬皂苷B植物总淀粉生物酶比色法定量检测试剂盒
维替泊芬麦冬皂苷D
Biotin HPDP；N-(6-[生物素]己基)-3´-(2´-吡啶二硫)酰芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷通用型总淀粉化学
维替泊芬麦冬皂苷D
Biotin HPDP；N-(6-[生物素]己基)-3´-(2´-吡啶二硫)酰芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷通用型总淀粉化学
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详细内容
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
产品属性：
中文名称：His和SUMO双标签质粒
英文名称：pET-N-His-PreScission-SUMO
产品规格：1μg|100μg
产品货号：GOY-F11007
1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
产品属性：
中文名称：His和SUMO双标签质粒
英文名称：pET-N-His-PreScission-SUMO
产品规格：1μg|100μg
产品货号：GOY-F11007
| 本制品是一种用于表达N端同时含有His标签(His tag)和SUMO标签(SUMO tag)双标签的目的蛋白的原核表达质粒。His标签有利于通过亲和层析方法进行目的蛋白的纯化，而SUMO标签则有利于改善目的蛋白的折叠，增加目的蛋白可溶性和产量。表达后的含有目的蛋白的融合蛋白可以通过PreScission蛋白酶酶切去除His标签但保留SUMO标签，也可以通过SUMO Protease 酶切去除N端的His和SUMO两个标签。本质粒为卡那抗性。 如果通过无缝克隆技术(Seamless Cloning Kit，无缝克隆试剂盒)在SUMO标签酶切位点后插入目的蛋白ATG起始的序列，SUMO Protease酶切后，可以确保表达的目的蛋白氨基端(N端)刚好从甲硫(Methione)开始，不会增加或减少任何一个氨基酸，实现目的蛋白的正确表达。 本质粒含有T7启动子/lac操纵子，可以在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的诱导下高效启动目的蛋白表达。在多克隆位点根据读码框插入目的基因就可以表达N端含有His和SUMO双标签的目的蛋白。 本载体在N端His标签后含有PreScission Protease识别的八肽序列LEVLFQGP，因此在目的蛋白纯化后可以利用PreScission Protease酶切除去N端的His标签，但在SUMO融合蛋白的N端还会保留两个额外的氨基酸GP。在用SUMO Protease酶切除去SUMO标签的时候，SUMO Protease识别的是SUMO蛋白的空间结构，通过无缝克隆的方式在CAGATTGGTGGA (对应氨基酸为QIGG)序列后插入目的蛋白的基因序列，在用SUMO Protease进行酶切的时候，其正好在QIGG后产生酶切，因此可以产生不带任何额外氨基酸的目的蛋白，而这是很多做蛋白结构和功能研究的研究人员所梦寐以求的。 可以采用如His-tag Purification Resin(耐还原螯合型) /His标签蛋白纯化试剂盒(耐还原螯合型) (货号YT046)以及His-tag Purification Resin(变性剂耐受型) /His标签蛋白纯化试剂盒(变性剂耐受型)等纯化本质粒表达的目的蛋白，也可以使用His-tag抗体检测或少量分离纯化目的蛋白。 使用说明： 使用1μg包装的本产品时，请先取少量本质粒转化，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。 100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl，共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。 pET-N-His-PreScission-SUMO质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，或者也可以同无缝克隆技术在SUMO标签之后插入目的基因，构建的质粒可以用常规方法转入表达菌株进行表达纯化。 |
实验要点:
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2．在适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的异戊醇（*—异戊醇=25:24:1），异戊醇的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
PAR-2蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25次人新生儿促状腺素（N-TSH）ELISA试剂盒,
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2．在适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的异戊醇（*—异戊醇=25:24:1），异戊醇的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
PAR-2蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25次人新生儿促状腺素（N-TSH）ELISA试剂盒,
?细胞PAR-3蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒10/20次人血小板相关补体3（PAC3）ELISA试剂盒,
载玻片细胞PAR-3蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次人质裂解蛋白/质溶素（MAT）ELISA试剂盒,
冰冻切片组织PAR-3蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次人空泡素相关蛋白A（VacA）ELISA试剂盒,
石蜡切片组织PAR-3蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次人玻连蛋白/体外粘连蛋白（VN/CD51+CD61）ELISA试剂盒,
载玻片细胞PAR-3蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次小鼠神经生长因子（NGF）ELISA试剂盒,
冰冻切片组织PAR-3蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次小鼠γ干扰素诱导蛋白16/p16（IFI16/p16）ELISA试剂盒,
石蜡切片组织PAR-3蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次大鼠8羟脱氧鸟苷（8-OHdG）ELISA试剂盒,
细胞PAR-3蛋白表达比色法定量检测试剂盒10/50 次大鼠糖皮质激素受体β（GR-β）ELISA试剂盒,
细胞PAR-3蛋白表达荧光定量检测试剂盒10/50 次大鼠αL岩藻糖苷酶（AFU）ELISA试剂盒,
PAR-3蛋白表达西方杂交分析试剂盒5次大鼠状旁腺激素（PTH） ELISA试剂盒,
PAR-3蛋白免疫共沉淀分析试剂盒5次大鼠性成纤维生长因子9（bFGF-9）ELISA试剂盒,
PAR-3蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25次兔乳铁传递蛋白/乳铁蛋白（LF/LTF）ELISA试剂盒,
细胞PARP蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒10/20次兔子主要组织相容性复合体Ⅲ类（MHCⅢ/RLAⅢ）ELISA试剂盒,
载玻片细胞PARP蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次家蚕卵黄蛋白（LT） ELISA试剂盒,
phospho C-Met/HGFR(Tyr1365) 化原癌因c-Met抗体三酰 98%
c-Myc tag c-Myc tag标签抗体特戊酰 98%
AU5 tag AU5 tag标签抗体正戊酰 98%
AU1 tag AU1 tag标签抗体 AR,98%
Glu-Glu tag抗体 GCS, ≥99.5% (GC)
E Tag E Tag标签抗体 GR,99%
CNGA2 环核苷阳离子通道蛋白α2抗体 分析标准品
CANX 钙连蛋白抗体碳化 1-200目,98%
His和SUMO双标签质粒C5H11NO2S=149.21
His和SUMO双标签质粒C5H11NO2S=149.21
别：BR
含量：≥99.0%
比旋光度：+23.0～+24.0º
PH：5.6～6.1
干燥失重：≤0.2%
灼烧残渣：≤0.10%
氯化物：≤0.02%
注意事项：
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后，轻摇时*与细胞充分接触，然后倒掉大部分*，利用剩余的少量*再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞，比如在检测凋亡的同时检测细胞周期，只能选用Annexin V-FITC，而不能选用Annexin V-EGFP，因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育，并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片，可以和Annexin V结合，对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。
注意事项：
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后，轻摇时*与细胞充分接触，然后倒掉大部分*，利用剩余的少量*再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞，比如在检测凋亡的同时检测细胞周期，只能选用Annexin V-FITC，而不能选用Annexin V-EGFP，因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育，并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片，可以和Annexin V结合，对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。
热门标签：His和SUMO双标签质粒
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