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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

第10年

当前位置: 阿仪网 > 上海谷研实业有限公司 > 产品展示 > 分子试剂 > 克隆与表达 > BL21-Star(DE3)pLysS化学感受态细胞

BL21-Star(DE3)pLysS化学感受态细胞

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/11/5 9:41:34

产品摘要:BL21-Star(DE3)pLysS化学感受态细胞公司正在热销的产品:DAPT (GSI-IX)吉马酮异柠檬酸待测样品处理试剂盒
赤芝酸E甲基莲心碱酒类D-苹果酸比色法定量检测试剂盒
利克飞龙甲壳素饮料D-苹果酸比色法定量检测试剂盒
灵芝烯酸C

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产品完善度: 访问次数:580

试剂盒

ATCC细胞

标准品

RNA/DNA提取

生化试剂

菌种

培养基

elisa试剂盒

PCR检测试剂盒

生化检测试剂盒

原代细胞

质粒

荧光PCR试剂盒

细胞生物学试剂

分子试剂

细胞系

细胞培养基

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详细内容

下列是产品的订购信息!
中文名称
英文名称
产品规格
货号
BL21-Star(DE3)pLysS化学感受态细胞
BL21-Star(DE3)pLysS Chemically Competent Cell
10×100μl|50×100μl
GOY-F11002

产品说明书:
BL21 Star(DE3)pLysS菌株来源于BL21(DE3),含有rne131突变(RNaseE基因),RNaseE基因的突变降低了內源RNase的积累,增菌株细胞内mRNA的稳定性,从而提高异源蛋白的表达水平。
主要适用于T7启动子表达载体(如 pET系列)的高水平蛋白表达,同时含有RNA聚合酶,也可用于非 T7启动子表达载体(pGEX,pMAL等)的蛋白表达。由于BL21 Star(DE3)菌株的异源基因基础表达水平较高,所以不适合毒性蛋白的表达。BL21 Star(DE3)pLysS菌株携带pLysS质粒,具有氯抗性。pLysS含有表达T7的基因,T7可以作用于细胞壁上的肽聚糖溶解,还可与T7 RNA聚合酶结合抑制其转录活性,进而降低目的基因的背景表达水平,但不干扰IPTG诱导的表达。pLysS质粒含有p15A复制起始子,可以和含有pUC或pBR322等复制起始子的质粒兼容。
BL21 Star(DE3)pLysS感受态细胞由特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率达107 cfu/μg DNA。
保存条件:-80℃
基因型:
F-ompT hsdSB(rB-mB-)gal dcm rne131(DE3)pLysS(CamR)
操作说明:
1.BL21 Star(DE3)pLysS感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的质粒并用手拨打EP管底轻轻混匀,冰中静置25分钟。
2.42℃水浴热激45,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4.5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项:
1.感受态细胞好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2.混入质粒时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。
4.诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。
5.为获得需要量的蛋白,佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。
6.BL21 Star(DE3)pLysS菌株携带pLysS质粒,除复苏培养基为无抗生素外,其余所用培养基、培养液均应含有34μg/ml氯,以防质粒丢失。
产品特点:
低温非冻型保存,不破坏病毒的外壳,方便长途运输。
适用于各种拭子样品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽喉拭子、阴道拭子等。
可以用于H1N1流感病毒和其他任何可以用拭子取样的病毒。
可以用柱式病毒DNA提取试剂盒或柱式病毒RNA提取试剂盒提取病毒核酸。
试剂本身安全环保无毒。
储存条件:常温,有效期一年。
使用方法:
注意:标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一容器)。
鼻拭子的采集:将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集:用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将棉签浸入步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
直接在一容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封;每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上,连同一容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二容器)内,拧紧盖,在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本,可以放在同一个二容器内。二容器要承受不少于95 KPa的压力,内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二容器摆放在用运输箱内(或疫苗运输箱),放入冰排,然后以柔软物质填充,并密封,由人(2人)运送,不得邮寄,好使用车。
采集的标本若不能在24小时内送达,则应尽快在⁻⁷0℃以下保存。无⁻⁷0℃条件的,需在4℃冰箱短时间暂存,并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃~-40℃时不稳定,故长期保存好在⁻⁷0℃温度以下进行。
细胞CDK6蛋白表达荧光定量检测试剂盒10/50 次生长激素结合蛋白(P)ELISA试剂盒--动物,人
CDK6蛋白表达西方杂交分析试剂盒5次蔗糖琼脂
CDK6蛋白免疫共沉淀分析试剂盒5次T1N3 肉汤
CDK6蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25次多粘菌素E添于100ml HB4171中
细胞P16蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒10/20次L-鸟氨盐盐
载玻片细胞P16蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次葡聚糖T6
冰冻切片组织P16蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次人钩端螺旋体IgG(Lep IgG)ELISA试剂盒,Lep IgG ELISA
石蜡切片组织P16蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次人尿激酶型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)ELISA试剂盒,
载玻片细胞P16蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次人抗着丝点抗体(ACA/CENP)ELISA试剂盒,
冻切片组织P16蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次小鼠己糖激酶(HK)ELISA试剂盒,
石蜡切片组织P16蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次小鼠可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA试剂盒,
细胞P16蛋白表达比色法定量检测试剂盒10/50次大鼠多巴D2受体(D2R)ELISA试剂盒,
细胞P16蛋白表达荧光定量检测试剂盒10/50次大鼠巨噬炎症蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒,
P16蛋白表达西方杂交分析试剂盒5次大鼠心钠肽(Pro-ANP)ELISA试剂盒,
P16蛋白免疫共沉淀分析试剂盒5次大鼠皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒,
CK18 角蛋白18抗体(C端)L-丝氨酯盐盐 98%
CK18 角蛋白18抗体L-酪氨酯 98%
CK14/17/42/10 角蛋白14抗体L-酪氨酯盐盐 98%
CK15 角蛋白15抗体L-酪氨苄酯对苯磺盐 98%
CK16 角蛋白16抗体L-缬氨苄酯对苯磺盐 98%
CK17 角蛋白17抗体L-缬氨酯盐盐 99%
Phospho-Cytokeratin 17 (Ser44) 化角蛋白17抗体N-苄氧羰-L-苏氨 98%
CK19 角蛋白19抗体N-苄氧羰-L-脯氨 98%
BL21-Star(DE3)pLysS化学感受态细胞含量:≥99.0%
比旋光度:-20.5~21.5° (c=8, 6N HCl)
性状(以下信息仅供参考):白色或类白色结晶性粉末。溶于水
用途:本品仅供科研,不得用于其它用途
保存:RT,避光
DL-赖氨酸
英文名称:DL-Lysine;(±)-2,6-Diaminohexanoic acid
其他名称:DL-2,6-二氨基己酸;(±)-2,6-二氨基己酸
操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。

热门标签:BL21-Star(DE3)pLysS化学感受态细胞

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