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Rosetta-gami B(DE3)化学感受态细胞
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/11/5 9:41:34
产品摘要：Rosetta-gami B(DE3)化学感受态细胞公司正在热销的产品：延胡索酸/富马酸/ 反二酸何乌苷饮料三比色法定量检测试剂盒
盐酸肾上腺素黑介子苷调料三比色法定量检测试剂盒
盐酸肾上腺素(标准品)衡州乌药灵日化品三比色法定量检测试剂盒
甲磺
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详细内容
产品特点：
低温非冻型保存，不破坏病毒的外壳，方便长途运输。
适用于各种拭子样品，包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽喉拭子、阴道拭子等。
可以用于H1N1流感病毒和其他任何可以用拭子取样的病毒。
可以用柱式病毒DNA提取试剂盒或柱式病毒RNA提取试剂盒提取病毒核酸。
试剂本身安全环保无毒。
储存条件：常温，有效期一年。
下列是产品的订购信息!
低温非冻型保存，不破坏病毒的外壳，方便长途运输。
适用于各种拭子样品，包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽喉拭子、阴道拭子等。
可以用于H1N1流感病毒和其他任何可以用拭子取样的病毒。
可以用柱式病毒DNA提取试剂盒或柱式病毒RNA提取试剂盒提取病毒核酸。
试剂本身安全环保无毒。
储存条件：常温，有效期一年。
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| 中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
| Rosetta-gami B(DE3)化学感受态细胞 | Rosetta-gami B(DE3)Chemically Competent Cell | 10×100μl|50×100μl | GOY-F10998 |
产品说明书：
| Rosetta-gami B(DE3)菌株聚合了BL21，Tuner，Origami和Rosetta四种菌株的优点： lacY1基因(半乳糖苷透性酶基因)突变赋予其Tuner菌株的优点——IPTG以均一速度进入体系中的每个细胞，产生更加严格、均一的浓度依赖。 pRARE赋予其Rosetta菌株的优点——补充缺乏的6种稀有密码子(AUA，AGG，AGA，CUA，CCC，GGA)对应的tRNA，提高外源基因的表达水平。 gor522::Tn10 trxB赋予其Origami菌株的优点——突变的硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase)(trxB)和还原酶(glutathione reductase)(gor)基因，它们是还原途径的两个关键酶，其突变有利于高效形成正确折叠的含有二硫键的蛋白，增蛋白的可溶性。 该菌株染色体整合了λDE3区(DE3区含有T7RNA聚合酶)适合 T7启动子诱导的蛋白表达。 Rosetta-gamiB(DE3)菌株具有卡那，氯，四环素抗性，由特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率高达108 cfu/μg DNA。 保存条件：-80℃ 基因型： F-ompT hsdSB(rB-mB-)gal dcm lacY1 ahpC(DE3)gor522::Tn10 trxB pRARE(Camr，Kanr，Tetr) 操作说明： 1.Rosetta-gamiB(DE3)菌株感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。 2.42℃水浴热激45，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。 3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB)，混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。 4.5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含34 μg/ml氯及所选质粒筛选抗生素的2YT或LB培养基上。 5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。 注意事项： 1.感受态细胞好在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。 2.混入质粒时应轻柔操作。 3.转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。 4.诱导时，IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。 5.为获得需要量的蛋白，佳诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化。 6.具有卡那抗性，不能用于具有卡那抗性质粒的表达。 lacY1基因(半乳糖苷透性酶基因)突变赋予其Tuner菌株的优点——IPTG以均一速度进入体系中的每个细胞，产生更加严格、均一的浓度依赖。 pRARE赋予其Rosetta菌株的优点——补充缺乏的6种稀有密码子(AUA，AGG，AGA，CUA，CCC，GGA)对应的tRNA，提高外源基因的表达水平。 gor522::Tn10 trxB赋予其Origami菌株的优点——突变的硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase)(trxB)和还原酶(glutathione reductase)(gor)基因，它们是还原途径的两个关键酶，其突变有利于高效形成正确折叠的含有二硫键的蛋白，增蛋白的可溶性。 |
使用方法：
注意：标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一容器)。
鼻拭子的采集：将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处，停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中，弃去拭子尾部，拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集：用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，将棉签浸入步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中，弃去拭子尾部，拧紧螺旋盖。
直接在一容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封；每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上，连同一容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二容器)内，拧紧盖，在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本，可以放在同一个二容器内。二容器要承受不少于95 KPa的压力，内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二容器摆放在用运输箱内(或疫苗运输箱)，放入冰排，然后以柔软物质填充，并密封，由人(2人)运送，不得邮寄，好使用车。
采集的标本若不能在24小时内送达，则应尽快在⁻⁷0℃以下保存。无⁻⁷0℃条件的，需在4℃冰箱短时间暂存，并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃～-40℃时不稳定，故长期保存好在⁻⁷0℃温度以下进行。
操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
?细胞COLLAGEN III蛋白表达荧光定量检测试剂盒10/50 次人胎盘核糖核抑止剂（HPRI）ELISA试剂盒,
注意：标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一容器)。
鼻拭子的采集：将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处，停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中，弃去拭子尾部，拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集：用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，将棉签浸入步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中，弃去拭子尾部，拧紧螺旋盖。
直接在一容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封；每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上，连同一容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二容器)内，拧紧盖，在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本，可以放在同一个二容器内。二容器要承受不少于95 KPa的压力，内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二容器摆放在用运输箱内(或疫苗运输箱)，放入冰排，然后以柔软物质填充，并密封，由人(2人)运送，不得邮寄，好使用车。
采集的标本若不能在24小时内送达，则应尽快在⁻⁷0℃以下保存。无⁻⁷0℃条件的，需在4℃冰箱短时间暂存，并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃～-40℃时不稳定，故长期保存好在⁻⁷0℃温度以下进行。
操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
?细胞COLLAGEN III蛋白表达荧光定量检测试剂盒10/50 次人胎盘核糖核抑止剂（HPRI）ELISA试剂盒,
?COLLAGEN III蛋白表达西方杂交分析试剂盒5次人淋巴功能相关抗原3（LFA-3/CD58）ELISA试剂盒,
COLLAGEN III蛋白免疫共沉淀分析试剂盒5次人载脂蛋白A1（apo-A1）ELISA试剂盒,
COLLAGEN III蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25次小鼠白介素10（IL-10）ELISA试剂盒,
细胞APC蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒10/20次小鼠抗状腺过氧化物酶抗体（TPO-Ab）ELISA试剂盒,
载玻片细胞APC蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次小鼠谷氨脱羧酶自身抗体（GAD-Ab）ELISA试剂盒,
冰冻切片组织APC蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次小鼠热休克蛋白70（HSP⁻⁷0）ELISA试剂盒,
石蜡切片组织APC蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次大鼠甘露糖结合蛋白/甘露糖结合凝集素（MBP/MBL）ELISA试剂盒,
载玻片细胞APC蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次大鼠CD8分子（CD8）ELISA试剂盒,
冰冻切片组织APC蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次大鼠N-酰-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨（AcSDKP）ELISA试剂盒,
石蜡切片组织APC蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次大鼠列腺素E2（PGE2）ELISA试剂盒,
细胞APC蛋白表达比色法定量检测试剂盒10/50 次豚鼠转化生长因子β1（TGF-β1）ELISA试剂盒,
细胞APC蛋白表达荧光定量检测试剂盒10/50 次猪肠三叶因子（ITF）ELISA试剂盒,
APC蛋白表达西方杂交分析试剂盒5次猪C反应蛋白（CRP）ELISA试剂盒,
APC蛋白免疫共沉淀分析试剂盒5次马β淀粉样蛋白1-40（Aβ1-40）ELISA试剂盒,
CGRP CGRP降钙素因相关肽抗体山梨 >99.0%(T)
ChAT ChAT胆酰转移酶抗体2-吡啶 98%
CHK1 周期检测点激酶1抗体3-吡啶 99%
CHK2 周期检测点激酶2抗体4-吡啶 98%
Phospho-CHK2 (Thr68) 化周期检测点激酶2抗体山梨 AR，99%
Chloramphenicol 霉素抗体山梨 CP，99%
Gentamicin 庆大霉素抗体山梨 分析标准品
Tetracycline 四环素抗体山梨标准溶液 1.00mg/mL，体：纯水
Rosetta-gami B(DE3)化学感受态细胞其他名称：(S)-2,6-二氨基己酸盐酸盐；L-盐酸赖氨酸；L-氢氯赖氨酸
Rosetta-gami B(DE3)化学感受态细胞其他名称：(S)-2,6-二氨基己酸盐酸盐；L-盐酸赖氨酸；L-氢氯赖氨酸
CAS号：657-27-2
C6H14N2O2•HC1=182.65
别：BR
含量：≥99.0%
比旋光度：+20.4～+21.4º
鉴别：合格
干燥失重：≤0.40%
热门标签：Rosetta-gami,B(DE3)化学感受态细胞
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