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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

第10年

当前位置: 阿仪网 > 上海谷研实业有限公司 > 产品展示 > 分子试剂 > 克隆与表达 > OrigamiB(DE3)化学感受态细胞

OrigamiB(DE3)化学感受态细胞

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/11/5 9:41:34

产品摘要:OrigamiB(DE3)化学感受态细胞公司正在热销的产品:Sulfo NHS;N-羟基硫代琥珀酰亚高车苷食物甲酸比色法定量检测试剂盒
亚甲兰,亚甲基蓝高车素果菜甲酸比色法定量检测试剂盒
盐酸沃尼妙林高乌甲素调料甲酸比色法定量检测试剂盒
钠

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产品完善度: 访问次数:623

试剂盒

ATCC细胞

标准品

RNA/DNA提取

生化试剂

菌种

培养基

elisa试剂盒

PCR检测试剂盒

生化检测试剂盒

原代细胞

质粒

荧光PCR试剂盒

细胞生物学试剂

分子试剂

细胞系

细胞培养基

抗体

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详细内容

下列是产品的订购信息!
中文名称
英文名称
产品规格
货号
OrigamiB(DE3)化学感受态细胞
OrigamiB(DE3)Chemically Competent Cell
10×100μl|50×100μl
GOY-F10996

产品说明书:
OrigamiB(DE3)感受态细胞包含突变的硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase)(trxB)和还原酶(glutathione reductase)(gor)基因,表达主要还原途径的两个关键酶。有利于形成正确折叠的含有二硫键的蛋白,增蛋白的可溶性。
该菌株染色体整合了λDE3区(DE3区含有T7RNA聚合酶),可同时表达T7 RNA聚合酶和RNA聚合酶,可用于pET系列,pGEX,pMAL等质粒的蛋白表达,具有卡那和四环素抗性,不能用于具有卡那抗性质粒的表达。
OrigamiB(DE3)感受态细胞由特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率达108cfu/μg。
保存条件:-80℃
基因型:
F-ompT hsdSB(rB-mB-)gal dcm lacY1 ahpC(DE3)gor522::Tn10 trxB(KanR,TetR)
操作说明:
1.取100μl冰上融化的OrigamiB(DE3)感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项:
1.感受态细胞好在冰上融化。
2.混入质粒时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。
4.诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。
5.为获得需要量的蛋白,佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。
产品特点:
低温非冻型保存,不破坏病毒的外壳,方便长途运输。
适用于各种拭子样品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽喉拭子、阴道拭子等。
可以用于H1N1流感病毒和其他任何可以用拭子取样的病毒。
可以用柱式病毒DNA提取试剂盒或柱式病毒RNA提取试剂盒提取病毒核酸。
试剂本身安全环保无毒。
储存条件:常温,有效期一年。
使用方法:
注意:标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一容器)。
鼻拭子的采集:将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集:用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将棉签浸入步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
直接在一容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封;每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上,连同一容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二容器)内,拧紧盖,在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本,可以放在同一个二容器内。二容器要承受不少于95 KPa的压力,内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二容器摆放在用运输箱内(或疫苗运输箱),放入冰排,然后以柔软物质填充,并密封,由人(2人)运送,不得邮寄,好使用车。
采集的标本若不能在24小时内送达,则应尽快在⁻⁷0℃以下保存。无⁻⁷0℃条件的,需在4℃冰箱短时间暂存,并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃~-40℃时不稳定,故长期保存好在⁻⁷0℃温度以下进行。
体外微管蛋白聚合作用(polymerization)荧光检测试剂盒20次人二肽肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA试剂盒,
体内微管蛋白聚合作用(polymerization)检测试剂盒5次人化酶(Methylase)ELISA试剂盒,
细胞骨架(肌动蛋白微丝;F-ACTIN)绿色荧光染色试剂盒10次人胎盘催乳素(HPL)ELISA试剂盒,
细胞骨架(肌动蛋白单体;G-ACTIN)红色荧光染色试剂盒10次人清道夫受体B(SRB/CD36)ELISA试剂盒,
微管(microtubules)荧光染色试剂盒10次小鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA试剂盒,
粘着斑蛋白(vinculin)荧光染色试剂盒10次小鼠N端脑钠素(NT-proBNP)ELISA试剂盒,
驱动蛋白(kinesin)型ATP酶活性酶连续反应光谱法定量检测试剂盒20次小鼠P物质受体(SP-R)ELISA试剂盒,
3,4-二氢嘧啶酮衍生物Monastrol(K-ATPase 抑制剂)小鼠抗IgE受体抗体ELISA试剂盒,
细胞αSMA蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒10/20次小鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒,
载玻片细胞αSMA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次小鼠胰岛素受体β(ISR-β)ELISA试剂盒,
冰冻切片组织αSMA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次仓鼠质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA试剂盒,
石蜡切片组织αSMA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次豚鼠钩端螺旋体IgG(Lebtospira)ELISA试剂盒,
载玻片细胞αSMA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次猪食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA试剂盒,
冰冻切片组织αSMA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次猪可溶性P选择素(sP-Selectin)ELISA试剂盒,
石蜡切片组织αSMA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次猪生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒,
CENPA 着丝粒蛋白AN-α-苄氧羰-L-2,4-二氨丁 99%
Phospho-CENP-A (Ser7) 化着丝粒蛋白A酵母聚糖 A
Cecropin 抗菌肽/天蚕素抗体 >99.5%(GC)
Cecropin 杀菌肽/天蚕抗菌肽抗体 AR,99.0%
HER2/C-erbB-2 HER2抗体 99.5%
HER4/ErbB4 HER4抗体 99%
Phospho-HER4 (Tyr984) 化HER4抗体 standard for GC, ≥99.5% (GC)
Phospho-HER4 (Tyr1284) 化HER4抗体2-酰-γ-丁内酯 98%
OrigamiB(DE3)化学感受态细胞CAS号:56-87-1
C6H14N2O2=146.19
别:BR
含量:≥99.0%
比旋光度:+23.0~+27.0º
干燥失重:≤5.0%
重金属:≤20ppm
砷:≤1ppm
操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。

热门标签:OrigamiB(DE3)化学感受态细胞

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