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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

第10年

当前位置: 阿仪网 > 上海谷研实业有限公司 > 产品展示 > 分子试剂 > 克隆与表达 > TB1化学感受态细胞

TB1化学感受态细胞

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/11/5 9:41:34

产品摘要:TB1化学感受态细胞正在出售的产品:头孢烯佛手柑内酯饮料乙比色法定量检测试剂盒
愈创木酚缩水甘油 甘调料乙比色法定量检测试剂盒
8-羟基喹啉甘草查尔酮A乙比色法定量检测试剂盒
甲基烯酸甲酯;α-甲基烯酸甲酯甘草苷元-7-O-D-芹糖-4’-O-D

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试剂盒

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生化检测试剂盒

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荧光PCR试剂盒

细胞生物学试剂

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详细内容

产品属性:
中文名称:TB1化学感受态细胞
英文名称:TB1 Chemically Competent Cell
产品规格:10×100μl|50×100μl
产品货号:GOY-F10995
TB1感受态细胞来源于JM 83,是JM 83 hsdR型,只含有RNApolymerase,缺少BL21(DE3)菌株的T7 RNA polymerase,适合pMAL系列质粒原核蛋白表达(The pMAL vectors use the E.coli RNA polymerase),不能用于pET系列质粒的表达,具有链抗性。
TB1感受态细胞由特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg。
保存条件:-80℃
基因型:
F– ara Δ(lac-proAB)rpsL(Strr)[φ80 dlacΔ(lacZ)M15] thi hsdR
操作说明:
1.取100μl冰上融化的TB1感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项:
1.感受态细胞好在冰上融化。
2.混入质粒时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。
4.诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。
5.为获得需要量的蛋白,佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。
注意事项:
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后,轻摇时*与细胞充分接触,然后倒掉大部分*,利用剩余的少量*再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。
实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2.在适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(*—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
MFN-1(MITOFUSIN) 蛋白表达检测试剂盒10/20次大鼠催乳素(PRL)ELISA试剂盒,
MFN-2蛋白表达检测试剂盒10/20次豚鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒,
PINK-1蛋白表达检测试剂盒10/20次猪β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA试剂盒,
PARKIN蛋白表达检测试剂盒10/20次兔血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISA试剂盒,
FIS-1蛋白表达检测试剂盒10/20次兔子骨胶原交联(Cr)ELISA试剂盒,
ENDOPHILIN蛋白表达检测试剂盒10/20次兔子促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒,
BAD蛋白表达检测试剂盒10/20次抗肝素PF4复合物抗体/HIT抗体(HIT)ELISA试剂盒--动物,人
细胞骨架(CYTOSKELETON)蛋白分析试剂题DRBC琼脂
名称规格吖啶黄素添加于225ml HB4160中制成LB1
?体外肌动蛋白(ACTIN)结合分子(binding molecules)检测试剂盒20次DL-谷氨酰
体外波形蛋白(Vimentin)结合分子(binding molecules)检测试剂盒20次L-胱氨二酯
体外微管蛋白(tubulin)结合分子(binding molecules)检测试剂盒20次琼脂糖凝胶CL-6B
肌动蛋白聚合作用(polymerization)检测试剂盒20次人抗流行性出血热病抗体IgG (EHF)ELISA试剂盒,EHF ELISA
体外微管蛋白聚合作用(polymerization)比色法检测试剂盒(300微克,标准样)20次人β-微管蛋白(TUBB)ELISA试剂盒,TUBB ELISA
纯化微管蛋白(Tubulin)1毫克/5毫克人preptin ELISA试剂盒,
CEAcam8/CD67 癌胚抗原相关粘附分子8抗体对二苯 for HPLC, ≥99%
cellulase 纤维素酶抗体黄苷-5'-单钠 98%
CEBP-alpha 转录调节因子C/EBP α 抗体化镱(III),六水 99.9% metals basis
Phospho-CEBP alpha (Ser21) 化转录调节因子CEBP α 抗体钼锌 99.9%
Phospho-CEBP alpha (Thr222/226) 化转录调节因子CEBP α 抗体氢氧化锆 97%
CEBP Beta 转录调节因子C/EBP β抗体N-苄氧羰二盐盐 98%
Phospho-CEBP beta (Ser105) 化转录调节因子CEBP β抗体高锌,六水 试剂
Phospho-CEBP beta (Thr235) 化转录调节因子CEBP β抗体玉米素核苷 97%
TB1化学感受态细胞含量:≥99.0%
熔点:158~161℃
性状(以下信息仅供参考):白色结晶粉末
用途:本品仅供科研,不得用于其它用途
保存:RT
L-赖氨酸
英文名称:L-Lysine;L-2,6-Diaminohexanoic acid;L-α,ε-Diaminocaproic acid;(S)-2,6-Diaminocaproic acid
其他名称:L-2,6-二氨基己酸;L-己氨酸;L-松氨酸

热门标签:TB1化学感受态细胞

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