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F-BL21(DE3)化学感受态细胞
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/11/5 9:41:34
产品摘要：F-BL21(DE3)化学感受态细胞正在出售的产品：D-(-)-泛酰内酯 丹酚酸C氨含量荧光定量检测试剂盒
盐酸丁咯地尔 靛玉红通用型直链淀粉比色法定量检测试剂盒
盐酸丁咯地尔(标准品)丁香酚食物直链淀粉比色法定量检测试剂盒
雄烯二酮丁香树脂双葡
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详细内容
实验要点:
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2．在适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的异戊醇（*—异戊醇=25:24:1），异戊醇的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
产品属性：
中文名称：F-BL21(DE3)化学感受态细胞
英文名称：F-BL21(DE3)Chemically Competent Cell
产品规格：10×100μl|50×100μl
产品货号：GOY-F10991
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2．在适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的异戊醇（*—异戊醇=25:24:1），异戊醇的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
产品属性：
中文名称：F-BL21(DE3)化学感受态细胞
英文名称：F-BL21(DE3)Chemically Competent Cell
产品规格：10×100μl|50×100μl
产品货号：GOY-F10991
| BL21(DE3)菌株用于高效表达克隆于含有T7启动子的表达载体(如 pET系列)的基因。 λDE3区含有T7RNA聚合酶，该区整合于BL21的染色体上，所以称为BL21(DE3)。可同时表达T7 RNA聚合酶和RNA聚合酶，用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达。F-BL21(DE3)感受态细胞经特殊工艺制作，无需42℃热激，37℃孵育步骤，只需冰浴，10min内完成转化、涂板操作，pUC19质粒检测转化效率可达1×107 cfu/μg DNA。 保存条件：-80℃ 基因型： F-ompT hsdSB(rB-mB-)gal dcm(DE3) 快速转化操作方法(10min)： 1.提10分钟将用到的筛选培养基平板拿到37℃预热。 2.F-BL21(DE3)感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA并用手拨打EP管底轻轻混匀，冰中静置5分钟。 3.用200 μl枪将感受态细胞-DNA混合物转移到已经37℃预热的LB培养基上，涂均匀，表面无水渍。 4.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。 快速热激转化操作方法(25min,可提高转化效率) 1.F-BL21(DE3)感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA并用手拨打EP管底轻轻混匀,，冰中静置5分钟。 2.42℃水浴热激45，迅速放回冰上并静置2分钟(晃动会降低转化效率)。加入700 μl不含抗生素的LB，37℃，200 rpm复苏10分钟，涂板(均匀，表面无水渍)。 3.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养 |
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
注意事项：
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后，轻摇时*与细胞充分接触，然后倒掉大部分*，利用剩余的少量*再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞，比如在检测凋亡的同时检测细胞周期，只能选用Annexin V-FITC，而不能选用Annexin V-EGFP，因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育，并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片，可以和Annexin V结合，对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。
酵母铜ATP酶（Cu＋＋ －ATPase）活性比色法量检测试剂盒20次大鼠β2微球蛋白（BMG/β2-MG）ELISA试剂盒,
1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
注意事项：
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后，轻摇时*与细胞充分接触，然后倒掉大部分*，利用剩余的少量*再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞，比如在检测凋亡的同时检测细胞周期，只能选用Annexin V-FITC，而不能选用Annexin V-EGFP，因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育，并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片，可以和Annexin V结合，对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。
酵母铜ATP酶（Cu＋＋ －ATPase）活性比色法量检测试剂盒20次大鼠β2微球蛋白（BMG/β2-MG）ELISA试剂盒,
植物铜ATP酶（Cu＋＋ －ATPase）活性比色法量检测试剂盒20次大鼠补体因子H（CFH）ELISA试剂盒,
钙离子分析试剂题大鼠骨粘连蛋白（ON）ELISA试剂盒,
名称规格大鼠凝血酶抗凝血酶复合物（TAT）ELISA试剂盒,
细胞钙离子浓度比色法定量检测试剂盒20次大鼠抗IgE受体抗体ELISA试剂盒,
组织钙离子浓度比色法定量检测试剂盒20次大鼠免疫球蛋白M（IgM）ELISA试剂盒,
体液钙离子浓度比色法定量检测试剂盒20次大鼠血小板活化因子（PAF）ELISA试剂盒,
食物钙离子浓度比色法定量检测试剂盒20次大鼠维生素D（VD）ELISA试剂盒,
环境钙离子浓度比色法定量检测试剂盒20次绵羊白介素2受体（IL-2R）ELISA试剂盒,
血清钙比色法定量检测试剂盒50次兔子氧化低密度脂蛋白（OxLDL）ELISA试剂盒,
胞浆内钙离子浓度荧光检测试剂盒20次脑啡肽（ENK）ELISA试剂盒－－动物，人
线粒体内钙离子浓度荧光检测试剂盒20次游离睾酮（F-TESTO）ELISA试剂盒－－动物，人
细胞内钙离子水平动态变化荧光检测试剂盒20次副溶血性弧菌琼脂用于副溶血性弧菌的选择性分离培养
细胞内质网内钙离子浓度荧光检测试剂盒20次2′-氟脱氧胞苷
组织内质网内钙离子浓度荧光检测试剂盒20次SP葡聚糖凝胶C-25
CD335/NKp46/NCR1 性受体NK-p46抗体3,5,5-己 ≥95%, Kosher
CD336/NKp44/NCR2 性受体NK-p44抗体三(2-呋喃)膦 99%
CD337/NKp30/NCR3 性受体NK-p30抗体双硫 分析标准品
CD328/Siglec⁻⁷ 唾液结合性免疫球蛋白样凝集素7抗体四化铵，一水 99%
CD329/SIGLEC9 唾液结合性免疫球蛋白样凝集素9抗体四硫氢铵 色谱
KLRF1/NKp80 性受体NK-p80抗体四硫氢铵 99%
SIGLEC10/SLG2 唾液结合性免疫球蛋白样凝集素抗体(S)-(+)-1,2,3,4-四氢-1-萘 >99%, ee >98%
Cdc6 分裂周期蛋白6抗体频那 97%
F-BL21(DE3)化学感受态细胞用途：本品仅供科研，不得用于其它用途
F-BL21(DE3)化学感受态细胞用途：本品仅供科研，不得用于其它用途
保存：RT
DL-亮氨酸
英文名称：DL-Leucine；(±)-Amino-4-methylpentanoic acid；DL-2-Amino-4-methylpentanoic acid；DL-Leu；DL-2-Amino-4-methylpentanoic acid
其他名称：DL-白氨酸；DL-2-氨基-4-甲基戊酸
CAS号：328-39-2
C6H13NO2=131.17
别：BR
热门标签：F-BL21(DE3)化学感受态细胞
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