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EHA105农杆菌感受态细胞
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/11/5 9:41:34
产品摘要：EHA105农杆菌感受态细胞正在出售的产品：二氢睾酮,雄诺龙翅子罗汉果I植物氨含量光谱法定量检测试剂盒
多拉菌素川陈皮素/酵母氨含量光谱法定量检测试剂盒
3,3,5-三-L-甲状腺原，塞罗宁川芎氨含量光谱法定量检测试剂盒
Corylifol A(标准品)
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详细内容
产品属性：
中文名称：EHA105农杆菌感受态细胞
英文名称：EHA105 Chemically Competent Cell
产品规格：10×100μl|50×100μl
产品货号：GOY-F10989
中文名称：EHA105农杆菌感受态细胞
英文名称：EHA105 Chemically Competent Cell
产品规格：10×100μl|50×100μl
产品货号：GOY-F10989
| EHA105菌株由EHA105菌株改造而来，为C58型背景，核基因中含有筛选标签——抗性基因rif，为了便于转化操作，此菌株携带一无自身转运功能的琥珀碱型Ti质粒pEHA105(pTiBo542DT-DNA)，此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件，pEHA105(pTiBo542DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能被破坏，但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。 pEHA105(pTiBo542DT-DNA)型Ti质粒含有筛选标签：strep，赋予EHA105菌株链抗性，适用于水稻、烟草等植物的转基因操作，经pCAMBIA2301质粒检测转化效率可达104cfu/μg。 保存条件：-80℃ 基因型： C58(rif R)Ti pEHA105(pTiBo542DT-DNA)(strepR)Succinamopine 操作说明： 1.取-80℃保存的农杆菌感受态于冰上待其部分融化，处于冰水混合状态时插入冰中。 2.每100μl感受态加1μg(体积不大于10μl)质粒DNA，用手拨打管底混匀，依次于冰上静置5分钟、液氮5分钟、28℃水浴5分钟、冰浴5分钟。 3.加入700μl无抗生素的LB或YEB液体培养基，于28℃振荡培养2~3小时。 4.6000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的LB或YEB平板上，倒置放于28℃培养箱培养2-3天(当平板只含有50μg/ml kan时，28℃培养48h即可；平板中同时加入50μg/ml kan，20μg/ml rif时，需28℃培养60h；如果使用的平板含有50μg/ml rif则需要28℃培养72-90h)。 注意事项： 1.感受态细胞好在冰上融化。 2.混入质粒时应轻柔操作。 3.转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。 |
注意事项：
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后，轻摇时*与细胞充分接触，然后倒掉大部分*，利用剩余的少量*再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞，比如在检测凋亡的同时检测细胞周期，只能选用Annexin V-FITC，而不能选用Annexin V-EGFP，因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育，并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片，可以和Annexin V结合，对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后，轻摇时*与细胞充分接触，然后倒掉大部分*，利用剩余的少量*再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞，比如在检测凋亡的同时检测细胞周期，只能选用Annexin V-FITC，而不能选用Annexin V-EGFP，因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育，并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片，可以和Annexin V结合，对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。
实验要点:
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2．在适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的异戊醇（*—异戊醇=25:24:1），异戊醇的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
细胞DNA损伤彗星荧光检测试剂盒20次中性粒趋化蛋白2（NAP-2/CXCL7）ELISA试剂盒－－动物，人
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2．在适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的异戊醇（*—异戊醇=25:24:1），异戊醇的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
细胞DNA损伤彗星荧光检测试剂盒20次中性粒趋化蛋白2（NAP-2/CXCL7）ELISA试剂盒－－动物，人
鱼类受精卵细胞冻存试剂盒（超低温）50次m-FC 琼脂
鱼类受精卵细胞冻存试剂盒（低温）50次Ｄ/E中和肉汤用于卫生环境中微生物的分离培养（ACUMEDIA方法）
细胞顶体酶（acrosin）活性比色法定量试剂盒20次D-酪氨
名称规格L-肾上腺素
细胞铜离子浓度比色法定量检测试剂盒20次DL-邻苯甘氨
组织铜离子浓度比色法定量检测试剂盒20次L-邻苯甘氨
体液铜离子浓度比色法定量检测试剂盒20次枸橘苷 Poncirin
食物铜离子浓度比色法定量检测试剂盒20次α-萘钾
环境铜离子浓度比色法定量检测试剂盒20次茜素
细胞铜离子浓度荧光定量检测试剂盒20次人神经丝蛋白（NF）ELISA试剂盒,NF ELISA kit
组织铜离子浓度荧光定量检测试剂盒20次人癌蛋白诱导转录物3（OIT3）ELISA试剂盒,OIT3 ELISA kit
体液铜离子浓度荧光定量检测试剂盒20次人肺表面活性物质相关蛋白C（SP-C）ELISA试剂盒,SP-C ELISA kit
食物铜离子浓度荧光定量检测试剂盒20次人高敏状腺原氨（u-T3）ELISA试剂盒,u-T3 ELISA
环境铜离子浓度荧光定量检测试剂盒20次人C肽（C-Peptide）ELISA试剂盒,C-Peptide ELISA
CD83/HB15 CD83抗体1,2,3-苯 91%
CD84/SLAMF5 CD84抗体1,2,3-苯 分析标准品
CD8 CD8单克隆抗体(+)-δ-酚 90%
CD86/B7-2 CD86抗体(+)-δ-酚 分析标准品
CD244 CD244抗体3-巯-1,2- Matrix for FAB-MS ａnd liquid SIMS, ≥98.5%
BLAME/SLAMF8 BLAME抗体三酯 99%
Cdc2/CDK1 周期素依赖激酶1抗体托布津 分析标准品
Phospho-cdc2 (Thr14) 化周期素依赖激酶2抗体碲 98%
EHA105农杆菌感受态细胞D-亮氨酸
EHA105农杆菌感受态细胞D-亮氨酸
英文名称：D-Leucine；(R)-2-Amino-4-methylpentanoic acid
其他名称：D-白氨酸；D-2-氨基-4-甲基戊酸；(R)-2-氨基-4-甲基戊酸
CAS号：328-38-1
C6H13NO2=131.17
别：BR
含量：≥99.0%
比旋光度：-14±2º（C=4 in 6N HC1)
热门标签：EHA105农杆菌感受态细胞
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