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AGL1农杆菌感受态细胞
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/11/5 9:41:34
产品摘要：AGL1农杆菌感受态细胞公司正在热销的产品：奥当卡替(MK-0822)长春花碱食物氨含量光谱法定量检测试剂盒
4-硝基儿茶酚长春碱饲料氨含量光谱法定量检测试剂盒
4-硝基儿茶酚长春西汀化妆品氨含量光谱法定量检测试剂盒
曲格列酮长春新碱培养上清氨含量光
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详细内容
产品说明书：
| AGL1菌株为C58，RecA型背景，核基因中含有筛选标签——抗性基因rif和羧苄青抗性基因carb，为了便于转化操作，此菌株携带一无自身转运功能的琥珀碱型Ti质粒pTiBo542DT-DNA，此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件，pTiBo542DT-DNA质粒自身的T-DNA转移功能被破坏，但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。 pTiBo542DT-DNA型Ti质粒含有筛选标签：strep，赋予AGL1菌株链抗性，适用于水稻、拟南芥、杨树等植物的转基因操作，经pCAMBIA2301质粒检测转化效率可达5×103cfu/μg。 保存条件：-80℃ 基因型： C58 RecA(rif R/carbR)Ti pTiBo542DT-DNA(strepR)Succinamopine 操作说明： 1.取-80℃保存的农杆菌感受态于冰上待其部分融化，处于冰水混合状态时插入冰中。 2.每100μl感受态加1μg(体积不大于10μl)质粒DNA，用手拨打管底混匀，依次于冰上静置5分钟、液氮5分钟、28℃水浴5分钟、冰浴5分钟。 3.加入700μl无抗生素的LB或YEB液体培养基，于28℃振荡培养2~3小时。 4.6000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的LB或YEB平板上，倒置放于28℃培养箱培养2-3天(当平板只含有50μg/ml kan时，28℃培养48h即可；平板中同时加入50μg/ml kan，20μg/ml rif时，需28℃培养60h；如果使用的平板含有50μg/ml rif则需要28℃培养72-90h)。 注意事项： 1.加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10；质粒不纯或存在乙醇等有机物污染，转化效率急剧下降；质粒增大一倍，转化效率下降一个数量。 2.混入质粒时应轻柔操作。 3.转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。 4.浓度不应高于25μg/μl，过高的浓度不利于农杆菌生长，会降低其生长速度和转化效率。本公司感受态计算转化效率时所用平板只含有50μg/ml kan，若所用平板含有20μg/ml rif则转化效率降低到1/2。 5.培养基中加入的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌；根据所用菌株抗性加入链或庆大可防止Ti质粒丢失，但链不利于农杆菌的转基因操作，所以一般培养农杆菌时不考虑链或庆大，Ti质粒丢失的概率低(可以忽略)。 |
下列是产品的订购信息!
| 中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
| AGL1农杆菌感受态细胞 | AGL1 Chemically Competent Cell | 10×100μl|50×100μl | GOY-F10988 |
使用方法：
注意：标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一容器)。
鼻拭子的采集：将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处，停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中，弃去拭子尾部，拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集：用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，将棉签浸入步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中，弃去拭子尾部，拧紧螺旋盖。
直接在一容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封；每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上，连同一容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二容器)内，拧紧盖，在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本，可以放在同一个二容器内。二容器要承受不少于95 KPa的压力，内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二容器摆放在用运输箱内(或疫苗运输箱)，放入冰排，然后以柔软物质填充，并密封，由人(2人)运送，不得邮寄，好使用车。
采集的标本若不能在24小时内送达，则应尽快在⁻⁷0℃以下保存。无⁻⁷0℃条件的，需在4℃冰箱短时间暂存，并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃～-40℃时不稳定，故长期保存好在⁻⁷0℃温度以下进行。
操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
产品特点：
低温非冻型保存，不破坏病毒的外壳，方便长途运输。
适用于各种拭子样品，包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽喉拭子、阴道拭子等。
可以用于H1N1流感病毒和其他任何可以用拭子取样的病毒。
可以用柱式病毒DNA提取试剂盒或柱式病毒RNA提取试剂盒提取病毒核酸。
试剂本身安全环保无毒。
储存条件：常温，有效期一年。
膜功能低渗膨胀法（HOST）检测试剂盒50次大鼠成纤维生长因子10（FGF-10）ELISA试剂盒,
DNA吖啶橙（acridine orange）荧光检测试剂盒50次大鼠糖原合成酶激酶（GSK）ELISA试剂盒,
形态肖尔（shorr）染色试剂盒20次大鼠核因子κB亚p65亲和肽（NF-κB p65）ELISA试剂盒,
精液粒性白细胞染色试剂盒50次大鼠血纤蛋白原降解产物（FDP）ELISA试剂盒,
精浆锌含量比色法定量检测试剂盒20次大鼠血小板因子4（PF-4/CXCL4）ELISA试剂盒,
精浆果糖含量比色法定量检测试剂盒20次猪E选择素（E-Selectin/CD62E）ELISA试剂盒,
精浆中性α-糖苷酶（α-glucosidase）活性比色法定量检测试剂盒20次猪血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子（VWF）ELISA试剂盒,
细胞氧化应激活性氧（ROS）鲁米诺化学发光法50次猪Bcl-2相关X蛋白（BAX）ELISA试剂盒,
定量检测试剂盒猴载脂蛋白B100（apo-B100）ELISA试剂盒,
精液组分氧化应激活性氧（ROS）鲁米诺化学发光法50次马主要组织相容性复合体（MHC/ELA）ELISA试剂盒,
定量检测试剂盒兔核因子κB受体活化因子配（RANKL）ELISA试剂盒,
细胞氧化应激活性氧（ROS）光泽精化学发光法50次兔溶菌酶（LZM）ELISA试剂盒,
定量检测试剂盒兔过氧化物酶体增殖因子活化受体γ（PPAR-γ）ELISA试剂盒,
精液组分氧化应激活性氧（ROS）光泽精化学发光法定量50次兔子免疫球蛋白M（IgM）ELISA试剂盒,
检测试剂盒胰岛素样生长因子结合蛋白4（IGFBP-4）ELISA试剂盒－－动物，人
CD74/MHC II CD74抗体四己硫氢铵 用于离子色谱, ≥99.0% (T)
CLEC2D/OCIL CLEC2D蛋白抗体N,N,N＇,N＇-四-1,3-二 99%
CD80/B7-1 激分子B7-1蛋白抗体N,N,N＇,N＇-四-1,3-二 97%
CD71/TFR 转铁蛋白受体抗体2,4,5-三苯 分析标准品,99%
B7-1/CD80 激分子B7-1蛋白抗体1,2,3,4-四苯 分析标准品,98%
CD73 胞浆-5´-核苷酶-Ⅱ抗体5-硫代-D-葡萄糖 96%
CD79A/IGBP-1 免疫球蛋白结合蛋白-1抗体三溶液 50%溶液
CD82/KAI1 肿瘤转移抑制蛋白1抗体二十三烷 分析标准品,99.5%
AGL1农杆菌感受态细胞氯化物：≤0.02%
AGL1农杆菌感受态细胞氯化物：≤0.02%
硫酸盐：≤0.02%
铵盐：≤0.02%
砷盐：≤0.0001%
铁：≤0.001%
性状(以下信息仅供参考)：白色结晶或结晶性粉末，几乎无臭，无味，加热到145-148℃时升华，293-295℃时分解。溶于水(25℃，24.26g/L)、乙酸(10.9g/L)、稀盐酸、氢氧化碱和碳酸盐溶液，微溶于醇。,不溶于。相对密度(d184)1.293
用途：用于本品仅供科研，不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)制备组织培养基。
保存：RT
热门标签：AGL1农杆菌感受态细胞
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