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EHA101农杆菌感受态细胞
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/11/5 9:41:34
产品摘要：EHA101农杆菌感受态细胞正在出售的产品：二氢猕猴桃内酯,果内酯苍术素食物碳水化合物比色法定量检测试剂盒
马西替坦;ACT064992藏红花酸果菜纤维素酶解法定量检测试剂盒
组蛋白去乙酰化酶抑制剂(M 344)岑酮食物纤维素酶解法定量检测试剂盒
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马西替坦;ACT064992藏红花酸果菜纤维素酶解法定量检测试剂盒
组蛋白去乙酰化酶抑制剂(M 344)岑酮食物纤维素酶解法定量检测试剂盒
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详细内容
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
产品属性：
中文名称：EHA101农杆菌感受态细胞
英文名称：EHA101 Chemically Competent Cell
产品规格：10×100μl|50×100μl
产品货号：GOY-F10987
1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
产品属性：
中文名称：EHA101农杆菌感受态细胞
英文名称：EHA101 Chemically Competent Cell
产品规格：10×100μl|50×100μl
产品货号：GOY-F10987
| EHA101菌株为C58型背景，核基因中含有筛选标签——抗性基因rif，为了便于转化操作，此菌株携带一无自身转运功能的胭脂碱型Ti质粒pEHA101(pTiBo542DT-DNA)，此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件，pEHA101(pTiBo542DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能被破坏，但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。 pEHA101(pTiBo542DT-DNA)型Ti质粒含有筛选标签：strep、kan，赋予EHA101菌株链抗性和卡那抗性，适用于玉米、水稻、烟草等植物的转基因操作，经pK7WGF2质粒检测转化效率可达104 cfu/μg DNA。 保存条件：-80℃ 注意事项： 1.加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10；质粒不纯或存在乙醇等有机物污染，转化效率急剧下降；质粒增大一倍，转化效率下降一个数量。 2.混入质粒时应轻柔操作，转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。 3.浓度不应高于25 μg/ml，过高的浓度不利于农杆菌生长，会降低其生长速度和转化效率。本公司感受态计算转化效率时所用平板只含有50 μg/ml kan，若所用平板同时含有20 μg/ml rif则转化效率降低到1/2。 4.培养基中加入的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌；根据所用菌株抗性加入链或庆大可防止Ti质粒丢失，但链不利于农杆菌的转基因操作，所以一般培养农杆菌时不考虑链或庆大，Ti质粒丢失的概率低(可以忽略)。 |
实验要点:
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2．在适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的异戊醇（*—异戊醇=25:24:1），异戊醇的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
（种系）体外卵母细胞成熟（in vitro maturation；IVM）培养液100毫升琼脂糖凝胶4B
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2．在适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的异戊醇（*—异戊醇=25:24:1），异戊醇的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
（种系）体外卵母细胞成熟（in vitro maturation；IVM）培养液100毫升琼脂糖凝胶4B
卵母细胞冻存试剂盒50次琼脂糖凝胶6B
卵母细胞清理液100毫升人癌胚抗原（CEA/CD66）ELISA试剂盒,CEA/CD66 ELISA kit
（种系）体外卵母细胞成熟（in vitro maturation；IVM）1毫升人状腺原氨（T3）ELISA试剂盒,T3 ELISA
培养生长因子（20倍）人Rho家族GTP酶1（RND1）ELISA试剂盒,RND1 ELISA
卵母细胞核成熟苔红素（orcein）荧光染色分析试剂盒20次人脱氧尿三（DUTP）ELISA试剂盒,
体外受精（in vitro fertilization IVF）细胞培养液50毫升人抗弓形体IgM抗体（anti-tox IgM）ELISA试剂盒,
胚胎组织培养液500毫升人白蛋白（PA）ELISA试剂盒,
活力荧光染色试剂盒50次人补体蛋白3（C3）ELISA试剂盒,
活力伊红苯胺黑（eosin－nigrosin）染色试剂盒50次人凝血酶受体（TR）ELISA试剂盒,
活力和顶体反应三色（triple staining）染色试剂盒50次小鼠IgG ELISA试剂盒,
顶体形态花生凝集素荧光标记（PNA-FITC）染色试剂盒20次小鼠骨形成蛋白6（BMP-6）ELISA试剂盒,
顶体形态豌豆凝集素荧光标记（PSA-FITC）染色试剂盒20次小鼠白介素3（IL-3）ELISA试剂盒,
顶体形态刀豆素A凝集素荧光标记（ConA-FITC）染色试剂盒20次小鼠脂酰肌醇抗体IgG/IgM（PI Ab-IgG/IgM）ELISA试剂盒,
活力和顶体形态双重荧光染色试剂盒20次小鼠Ⅰ型胶原羧端肽（PⅠCP）ELISA试剂盒,
CD56/NCAM1 神经粘附分子1抗体四丁氢氧化铵 ~40% 水溶液，离子色谱
CD171/NCAM-L1 神经粘附分子配体1抗体2,4,5-三苯酚 分析标准品
CD172a/SIRP Alpha 信号调节蛋白α抗体叔戊 97%
CD57 CD57抗体DL-α-酚琥珀酯 分析标准品
CD68 CD68抗体氧鎓四氟盐 96%
CD68 CD68抗体(硅烷)重氮 2.0M 己烷溶液
CD69/CLEC2C/AIM 活化诱导分子CD69抗体三(2-氨) 97%
CD72/Ly-32 CD72蛋白抗体2-硫脲嘧啶 分析标准品
EHA101农杆菌感受态细胞CAS号：61-90-5
EHA101农杆菌感受态细胞CAS号：61-90-5
C6H13NO2=131.17
别：BR
含量：≥99.0%
比旋光度：+14.9～+16.0º
PH：5.5～6.5
干燥失重：≤0.2%
重金属：≤0.001%
注意事项：
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后，轻摇时*与细胞充分接触，然后倒掉大部分*，利用剩余的少量*再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞，比如在检测凋亡的同时检测细胞周期，只能选用Annexin V-FITC，而不能选用Annexin V-EGFP，因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育，并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片，可以和Annexin V结合，对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。
注意事项：
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后，轻摇时*与细胞充分接触，然后倒掉大部分*，利用剩余的少量*再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞，比如在检测凋亡的同时检测细胞周期，只能选用Annexin V-FITC，而不能选用Annexin V-EGFP，因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育，并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片，可以和Annexin V结合，对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。
热门标签：EHA101农杆菌感受态细胞
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