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零背景平末端克隆试剂盒(Kan抗性)
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/11/5 9:41:34
产品摘要：零背景平末端克隆试剂盒(Kan抗性)正在出售的产品：三酚内素色素P450亚酶2C9（TOBUTAMIDE）活性高效液相色谱法（HPLC）定量检测试剂盒
1-萘酚内素（工作品）体外非系统色素P450亚酶2C9（TOBUTAMIDE）活性高效液相色谱法（HPLC
1-萘酚内素（工作品）体外非系统色素P450亚酶2C9（TOBUTAMIDE）活性高效液相色谱法（HPLC
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详细内容
产品属性：
中文名称：零背景平末端克隆试剂盒(Kan抗性)
英文名称：Blunt Cloning Kit(Resistance to Kanamycin)
产品规格：25次
产品货号：GOY-F10973
中文名称：零背景平末端克隆试剂盒(Kan抗性)
英文名称：Blunt Cloning Kit(Resistance to Kanamycin)
产品规格：25次
产品货号：GOY-F10973
| 本产品是基于Topoisomerase能够在几钟之内高速连接DNA段的原理开发的无背景克隆试剂盒，它使用了本公司通过定点突变改良的TOPO酶，连接效率比野生型更高。 英文名称：Blunt Cloning Kit(Resistance to Kanamycin) 产品规格：25次 本产品是基于Topoisomerase能够在几钟之内高速连接DNA段的原理开发的无背景克隆试剂盒，它使用了本公司通过定点突变改良的TOPO酶，连接效率比野生型更高。 产品特点： 1. 高效快速，连接反应几乎在几钟内完成，连接率几乎达到100%。 2. 适用于pfu、KOD等高保真聚合酶扩增的平末端片段的克隆。 3. 无杂带或引物二聚体的PCR扩增产物可以不经过纯化直接用于连接反应。 4. 零背景，无需IPTG-X-Gal蓝白斑筛选，故不需要IPTG-X-Gal培养基。 5. 本试剂盒按10μl标准反应体系。 6. 提供含Amp和Kan两种抗性的载体供选择（BTN160684A是含Amp抗性TOPO载体，BTN60684K是含Kan抗性TOPO载体）。 保存条件：-20℃，有效期一年。 |
注意事项：
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后，轻摇时*与细胞充分接触，然后倒掉大部分*，利用剩余的少量*再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞，比如在检测凋亡的同时检测细胞周期，只能选用Annexin V-FITC，而不能选用Annexin V-EGFP，因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育，并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片，可以和Annexin V结合，对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后，轻摇时*与细胞充分接触，然后倒掉大部分*，利用剩余的少量*再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞，比如在检测凋亡的同时检测细胞周期，只能选用Annexin V-FITC，而不能选用Annexin V-EGFP，因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育，并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片，可以和Annexin V结合，对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。
实验要点:
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2．在适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的异戊醇（*—异戊醇=25:24:1），异戊醇的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
组织内蛋白氧化（羰化；carbonyl）荧光检测试剂盒20次鸡1,3-βD葡葡糖苷酶（1,3-βD-Glu）ELISA试剂盒,
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2．在适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的异戊醇（*—异戊醇=25:24:1），异戊醇的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
组织内蛋白氧化（羰化；carbonyl）荧光检测试剂盒20次鸡1,3-βD葡葡糖苷酶（1,3-βD-Glu）ELISA试剂盒,
血液蛋白氧化（羰化；carbonyl）荧光检测试剂盒20次骆驼内皮素1（ET-1）ELISA试剂盒,
体液蛋白氧化（羰化；carbonyl）荧光检测试剂盒20次山羊促生长激素释放激素（GHRH）ELISA试剂盒,
纯化线粒体蛋白氧化（羰化；carbonyl）荧光检测试剂盒20次鹿胰岛素样生长因子结合蛋白3（IGFBP-3）ELISA试剂盒,
植物蛋白氧化（羰化；carbonyl）荧光检测试剂盒20次兔子纤溶酶原（Plg）ELISA试剂盒,
蛋白硝化免疫染色测定试剂盒10次兔血管生成素2（ANG-2）ELISA试剂盒,
蛋白巯化（S-thiolation）高效液相色谱 （HPLC）分析试剂盒20次兔子神经生长因子（NGF）ELISA试剂盒,
蛋白巯化（S-thiolation）同位素法分析试剂盒20次兔子白三烯B4（LTB4）ELISA试剂盒,
精氨（ARG）氧化高效液相色谱 （HPLC）分析试剂盒20次植物钙调素（CAM）ELISA试剂盒,
组氨（HIS）氧化高效液相色谱 （HPLC）分析试剂盒肿瘤标志物（CA724）ELISA试剂盒－－动物，人
亮氨（LEUCINE）氧化高效液相色谱 （HPLC）分析试剂盒去氧胆盐琼脂
蛋氨（MET）氧化高效液相色谱 （HPLC）分析试剂盒标准I号营养琼脂
苯丙氨（PHE）氧化高效液相色谱 （HPLC）分析试剂盒A PT 琼脂用于乳菌分离培养
脯氨（PRO）氧化高效液相色谱 （HPLC）分析试剂盒L-谷氨二酯盐盐
酪氨（TYR）氧化高效液相色谱 （HPLC）分析试剂盒人莱姆IgG（Lyme-IgG）ELISA试剂盒,Lyme-IgG ELISA
CCR-2B 表面趋化因子受体2B抗体蓝VF Indicator
CCR-3 表面趋化因子受体3抗体苯酯 99%
CCR-4/CD194 表面趋化因子受体4抗体扑草净 分析标准品，99%
CCR5 表面趋化因子受体5抗体扑草净标准溶液 10μg/ml,u=6%
CCR6/CD196 表面趋化因子受体6抗体扑草净标准溶液 100μg/ml,u=4%
CXCR6 表面趋化因子受体6抗体扑草净 分析标准品，99.5%
CCR7/CD197 表面趋化因子受体7抗体聚二二烯酯 平均分子量 ~258
CXCL10/Gamma-IP-10 CXCL10趋化因子10/干扰素诱导蛋白10抗体聚二二烯酯 平均分子量~575
零背景平末端克隆试剂盒(Kan抗性)DL-谷氨酸水合物
零背景平末端克隆试剂盒(Kan抗性)DL-谷氨酸水合物
英文名称：DL-Glutamic acid monohydrate；(±)-2-Aminoglutaric acid monohydrate；(±)-2-Aminopentanedioic acid monohydrate
其他名称：2-氨基戊二酸一水物；DL-麸氨基一水物
CAS号：19285-83⁻⁷
C5H9NO4·H2O=165.14
别：BR
含量：≥99.0%
氯化物：≤0.10%
热门标签：零背景平末端克隆试剂盒(Kan抗性)
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