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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

第10年

当前位置: 阿仪网 > 上海谷研实业有限公司 > 产品展示 > 分子试剂 > 克隆与表达 > DH5a感受态细胞

DH5a感受态细胞

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/11/5 9:41:34

产品摘要:DH5a感受态细胞公司正在热销的产品:β-萘酚,异萘酚腺原色素P450亚酶1A2(PHENACETIN)活性高效液相色谱法(HPLC)定量检测试剂盒
3-氨基酚甲状腺素体外非系统色素P450亚酶1A2(PHENACETIN)活性高效液相色谱法(HPLC)定量

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产品完善度: 访问次数:787

试剂盒

ATCC细胞

标准品

RNA/DNA提取

生化试剂

菌种

培养基

elisa试剂盒

PCR检测试剂盒

生化检测试剂盒

原代细胞

质粒

荧光PCR试剂盒

细胞生物学试剂

分子试剂

细胞系

细胞培养基

抗体

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手机网站:http://wap.app17.com/c130377/

旗舰版网址:http://www.elisaguyan.com

详细内容

产品说明书:
经Ca离子处理后可摄取外源DNA(Plasmid、Phage DNA),处于这种状态的细胞称作感受态细胞。在进行基因重组时,使用感受态细胞的转化实验应用十分广泛。制作基因文库、重组质粒体以及进行亚克隆实验时,特别是目的基因含量十分低的情况下时,使用高效的感受态细胞十分重要。使用pUC57质粒检测该DH5a感受态细胞,转化效率可达107~108。在⁻⁷0℃下保存数月转化效率不发生明显降低。
操作方法:
1.取出感受态细胞,置于冰上5分钟,解冻。
2.向感受态细胞中加入1~10μl连接产物,轻弹离心管底部混匀,冰上放置30 min。
3.置于42℃热激60s后,迅速置于冰上急冷2分钟。
4.向热激完毕的感受态细胞中,加入700μl经37℃预热的LB(或SOC)培养基(不含抗生素),37℃振荡(225 rpm)培养1小时。目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达,使菌体复苏。
5.室温4,000 rpm离心5分钟,弃去700μl上清后,用剩余100μl培养基重悬细胞并涂布到含相应抗生素的LB琼脂平板表面。
6.将平板置于37℃培养,12~14小时后可出现菌落。
注意事项:
1. 感受态细胞应保存在⁻⁷0℃,不可多次冻融和放置时间过长,以避免降低感受态细胞的转化效率。
2. 所有操作均需注意无菌操作。
3. pUC18 plasmid 标准品(0.2ng/μl),含有氨苄青抗性,作为阳性对照使用,每次转化5μl,可以得到约100~1000个克隆。
储存条件:-80℃可保存一年。
下列是产品的订购信息!
中文名称
英文名称
产品规格
货号
DH5a感受态细胞
DH5a Competent Cells
10×100μl
GOY-F10972

使用方法:
注意:标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一容器)。
鼻拭子的采集:将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集:用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将棉签浸入步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
直接在一容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封;每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上,连同一容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二容器)内,拧紧盖,在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本,可以放在同一个二容器内。二容器要承受不少于95 KPa的压力,内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二容器摆放在用运输箱内(或疫苗运输箱),放入冰排,然后以柔软物质填充,并密封,由人(2人)运送,不得邮寄,好使用车。
采集的标本若不能在24小时内送达,则应尽快在⁻⁷0℃以下保存。无⁻⁷0℃条件的,需在4℃冰箱短时间暂存,并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃~-40℃时不稳定,故长期保存好在⁻⁷0℃温度以下进行。
操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
产品特点:
低温非冻型保存,不破坏病毒的外壳,方便长途运输。
适用于各种拭子样品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽喉拭子、阴道拭子等。
可以用于H1N1流感病毒和其他任何可以用拭子取样的病毒。
可以用柱式病毒DNA提取试剂盒或柱式病毒RNA提取试剂盒提取病毒核酸。
试剂本身安全环保无毒。
储存条件:常温,有效期一年。
脂质过氧化物亚油(linoleic acid)ELISA定量测定试剂盒48/96次人生长相关蛋白43(GAP-43)ELISA试剂盒,
脂质过氧化物亚油(linoleic acid)高效液相色谱 (HPLC)分析试剂盒20次小鼠Ⅰ型胶原交联羧末端肽(ⅠCTP)ELISA试剂盒,
细胞硫代反应物(TBARS)比色法定量检测试剂盒20次小鼠氧化型谷胱甘肽(GSGS)ELISA试剂盒,
组织硫代反应物(TBARS)比色法定量检测试剂盒20次小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒,
血液硫代反应物(TBARS)比色法定量检测试剂盒20次兔子组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)ELISA试剂盒,
体液硫代反应物(TBARS)比色法定量检测试剂盒20次小鼠可溶性核因子κB受体活化因子配(sRANKL)ELISA试剂盒,
名称规格小鼠生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒,
细胞内蛋白氧化(羰化;carbonyl)比色法测定试剂盒20次大鼠化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA试剂盒,
组织内蛋白氧化(羰化;carbonyl)比色法测定试剂盒20次大鼠周期素D2(Cyclin-D2)ELISA试剂盒,
血液蛋白氧化(羰化;carbonyl)比色法测定试剂盒20次大鼠内皮脂肪酶(EL)ELISA试剂盒,
体液蛋白氧化(羰化;carbonyl)比色法测定试剂盒20次大鼠主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ)ELISA试剂盒,
纯化线粒体蛋白氧化(羰化;carbonyl)比色法测定试剂盒20次大鼠睫状神经营养因子(CNTF)ELISA试剂盒,
植物蛋白氧化(羰化;carbonyl)比色法测定试剂盒20次大鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒,
冰冻切片蛋白氧化(羰化;carbonyl)免疫染色测定试剂盒10次豚鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒,
细胞内蛋白氧化(羰化;carbonyl)荧光检测试剂盒20次猪髓脂性蛋白(MBP)ELISA试剂盒,
CCL19/MIP-3 beta 巨噬炎性蛋白19抗体全氟辛 分析标准品, 用于环境分析
CCL26/Eotaxin 3 嗜粒趋化蛋白3抗体2,4,6-三磺 5 % (w/v) 水溶液
CCL27/CTACK 皮肤T虏获趋化因子抗体2-硫 96%
Dectin-1/CLECSF12 C型凝集素结构域家族7成员A姥鲛烷 98%
CCR-1 表面趋化因子受体1抗体4-(1-吡咯烷)苯 97%
Dectin-2 C型凝集素结构域家族6成员A抗体聚苯烯,1000 分析标准品
CCR-2/5/CD192 表面趋化因子受体2/5抗体聚(4-苯烯磺-共聚-马来)钠盐 摩尔比率3:1
CCR-2A 表面趋化因子受体2A抗体聚(4-苯烯磺-共聚-马来)钠盐 摩尔比率1:1
DH5a感受态细胞其他氨基酸:≤0.50%
重金属:≤10ppm
砷盐:≤2ppm
灼烧残渣:≤0.20%
干燥失重:≤0.50%
性状(以下信息仅供参考):白色结晶粉末。熔点:~194°C。热至225~227℃分解。溶于水(g/L):25℃为20.54,50℃为49.34,75℃为118.6,100℃为284.9,微溶于乙醇、和石油醚
用途:本品仅供科研,不得用于其它用途
保存:RT

热门标签:DH5a感受态细胞

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