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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

第10年

当前位置: 阿仪网 > 上海谷研实业有限公司 > 产品展示 > 分子试剂 > 克隆与表达 > DH10B感受态细胞

DH10B感受态细胞

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/11/5 9:41:34

产品摘要:DH10B感受态细胞正在出售的产品:雷奈酸锶生长色素P450亚酶CYP2C9(CEC)活性荧光定量检测试剂盒
GDC-0941人绒毛膜促性腺β亚单位体外非系统色素P450亚酶CYP2C9(CEC)活性荧光定量检测试剂盒
L-165041人胎盘泌乳素(HPL

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试剂盒

ATCC细胞

标准品

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生化试剂

菌种

培养基

elisa试剂盒

PCR检测试剂盒

生化检测试剂盒

原代细胞

质粒

荧光PCR试剂盒

细胞生物学试剂

分子试剂

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旗舰版网址:http://www.elisaguyan.com

详细内容

操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
产品属性:
中文名称:DH10B感受态细胞
英文名称:DH10B Competent Cells
产品规格:10×100μl
产品货号:GOY-F10971
经Ca离子处理后可摄取外源DNA(Plasmid、Phage DNA),处于这种状态的细胞称作感受态细胞(Competent Cells)。在进行基因重组时,使用感受态细胞的转化实验应用十分广泛。制作基因文库、重组质粒体以及进行亚克隆实验时,特别是目的基因含量十分低的情况下时,使用高效的感受态细胞十分重要。使用pUC57质粒检测该DH10B感受态细胞,转化效率可达107~108。在⁻⁷0℃下保存数月转化效率不发生明显降低。
英文名称:DH10B Competent Cells
产品规格:10×100μl
经Ca离子处理后可摄取外源DNA(Plasmid、Phage DNA),处于这种状态的细胞称作感受态细胞(Competent Cells)。在进行基因重组时,使用感受态细胞的转化实验应用十分广泛。制作基因文库、重组质粒体以及进行亚克隆实验时,特别是目的基因含量十分低的情况下时,使用高效的感受态细胞十分重要。使用pUC57质粒检测该DH10B感受态细胞,转化效率可达107~108。在⁻⁷0℃下保存数月转化效率不发生明显降低。
操作方法:
1.取出感受态细胞,置于冰上5分钟,解冻。
2.向感受态细胞中加入1-10μl连接产物,轻弹离心管底部混匀,冰上放置30 min。
3.置于42℃热激60s后,迅速置于冰上急冷2分钟。
4.向热激完毕的感受态细胞中,加入700μl经37℃预热的LB(或SOC)培养基(不含抗生素),37℃振荡(225 rpm)培养1小时。目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达,使菌体复苏。
5.室温4,000 rpm离心5分钟,弃去700μl上清后,用剩余100μl培养基重悬细胞并涂布到含相应抗生素的LB琼脂平板表面。
6.将平板置于37℃培养,12~14小时后可出现菌落。
注意事项:
1.感受态细胞应保存在⁻⁷0℃,不可多次冻融和放置时间过长,以避免降低感受态细胞的转化效率。
2.所有操作均需注意无菌操作。
3.pUC18 plasmid 标准品(0.2 ng/μl),含有氨苄青抗性,作为阳性对照使用,每次转化5μl,可以得到约100~1000个克隆。
储存条件:-80℃可保存一年。
实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2.在适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(*—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
细胞脂质过氧化物异构列腺素(ISOPROSTANE)细胞流式分析试剂盒10次人c-sis ELISA试剂盒,
冰冻切片脂质过氧化物异构列腺素(ISOPROSTANE)荧光染色试剂盒10次人质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒,TIMP-1 ELISA kit
石蜡切片脂质过氧化物异构列腺素(ISOPROSTANE)荧光染色试剂盒10次人花生四烯(AA)ELISA试剂盒,AA ELISA
脂质过氧化物异构列腺素(ISOPROSTANE)ELISA定量测定试剂盒48/96次人一氧化氮合成酶(NOS)ELISA试剂盒,
脂质过氧化物异构列腺素(ISOPROSTANE)高效液相色谱 (HPLC)分析试剂盒20次人血管舒缓激肽(BK)ELISA试剂盒,
细胞脂质过氧化物反式十八碳四烯(cis-parinaric acid)比色法测定试剂盒20次人热休克蛋白60(Hsp-60)ELISA试剂盒,
细胞脂质过氧化物反式十八碳四烯(cis-parinaric acid)细胞流式分析试剂盒10次人类似RIKEN cDNA 2010109K09 因 ELISA试剂盒,
冰冻切片脂质过氧化物反式十八碳四烯(cis-parinaric acid)荧光染色试剂盒10次人淋巴抗原6复合物因座A(Ly6a)ELISA试剂盒,
石蜡切片脂质过氧化物反式十八碳四烯(cis-parinaric acid)荧光染色试剂盒10次人八聚体转录因子(OTF2A)ELISA试剂盒,
脂质过氧化物反式十八碳四烯(cis-parinaric acid)ELISA定量测定试剂盒48/96次人吡啶酚(PYD)ELISA试剂盒,
脂质过氧化物反式十八碳四烯(cis-parinaric acid)高效液相色谱 (HPLC)分析试剂盒20次人12羟二十烷四烯(12-HETE)ELISA试剂盒,
细胞脂质过氧化物亚油(linoleic acid)比色法测定试剂盒20次人抗巨病抗体IgM(anti-CMV IgM)ELISA试剂盒,
细胞脂质过氧化物亚油(linoleic acid)细胞流式分析试剂盒10次人抗抗体(AsAb)ELISA试剂盒,
冰冻切片脂质过氧化物亚油(linoleic acid)荧光染色试剂盒10次人补体调节蛋白(CCP)ELISA试剂盒,
石蜡切片脂质过氧化物亚油(linoleic acid)荧光染色试剂盒10次人补体片断5b(C5b)ELISA试剂盒,
CCL14/HCC-1 嗜粒趋化蛋白14抗体原卟啉 95%
CCL15/MIP5 巨噬炎性蛋白15聚烯 平均分子量M.W ~1,800
CCL16/HCC-4 巨噬炎性蛋白16抗体聚烯 平均分子量M.W ~450,000
CCL17/TARC 胸腺活化调节趋化因子抗体液体石蜡 色谱固定液,80℃
CCL21/6Ckine 淋巴趋化因子CCL21抗体液体石蜡 分子生物学
CCL20/MIP3 alpha 巨噬炎性蛋白20抗体液体石蜡 包埋
CCL23/MIP3 巨噬炎性蛋白抗体正十二烷苯 分析标准品,≥99.5% (GC)
CCL24/Eotaxin-2 嗜粒趋化蛋白24抗体6-正-2-硫代尿嘧啶 分析标准品
DH10B感受态细胞DL-谷氨酸
英文名称:DL-Glutamic acid;(±)-2-Aminoglutaric acid;(±)-2-Aminopentanedioic acid
其他名称:2-氨基戊二酸;DL-麸氨基
CAS号:617-65-2
C5H9NO4=147.13
别:BR
含量:≥99.0%
氯化物:≤0.10%
注意事项:
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后,轻摇时*与细胞充分接触,然后倒掉大部分*,利用剩余的少量*再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。

热门标签:DH10B感受态细胞

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