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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

第10年

当前位置: 阿仪网 > 上海谷研实业有限公司 > 产品展示 > 分子试剂 > 克隆与表达 > PBR322载体

PBR322载体

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/11/5 9:41:34

产品摘要:PBR322载体正在出售的产品:心血管发育中胚层相关蛋白1抗体Phospho-PAK4 (Ser99) peptide 磷酸化p21活酶4多肽抗原
转移相关蛋白2抗体PAK7/PAK5/MBT 活酶PAK7/PAK5抗原
MYC结合蛋白2抗体PAR-1

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产品完善度: 访问次数:589

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生化试剂

菌种

培养基

elisa试剂盒

PCR检测试剂盒

生化检测试剂盒

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细胞生物学试剂

分子试剂

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详细内容

产品属性:
中文名称:PBR322载体
英文名称:PBR322 plasmid
产品规格:20ug
产品货号:GOY-F10935
质粒载体pBR322是研究得多,使用早且应用广泛的质粒载体之一。符号质粒载体pBR322中的“p代表质粒;“BR”代表两位两位研究者Bolivar和Rogigerus姓氏的字,“322”是实验编号。 pBR322是一个人工构建的重要质粒,有万能质粒之称。它是由pSF2124、pMB8及pSC101三个亲本质粒经复杂的重组过程构建而成的。本产品为纯化的PBR322质粒溶于TE缓冲液,可直接用于载体构建、转化等分子克隆实验操作。
质粒载体pBR322的大小为4361bp,相对分子质量较小的是它第yi个优点。优点之二是它带有一个复制起始位点,保证了该质粒只在的细胞中行使复制的功能。具有氨苄青抗性基因和四环素抗性基因两种抗生素抗性基因,可供转化子的选择标记是它的第三个优点。
储存条件:-20℃
注意事项:
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后,轻摇时*与细胞充分接触,然后倒掉大部分*,利用剩余的少量*再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。
实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2.在适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(*—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
纯化线粒体膜流动性(membrane fluidity)荧光检测试剂盒20次小鼠可溶性血小板内皮粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA试剂盒,
细胞琥珀脱氢酶(SDH)活性比色法定量检测试剂盒20次大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISA试剂盒,
组织琥珀脱氢酶(SDH)活性比色法定量检测试剂盒20次兔子皮质酮/肾上腺酮(CORT)ELISA试剂盒,
线粒体琥珀脱氢酶(SDH)活性比色法定量检测试剂盒20次兔子质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒,
真菌/酵母琥珀脱氢酶(SDH)活性比色法定量检测试剂盒20次槐凝集素(SJA)ELISA试剂盒,
植物琥珀脱氢酶(SDH)活性比色法定量检测试剂盒20次抗斑疹伤寒抗体(anti-typhus-Ab)ELISA试剂盒--动物,人
分离线粒体纯度双酶法(SDH/AP)检测试剂盒20次结晶紫增菌液 用于副溶血性弧菌的选择性增菌培养(GB标准)
亚细胞分离试剂题L-精氨酯
名称规格2,4-二氧
分离溶酶体纯度标志酶组织蛋白酶D酶法检测试剂盒20次小鼠脂酰丝氨(PS)ELISA试剂盒,
溶酶体膜通透性(LMP)吖啶橙荧光检测试剂盒20次小鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA试剂盒,
溶酶体膜完整性(integrity)荧光检测试剂盒20次大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒,
溶酶体膜完整性(integrity)组织蛋白酶D释放法检测试剂盒20次诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA酶联免疫吸附试剂盒--卖
溶酶体膜完整性(integrity)性酶活性潜伏检测试剂盒20次BPL琼脂
细胞样品亚细胞结构分离试剂盒10次人维生素B12(VB12)ELISA试剂盒,
Annexin A1 膜粘连蛋白A1抗体4-十二烷苯磺 95%
Annexin I 膜粘连蛋白 I抗体1,8-辛二 98%
Annexin II 膜粘连蛋白 Ⅱ抗体二苯 分析标准品
Annexin III 膜粘连蛋白A3抗体铅试剂 高纯,99%
Annexin IV 膜粘连蛋白 A4抗体4,4'-二氨二苯 分析标准品
Annexin V 膜粘连蛋白5抗体1,2-二苯 Standard for GC,≥99.0% (GC)
Annexin VI 膜粘连蛋白 VI抗体二硫代酰 98%
Annexin V 重组膜粘连蛋白-5(人)抗体1,1-二苯-2-苦肼 96%
PBR322载体氯化物:≤0.02%
硫酸盐:≤0.03%
重金属:≤0.001%
铁盐:≤20ppm
铵盐:≤0.05%
砷盐:≤0.0001%
性状(以下信息仅供参考):白色结晶粉末
用途:本品仅供科研,不得用于其它用途

热门标签:PBR322载体

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