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pEGFP-N1 哺乳动物表达载体
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/11/5 9:41:34
产品摘要：pEGFP-N1 哺乳动物表达载体正在出售的产品：基质金属蛋白酶18/19抗体phospho-NFKB p65 (pSer536) peptide 磷酸化核因子/磷酸化k基因结合核因子抗原
增殖相关蛋白MAGOH抗体NF-κBp50(p50 NF-kapp
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详细内容
产品属性：
中文名称：pEGFP-N1 哺乳动物表达载体
英文名称：
产品规格：20μl
产品货号：GOY-F10923
中文名称：pEGFP-N1 哺乳动物表达载体
英文名称：
产品规格：20μl
产品货号：GOY-F10923
| GFP-N1编码野生型GFP的一个红移变体，已被优化，有更亮的荧光，在哺乳细胞有更高的表达，(大激发波长=488nm，大释放波长=507nm)。 EGFP基因编码序列，含有过190个沉默碱基的变化，这符合人类密码子使用偏好。 EGFP序列的一侧已经转变成和KozaK一致的翻译起始位点，进一步提高了在真核细胞的翻译效率。 启动子：CMV 复制子：pUC ori，f1 ori 终止子：SV40 ploy(A) 载体别名：pEGFPN1，pEGFP N1 载体分类：哺乳细胞表达载体，荧光蛋白报告载体 载体大小：4733bp 载体标签：增型荧光蛋白报告基因EGFP 原核抗性：卡那(Kanamycin) 筛选标记：新(Neomycin) 克隆菌株：DH5α 表达宿主：哺乳细胞 培养条件：37℃，LB培养基 5＇ 测序引物：CMV-F：5＇-CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG-3＇ 3＇ 测序引物：EGFP-N：5＇-CGTCGCCGTCCAGCTCGACCAG-3＇ 备注：载体的MCS多克隆酶切位点，有EcoR I，BamH I等酶切位点。 储存条件：-20℃ |
注意事项：
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后，轻摇时*与细胞充分接触，然后倒掉大部分*，利用剩余的少量*再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞，比如在检测凋亡的同时检测细胞周期，只能选用Annexin V-FITC，而不能选用Annexin V-EGFP，因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育，并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片，可以和Annexin V结合，对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后，轻摇时*与细胞充分接触，然后倒掉大部分*，利用剩余的少量*再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞，比如在检测凋亡的同时检测细胞周期，只能选用Annexin V-FITC，而不能选用Annexin V-EGFP，因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育，并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片，可以和Annexin V结合，对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。
实验要点:
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2．在适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的异戊醇（*—异戊醇=25:24:1），异戊醇的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
动物腮腺组织细胞分离培养试剂盒10次小鼠克拉拉蛋白（CC16）ELISA试剂盒,
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2．在适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的异戊醇（*—异戊醇=25:24:1），异戊醇的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
动物腮腺组织细胞分离培养试剂盒10次小鼠克拉拉蛋白（CC16）ELISA试剂盒,
动物垂体组织细胞分离培养试剂盒10次Ⅰ型胶原（Col Ⅰ）ELISA试剂盒－－动物，人
动物列腺组织细胞分离培养试剂盒10次抗流行性出血热病抗体IgG （EHF）ELISA试剂盒－－动物，人
动物组织细胞分离培养试剂盒10次戊型肝炎病IgG（HEV-IgG）ELISA试剂盒－－动物，人
动物鳞片（Scales）组织细胞分离培养试剂盒10次我妻氏培养础
动物皮肤组织细胞分离培养试剂盒10次小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1（IGFBP-1）ELISA试剂盒,
动物脾脏组织细胞分离培养试剂盒10次小鼠肾上腺素（EPI）ELISA试剂盒,
动物胸腺组织细胞分离培养试剂盒10次小鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA（α-Fodrin IgG/IgA）ELISA试剂盒,
动物状腺组织细胞分离培养试剂盒10次小鼠凝血因子Ⅹ（FⅩ）ELISA试剂盒,
动物扁桃腺组织细胞分离培养试剂盒10次抑瘤素M（OSM）ELISA试剂盒－－动物，人
动物肿瘤组织细胞分离培养试剂盒10次胆（CA）ELISA试剂盒－－动物，人
人体NK细胞分离试剂盒10次促黄体激素（LH）ELISA试剂盒－－动物，人
细胞繁殖与毒性检测试剂题L-丝氨
产品名称规格蘑菇假单胞菌价格
结晶紫细胞群落染色试剂盒250次小鼠环孢素A（CsA）ELISA试剂盒,
ACTH (1-39) 促肾上腺皮质激素(1-39)抗体苯 无水, 99.8%
ACTH (18-39) 促肾上腺皮质激素ACTH(18-39)抗体叔丁 分析标准品
ACTH (7-23) 促肾上腺皮质激素ACTH (7-23)抗体4-叔丁吡啶 98%
Actin alpha 肌动蛋白α抗体邻苯二丁苄酯 分析标准品
Actinin alpha 4 α-辅肌动蛋白4抗体苯 Standard for GC，≥99.5%（GC)
F-Actin 纤维状肌动蛋白抗体聚氧烯月桂 高纯，Brij-35
AD7c-NTP 神经丝蛋白抗体2-溴 分析标准品
AD7C-NTP(human) 神经丝蛋白抗体（人）2-溴-5-氟吡啶 99%
pEGFP-N1 哺乳动物表达载体含量：≥99.0%
pEGFP-N1 哺乳动物表达载体含量：≥99.0%
比旋光度：+23.5±1.0 º（5.5g/100ml,6N HCL)
PH：5.0～6.5
干燥失重：≤0.20%
灼烧残渣：≤0.10%
重金属：≤10ppm
砷盐：≤1ppm
硫酸盐：≤0.02%
热门标签：pEGFP-N1,哺乳动物表达载体
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