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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

第10年

当前位置: 阿仪网 > 上海谷研实业有限公司 > 产品展示 > 分子试剂 > 克隆与表达 > JM109化学感受态细胞

JM109化学感受态细胞

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/11/5 9:41:34

产品摘要:JM109化学感受态细胞正在出售的产品:成熟T增殖蛋白1抗体MPO peptide 髓过氧化物酶抗原
丝裂原活化蛋白酶8相互作用蛋白1抗体MRP2 (multidrug resistance-associated protein2) 多药耐药相关蛋白2$r

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产品完善度: 访问次数:579

试剂盒

ATCC细胞

标准品

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菌种

培养基

elisa试剂盒

PCR检测试剂盒

生化检测试剂盒

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分子试剂

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详细内容

产品属性:
中文名称:JM109化学感受态细胞
英文名称:JM109 Chemically Competent Cell
产品规格:20×100μl|100×100μl
产品货号:GOY-F10917
JM109菌株来源于E.coli K strain,是提取高质量DNA的理想菌株,recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。
携带hsdR17基因型背景,使得异源DNA不被内源核酸酶系统降解。laqI qZΔM15的存在使JM109可用于构建克隆,蓝白斑筛选实验;
JM109感受态细胞经特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率可达1×109cfu/μg。
保存条件:-80℃
基因型:
endA1 recA1 gyrA96 thi-1 hsdR17(rk-,mk+)relA1 supE44 D(lac-proAB)[F′traD36 proAB laqIqZΔM15]
操作说明:
1.JM109感受态细胞放置冰中融化(或放手心或室温片刻,待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中),加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀,冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项:
1.感受态细胞好在冰上融化。
2.混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少终用于涂板的菌量。
注意事项:
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后,轻摇时*与细胞充分接触,然后倒掉大部分*,利用剩余的少量*再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。
实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2.在适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(*—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
细胞培养污染性支原体M.hyorhinis鉴定16S rDNA20次小鼠神经营养因子4(NT-4)ELISA试剂盒,
PCR扩增检测试剂盒小鼠组蛋白H2b(histon-H2b)ELISA试剂盒,
细胞培养污染性支原体M.orale鉴定16S rDNA20次小鼠超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA试剂盒,
PCR扩增检测试剂盒小鼠白介素27(IL-27)ELISA试剂盒,
细胞培养污染性支原体M.hominis鉴定16S rDNA20次兔子皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒,
PCR扩增检测试剂盒促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒--动物,人
细胞培养污染性支原体M.arginini鉴定16S rDNA20次小鼠催产素(OT)ELISA试剂盒,
PCR扩增检测试剂盒小鼠抑瘤素M(OSM)ELISA试剂盒,
细胞培养污染性支原体A.laidlawii鉴定16S rDNA20次小鼠中性粒弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒,
PCR扩增检测试剂盒小鼠抗凝血酶受体(ATR)ELISA试剂盒,
细胞培养抗支原体污染试剂盒10次内肽-2(EM-2)ELISA试剂盒--动物,人
细胞脂质生成比色法定量检测试剂盒卵巢癌标志物CA125ELISA试剂盒--动物,人
地塞米松细胞脂肪诱导生成比色法定量检测试剂盒20次卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)ELISA试剂盒--动物,人
异丁细胞脂肪诱导生成比色法定量检测试剂盒20次氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)ELISA试剂盒--动物,人
胰岛素细胞脂肪诱导生成比色法定量检测试剂盒20次神经髓鞘蛋白(p2)ELISA试剂盒--动物,人
5-HTR2A 5-羟色受体2A抗体3-氨吡啶 分析标准品
5-HTT 5-羟色转运蛋白抗体氨蝶呤 98%
5-HTR3 5-羟色受体3抗体草高铁铵 98%
5-HTR4 5-羟色受体4抗体杀草强 分析标准品
5-LOX 5-脂氧合酶抗体烯, 含稳定剂铜, 97%
Phospho-5-Lipoxygenase (Ser271) 化5-脂氧合酶抗体2,2′-联氨-双(3-苯并噻唑啉-6-磺)二盐 98%
Phospho-5-Lipoxygenase (Ser663) 化5-脂氧合酶抗体4-氨-3-羟苯 98%
8-OHdG 8-羟脱氧鸟苷抗体亚硫铵 94%
JM109化学感受态细胞其他名称:L-硝基精氨酸;NG-硝基-L-精氨酸
CAS号:2149⁻⁷0-4
C6H13N5O4=219.20
别:BR
含量:≥99.0%
比旋光度:+19~+25°(C=2,2N HCl)
熔点:239~246℃
性状(以下信息仅供参考):白色或类白色粉末

热门标签:JM109化学感受态细胞

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