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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

第10年

当前位置: 阿仪网 > 上海谷研实业有限公司 > 产品展示 > 分子试剂 > 克隆与表达 > 一步法定向表达试剂盒

一步法定向表达试剂盒

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/11/5 9:41:34

产品摘要:一步法定向表达试剂盒正在出售的产品:层粘蛋白α2抗体HAI-1(Hepatocyte Growth Factor Activator Inhibitor 1) 肝生长因子活物抑制因子抗原
内皮脂肪酶抗体HBA1(hemoglobin alpha 1) 人

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产品完善度: 访问次数:605

试剂盒

ATCC细胞

标准品

RNA/DNA提取

生化试剂

菌种

培养基

elisa试剂盒

PCR检测试剂盒

生化检测试剂盒

原代细胞

质粒

荧光PCR试剂盒

细胞生物学试剂

分子试剂

细胞系

细胞培养基

抗体

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详细内容

实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2.在适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(*—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
产品属性:
中文名称:一步法定向表达试剂盒
英文名称:One step directional expression Kit
产品规格:20次
产品货号:GOY-F10877
本试剂盒载体采用了先进的定向拓扑异构酶克隆技术可以在5分钟内将待表达目的基因(高保真酶扩增的平末端片段)一步法定向克隆到高效pET增型载体,利用T7lac启动子进行严谨调控,高效表达。
试剂盒组分:
载体————————————20μl
10×Enhancer————————20μl
试剂盒特点:
1. 简单快速,加入待表达基因片段室温仅需5分钟便可完成原核表达载体构建。
2. 定向克隆技术,过90%插入为正确方向插入,减少克隆筛选耗费的时间。
3. T7lac启动子严谨调控本底表达,实现表达过程的可控和高效表达。
4. 氨苄抗性标记筛选,N端和C端6 ´ Histag标签方便表达后纯化。
5. 带肠激酶(EK)酶切位点,可以方便将标签切除得到不带标签的蛋白。
储存条件:-20℃,有效期半年。
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
注意事项:
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后,轻摇时*与细胞充分接触,然后倒掉大部分*,利用剩余的少量*再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。
非/游离巯含量比色法定量检测试剂盒20次链球菌B组探针法荧光定量PCR试剂盒
巯/结合巯含量比色法定量检测试剂盒20次乙型肝炎E型探针法荧光定量PCR试剂盒
总巯含量荧光定量检测试剂盒20次松鼠猴疱疹探针法荧光定量PCR试剂盒
非/游离巯含量荧光定量检测试剂盒20次猿疱疹探针法荧光定量PCR试剂盒
巯/结合巯含量荧光定量检测试剂盒20次佩氏着色霉探针法荧光定量PCR试剂盒
通用型盐含量比色法定量检测试剂盒三代虫探针法荧光定量PCR试剂盒
通用型盐含量荧光定量检测试剂盒乙型肝炎探针法荧光定量PCR试剂盒
通用型亚盐比色法定量检测试剂盒沿岸单孢子虫探针法荧光定量PCR试剂盒
通用型亚盐荧光定量检测试剂盒20次流感嗜血杆菌型探针法荧光定量PCR试剂盒
通用型氮含量克尔道(Kjeldahl)法定量检测试剂盒20次流感嗜血杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
肉类氮含量克尔道(Kjeldahl)法定量检测试剂盒20次山羊痘探针法荧光定量PCR试剂盒
饲料氮含量克尔道(Kjeldahl)法定量检测试剂盒20次似血矛线虫探针法荧光定量PCR试剂盒
谷类氮含量克尔道(Kjeldahl)法定量检测试剂盒20次乙型肝炎B型探针法荧光定量PCR试剂盒
土壤氮含量克尔道(Kjeldahl)法定量检测试剂盒20次幽门螺旋杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
血瓜氨含量比色法定量检测试剂盒20次着色霉探针法荧光定量PCR试剂盒
一步法定向表达试剂盒Diosbulbin G
67567-15-1
中文名: 黄独素G
别 名:
分子式:C19H22O6
性状:Powder
纯度:97.0%
Creticoside C
53452-34-9
中文名:
别 名:
分子式:C26H44O8
性状:Powder
纯度:96.0%

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