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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

第10年

当前位置: 阿仪网 > 上海谷研实业有限公司 > 产品展示 > 分子试剂 > 克隆与表达 > 零背景TOPO-TA克隆试剂盒

零背景TOPO-TA克隆试剂盒

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/11/5 9:41:34

产品摘要:零背景TOPO-TA克隆试剂盒正在出售的产品:转录因子LBX1抗体F1 operon positive regulatory protein(NT) 鼠疫耶尔森氏菌F1荚膜蛋白(N端多肽)
神经特异性转录因子LDB1抗体F1 operon positive

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产品完善度: 访问次数:559

试剂盒

ATCC细胞

标准品

RNA/DNA提取

生化试剂

菌种

培养基

elisa试剂盒

PCR检测试剂盒

生化检测试剂盒

原代细胞

质粒

荧光PCR试剂盒

细胞生物学试剂

分子试剂

细胞系

细胞培养基

抗体

企业档案

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旗舰版网址:http://www.elisaguyan.com

详细内容

实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2.在适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(*—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
产品属性:
中文名称:零背景TOPO-TA克隆试剂盒
英文名称:Zero TOPO-TA Cloning Kit
产品规格:20T
产品货号:GOY-F10859
本试剂盒是利用拓扑异构酶(Topoisomerase)高效快速连接DNA段的原理进一步研发而成,与传统的T4连接酶相比,具有以下优势:
1)快速,仅需1-5分钟即可完成连接反应。
2)高效,无自连现象,阳性克隆率接近100%,无需设置蓝白斑筛选;
3)操作简单,从连接到涂板仅需15-20min。操作过程省去冰浴、热激和1h复苏等。
4)可连接长达10kb目的产物。
产品用途
A尾PCR产物的快速克隆。克隆后PCR产物的快速测序【使用M13F/M13R引物】。
pESI-T vector (30ng/μl)——————20μl
1kb control insert(40ng/μl)——————5μl
10×Enhancer——————20μl
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期12个月。
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
注意事项:
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后,轻摇时*与细胞充分接触,然后倒掉大部分*,利用剩余的少量*再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。
细菌乙醇比色法定量检测试剂盒20次三偏磷钠
乙醇待测样品处理试剂盒20次异佛尔
酒类比色法定量检测试剂盒20次龙血 A
饮料比色法定量检测试剂盒20次远志口山
食物比色法定量检测试剂盒20次钙抗体流式免疫组化Anti-Calpain 1
果菜比色法定量检测试剂盒20次胰高血糖样肽-1抗体流式免疫组化
调料比色法定量检测试剂盒20次L-脯氨
植物果聚糖化学比色法定量检测试剂盒20次L-甘氨乙酯盐盐
食物果聚糖化学比色法定量检测试剂盒20次D-组氨盐盐
蓝藻果聚糖化学法比色法定量检测试剂盒20次甘氨乙酯盐盐
植物果聚糖连续循环反应比色法定量检测试剂盒20次顺二钠
食物果聚糖连续循环反应比色法定量检测试剂盒20次4-叔丁
蓝藻果聚糖连续循环反应比色法定量检测试剂盒20次间二
酒类果糖激法定量检测试剂盒20次聚乙二醇1000
果菜果糖激法定量检测试剂盒20次2-亚-1-萘
零背景TOPO-TA克隆试剂盒15-Hydroxy⁻⁷-oxodehydroabietic acid
95416-25-4
中文名:
别 名:
分子式:C20H26O4
性状:Powder
纯度:98.0%
2,16,19-Kauranetriol 2-O-β-D-allopyranoside
195723-38⁻⁷
中文名:
别 名:
分子式:C26H44O8
性状:Powder
纯度:97.5%

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