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第10年

当前位置: 阿仪网 > 上海谷研实业有限公司 > 产品展示 > 分子试剂 > 克隆与表达 > pGL6-TA报告基因质粒

pGL6-TA报告基因质粒

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/11/5 9:41:34

产品摘要:pGL6-TA报告基因质粒正在出售的产品:荧光素酶抗体CD14(cluster of differentiation antigen 14) CD14/内素受体抗原
亮氨基肽酶3抗体CD28 CD28抗原
肝脏型脂肪酸结合蛋白抗体CD166/ALCAM

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产品完善度: 访问次数:615

试剂盒

ATCC细胞

标准品

RNA/DNA提取

生化试剂

菌种

培养基

elisa试剂盒

PCR检测试剂盒

生化检测试剂盒

原代细胞

质粒

荧光PCR试剂盒

细胞生物学试剂

分子试剂

细胞系

细胞培养基

抗体

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详细内容

产品属性:
中文名称:pGL6-TA报告基因质粒
英文名称:pGL6-TA Reporter gene plasmid
产品规格:1μg|100μg
产品货号:GOY-F10813
pGL6-TA报告基因质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到低。
pGL6-TA质粒主要用于在其多克隆位点插入特定的启动子、增子等调控元件研究该调控序列的基因转录调控活性。pGL6-TA和pGL6相比在多克隆位点和luc基因之间加入了一段minimal TA promoter,使luc基因的基础转录水平提高。
使用说明:
使用时请先取少量本质粒转化,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
用于插入调控序列:在多克隆位点选取适当的酶切位点,经酶切处理后连入适当的基因转录调控序列。pGL6-TA也可以用作报告基因检测时的阴性对照。
pGL6-TA质粒以及以此质粒为模板构建的质粒可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT271)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒
注意事项:
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后,轻摇时*与细胞充分接触,然后倒掉大部分*,利用剩余的少量*再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。
实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2.在适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(*—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
低盐LB细菌培养500毫升对羟
通用型LB细菌培养500毫升聚乙二醇4000
细菌抗生敏感性检测试剂题一缩二
名称规格4-氨乙
细菌抗生(青霉)敏感性DISC弥散(KIRBY-BAUER)检测试剂盒20次并蒽
细菌抗生(氨卞青霉)敏感性DISC弥散(KIRBY-BAUER)检测试剂盒20次三
细菌抗生(羧卞青霉)敏感性DISC弥散(KIRBY-BAUER)检测试剂盒20次银
细菌抗生(CEFIXIME)敏感性DISC弥散(KIRBY-BAUER)检测试剂盒20次2-氨噻唑
细菌抗生(MOXALACTAM)敏感性DISC弥散(KIRBY-BAUER)检测试剂盒20次天麻
细菌抗生(庆大霉)敏感性DISC弥散(KIRBY-BAUER)检测试剂盒20次枣仁皂苷 B
细菌抗生(卡那霉)敏感性DISC弥散(KIRBY-BAUER)检测试剂盒20次生姜油
细菌抗生(链霉)敏感性DISC弥散(KIRBY-BAUER)检测试剂盒20次荭草苷
细菌抗生(四环)敏感性DISC弥散(KIRBY-BAUER)检测试剂盒20次23-乙泽泻醇B
细菌抗生(红霉)敏感性DISC弥散(KIRBY-BAUER)检测试剂盒20次黄柏
细菌抗生(多粘霉)敏感性DISC弥散(KIRBY-BAUER)检测试剂盒20次薄芝菌丝体粉
pGL6-TA报告基因质粒ent-3β-Hydroxykaur-16-en-19-oic acid
66556-91-0
中文名:
别 名:
分子式:C20H30O3
性状:Powder
纯度:97.5%
Pterokaurane R
67349-43-3
中文名:
别 名:
分子式:C20H34O3
性状:Powder
纯度:%

热门标签:pGL6-TA报告基因质粒

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