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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

第10年

当前位置: 阿仪网 > 上海谷研实业有限公司 > 产品展示 > 分子试剂 > 核酸扩增 > phi29 DNA聚合酶2.0

phi29 DNA聚合酶2.0

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/11/5 9:41:34

产品摘要:phi29 DNA聚合酶2.0正在出售的产品:白介素-22抗体VIP (Vasoactive Intestinal peptide) 血管活性肠肽
白介素29抗体IGF-II( Insulin-like Growth Factor-II ) 胰岛素样生长

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产品完善度: 访问次数:620

试剂盒

ATCC细胞

标准品

RNA/DNA提取

生化试剂

菌种

培养基

elisa试剂盒

PCR检测试剂盒

生化检测试剂盒

原代细胞

质粒

荧光PCR试剂盒

细胞生物学试剂

分子试剂

细胞系

细胞培养基

抗体

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旗舰版网址:http://www.elisaguyan.com

详细内容

产品属性:
中文名称:phi29 DNA聚合酶2.0
英文名称:phi29 DNA Polymerase 2.0
产品规格:500U|10000U
产品货号:GOY-F10712
产品特点:
链置换能力
连续合成能力
扩增的高保真性
产品应用:
DNA恒温滚环扩增
需链置换和DNA连续合成的反应
质粒快速复制
高保真快速复制
储存:-20℃可保存3年。
单位定义:
一个活力单位即在42℃条件下,10分钟内催化0.5pmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。
注意事项:
1×phi29 Buffer:50mM Tris-HCl pH7.5,10mM MgCl2,10mM (NH4)2S04,4mM DTT。必要时可单独额外添加终浓度1mM DTT和0.2mg/ml BSA,可提高反应效率。
该酶的佳反应温度为42℃ (在30~42℃。均有活性)。
65℃ 10min即可使该酶失活。
根据实验类型需要,调整dNTP的浓度100~500μM。
添加Yeast Pyrophosphatase(CAT#:MT0098)可提高DNA产量。
反应引物3’端的硫代修饰可避免引物降解。
注意事项:
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后,轻摇时*与细胞充分接触,然后倒掉大部分*,利用剩余的少量*再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。
实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2.在适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(*—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
细胞Akt/PKB激总活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次水通道-2抗体流式免疫组化
组织Akt/PKB激总活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次内皮抑/内皮他丁抗体流式免疫组化
细胞AURORA-A激活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次胰岛样生长因子结合-2抗体流式免疫组化
组织AURORA-A激活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次神经生长因子抗体流式免疫组化
细胞AURORA-B激活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次质磷-2A抗体流式免疫组化Anti-PP-2A
组织AURORA-B激活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次D-鸟氨盐盐
细胞AURORA-C激活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次β-葡萄糖苷
组织AURORA-C激活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次磷葡萄糖变位
细胞ERK1/2激活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次甘油醛-3-磷脱氢
组织ERK1/2激活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次5-苷二磷二钠盐
细胞P38a激活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次5-一磷二钠盐
组织P38a激活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次核糖核(酵母)
细胞PI3K激活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次脱氧核糖核(小牛胸)
组织PI3K激活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次马铃薯浸出粉
细胞PKA激活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次氯化铟
phi29 DNA聚合酶2.012α-Hydroxyevodol
120722-04-5
中文名:
别 名:
分子式:C26H28O10
性状:Cryst.
纯度:98.0%
3,19-Dihydroxy-6,23-dioxo-12-ursen-28-oic acid
261768-88-1
中文名:
别 名:
分子式:C30H44O6
性状:Powder
纯度:%

热门标签:phi29,DNA聚合酶2.0

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