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KOF DNA聚合酶
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/11/5 9:41:24
产品摘要：KOF DNA聚合酶正在出售的产品：G0/G1期开关调节蛋白2抗体Anti-PACAP-27/38 /FITC 荧光素标记腺苷酸环化酶活肽-27/38抗体IgG
G蛋白偶联受体GPR162蛋白抗体Anti-PACAP-38 /FITC 荧光素标记腺苷酸环
G蛋白偶联受体GPR162蛋白抗体Anti-PACAP-38 /FITC 荧光素标记腺苷酸环
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详细内容
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
产品属性：
中文名称：KOF DNA聚合酶
英文名称：KOF DNA Polymerase
产品规格：250U
产品货号：GOY-F10399
1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
产品属性：
中文名称：KOF DNA聚合酶
英文名称：KOF DNA Polymerase
产品规格：250U
产品货号：GOY-F10399
| 酶是一种经过基因工程改造的高保真DNA聚合酶，具有的3＇→5＇核酸外切酶活性（Proof-reading活性），当聚合反应发生碱基错配时，聚合酶的校正活性可将错配的碱基切除。与普通pfu相比，保真性更高，约为普通taq的50倍，普通pfu的6倍。其扩增性能也比普通Pfu高，成功克服了普通pfu酶扩增效率低的缺陷。 产品用途：用于要求保真度高的PCR反应，包括克隆PCR，DNA段拼接，引入突变，全基因合成，DNA段的补平等。 使用建议： KOF DNA Polymerase 产生的PCR产物为平滑末端，无3’端“A”突出，其PCR产物的克隆有几种方案。 1、PCR引物进行5’ 加磷修饰或将PCR产物磷酸化处理后再直接克隆于平滑末端的载体中（参见实验方案）。 2、将产物3’ 末端加A后再与T载体连接（参见实验方案）。 3、引物中引入15bp与载体同源序列，利用BalbRec PCR产物一步定向无缝克隆试剂盒（Cat#JN0001）直接连接到目的载体。 由于KOF DNA聚合酶的校正活性可引起引物从3’ 端被部分降解。因此在设计引物时应适当增加引物的长度，理想的引物长度为20-30bp。另外为了减少由3’→5’外切酶活性引起的引物降解，尽量在冰上配制反应体系，并后加入KOF酶。 |
实验要点:
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2．在适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的异戊醇（*—异戊醇=25:24:1），异戊醇的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
海洋动物（虾贝类）高质纯化线粒体分离试剂盒10次人胰导管癌；CFPAC-1大鼠水通道4（AQP-4）ELISA试剂盒,
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2．在适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的异戊醇（*—异戊醇=25:24:1），异戊醇的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
海洋动物（虾贝类）高质纯化线粒体分离试剂盒10次人胰导管癌；CFPAC-1大鼠水通道4（AQP-4）ELISA试剂盒,
活体细胞线粒体膜通道孔（MPTP）荧光检测试剂盒20次人食管癌；EC109鸭免疫球E（IgE）ELISA试剂盒,
纯化线粒体膜通道孔（MPTP）荧光检测试剂盒20次人结直肠癌；HCT-15 [HCT15]神经激肽B（NKB）ELISA试剂盒－－动物，人
纯化线粒体膜通道孔（MPTP）比色法检测试剂盒20次人结直肠癌；LS 174T [LS174T]性胨水
冰冻切片组织线粒体膜通道孔（MPTP）荧光检测试剂盒50次人癌；MDA-MB-468人乙呋（AD）ELIS人乙呋（AD）ELISA试剂盒, A试剂盒,
纯化线粒体冻存（学和膜结构保护）50毫升人肺支气管癌；NCI-H1650人补体1q（C1q）ELISA试剂盒,
纯化线粒体冻存（生物能量学保护）50毫升人非小肺癌；NCI-H1975大鼠血纤原（Fbg）ELISA试剂盒,
纯化线粒体II型L－3羟－CoA 脱氢/β淀粉样结合乙醇脱氢（HADHII/ABAD）活性比色法定量检测试剂盒20次人非小肺癌；NCI-H2087仓鼠组织K（cath-K）ELISA试剂盒,
细胞II型L－3羟－CoA 脱氢/β淀粉样结合乙醇脱氢（HADHII/ABAD）活性比色法定量检测试剂盒20次人小肺癌；NCI-H2227兔子可溶性血管粘附分子1（sVCAM-1）ELISA试剂盒,
组织II型L－3羟－CoA 脱氢/β淀粉样结合乙醇脱氢（HADHII/ABAD）活性比色法定量检测试剂盒20次人非小肺癌；NCI-H23抑制（INH）ELISA试剂盒－－动物，人
纯化线粒体呼吸控制率（RCR）定量检测试剂盒20次人肾上皮质癌；NCI-H295R抗型肝炎IgM抗体（anti-HAV）ELISA试剂盒－－动物，人
纯化线粒体磷氧比（ADP/O）定量检测试剂盒20次小鼠源煌绿黄嘧琼脂
纯化线粒体肿胀比色法测定试剂盒50次小鼠胚胎成纤维；3T3-Swiss albino多黏类芽孢杆菌说明书
活体细胞线粒体肿胀流式细胞仪测定试剂盒20次小鼠T淋巴瘤；Cyc-Tag(S49)小鼠血小板衍生生长因子AB（PDGF-AB）ELISA试剂盒,
纯化线粒体肿胀流式细胞仪测定试剂盒20次小鼠骨髓；FDC-P1小鼠17羟孕（17-OHP）ELISA试剂盒,
KOF DNA聚合酶Obolactone
KOF DNA聚合酶Obolactone
712272-88-3
中文名：
别 名：
分子式：C19H18O4
性状：Powder
纯度：%
Euparin
532-48-9
中文名： 泽兰素
别 名：
分子式：C13H12O3
性状：Yellow powder
纯度：98.5%
注意事项：
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后，轻摇时*与细胞充分接触，然后倒掉大部分*，利用剩余的少量*再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞，比如在检测凋亡的同时检测细胞周期，只能选用Annexin V-FITC，而不能选用Annexin V-EGFP，因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育，并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片，可以和Annexin V结合，对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。
注意事项：
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后，轻摇时*与细胞充分接触，然后倒掉大部分*，利用剩余的少量*再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞，比如在检测凋亡的同时检测细胞周期，只能选用Annexin V-FITC，而不能选用Annexin V-EGFP，因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育，并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片，可以和Annexin V结合，对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。
热门标签：KOF,DNA聚合酶
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