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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

第10年

当前位置: 阿仪网 > 上海谷研实业有限公司 > 产品展示 > 分子试剂 > 核酸扩增 > 长片段DNA超速PCR MasterMix

长片段DNA超速PCR MasterMix

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/11/5 9:41:24

产品摘要:长片段DNA超速PCR MasterMix正在出售的产品:颗粒酶D/B/E/N/G/F/H抗体Anti-mucin-1/Muc-1/CD227 /FITC 荧光素标记粘蛋白-1/上皮膜抗原抗体IgG
粒-巨噬集落因子3受体抗体Anti-Muc2/FITC

支付方式:

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产品完善度: 访问次数:818

试剂盒

ATCC细胞

标准品

RNA/DNA提取

生化试剂

菌种

培养基

elisa试剂盒

PCR检测试剂盒

生化检测试剂盒

原代细胞

质粒

荧光PCR试剂盒

细胞生物学试剂

分子试剂

细胞系

细胞培养基

抗体

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旗舰版网址:http://www.elisaguyan.com

详细内容

产品属性:
中文名称:长片段DNA超速PCR MasterMix
英文名称:Fast & Long DNA PCR MasterMix
产品规格:1ml|5ml
产品货号:GOY-F10335
本品包含速长片段DNA聚合酶、dNTPs和优化的反应缓冲液,浓度为2×。使用时只需加入模板、引物,并补足水至Mix终浓度为1×即可。本制品含红色示踪染料,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。
产品特点:
1.快的扩增速度:延伸速度可以达到5~10/kb,短半小时完成PCR。
2.突出的长片段扩增能力:可以扩增高达10kb的长片段(包括人类基因组此类的复杂模板)。
3.良好保真性:保真度是taq的3~6倍以上。
4.大扩增能力:产量高,对于一些有特殊结构的复杂模板和GC含量高模板有良好效果。
注意事项:
1.本系统扩增速度快,短片段或者简单模板如质粒模板可以尝试5/kb延伸速度并采用较少循环数以进一步缩短PCR时间。长片段(≥3kb)或者复杂模板产量较低可以采用15-20/kb延伸速度或者采用较多循环数。
2.本品产量较低时可尝试采用较长的延伸时间(如20/kb)和循环数(如35个)可以提高PCR产物的产量。
3.对于GC含量很高的模板,短片段预变性和变性温度可以提高到98℃和/或适当延长变性时间。长片段为了避免DNA损伤不应该提高变性温度,应该适当延长预变性时间到5分钟,变性时间可以适当提高5-10。
4.如果扩增模板GC含量高或者模板复杂扩增效果不佳时,可在反应混合物中加入DMSO到终浓度1%-8%,按照1%梯度增加摸索佳浓度。或者加入甜菜碱至终浓度1~1.7M。并采用降落PCR(Touchdown PCR)
储存条件:-20℃,有效期2年。
注意事项:
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后,轻摇时*与细胞充分接触,然后倒掉大部分*,利用剩余的少量*再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。
实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2.在适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(*—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
D-木糖 超纯, ≥99%钛酸钡 99.99% metals basis
β-烟酰腺嘌呤二核苷酸磷酸 95%碳化 1-200目,98%
叔丁氧羰基肼 98%碳化 1-10 μm,98%
乙肟 99%碳化 99%,50nm
烯 AR,99.0% (剧品)纳米钛酸钡 99.9% metals basis,<100 nm
丁酮肟 99%碲化铋(III) 99.99% metals basis
乙酰乙酸叔丁酯 95%硫化铋(III) 99%
化亚铜 AR,99.5%氧化钙 99.99% metals basis
基氯硅烷 >98.0%(GC)硫化镉 CP,95%
邻甲酚 AR,98%硫化镉 AR,98%
间甲酚 CP硫化镉 99.999%
邻苯二酚 AR,99.0%氯化铈,无水 99.9% (REO)
邻苯二酚 CP,98.0%铜粒 99.99% metals basis,粒径<5mm
邻苯二酚 standard for GC, ≥99.5% (GC)铜粉 99.8% metals basis,20μm
2,6-二酚 99%硝酸铯 99.99%
2,6-二酚 分析标准品硝酸铯 AR,99.0%
长片段DNA超速PCR MasterMix1-Methyleffusol
144106⁻⁷8-5
中文名: 1-甲基灯心草菲酚
别 名: 1,8-Dimethyl-4-vinyl-9,10- dihydrophenanthrene-2,7-diol
分子式:C18H18O2
性状:Oil
纯度:97.0%
Jasnervoside C
1622337-36-3
中文名:
别 名:
分子式:C45H60O21
性状:Yellowish powder
纯度:96.5%

热门标签:长片段DNA超速PCR,MasterMix

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