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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

第10年

当前位置: 阿仪网 > 上海谷研实业有限公司 > 产品展示 > 分子试剂 > 核酸扩增 > 全血Taq DNA聚合酶

全血Taq DNA聚合酶

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/11/5 9:25:40

产品摘要:全血Taq DNA聚合酶正在出售的产品:γ-谷氨酰转肽酶6抗体Anti-Phospho-MEK1/2 (Ser217/221)/FITC 荧光素标记磷酸化丝裂原活化蛋白酶酶1/2抗体IgG
G氨基丁酸受体δ/GABAA Rδ抗体Anti-Phospho-M

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产品完善度: 访问次数:590

试剂盒

ATCC细胞

标准品

RNA/DNA提取

生化试剂

菌种

培养基

elisa试剂盒

PCR检测试剂盒

生化检测试剂盒

原代细胞

质粒

荧光PCR试剂盒

细胞生物学试剂

分子试剂

细胞系

细胞培养基

抗体

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详细内容

实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2.在适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(*—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
产品属性:
中文名称:全血Taq DNA聚合酶
英文名称:BloodTaq DNA Polymerase
产品规格:2500U
产品货号:GOY-F10308
本品是通过缺失Taq DNA Polymerase N端一段氨基酸和突变改造得到的新型DNA聚合酶。通过改造后使本产品能够全血中存在的抑制剂产生耐受作用,能够直接扩增人和小鼠全血样品中的DNA而无需事先对基因组进行提取和纯化。PCR产物3’端为A,可直接用于T/A克隆。
注意:
a.PCR仪于94-95℃预热,将样品放置于PCR仪上开始循环。
b.BloodTaq提高了冷敏感性,具备了一些热启动特性。通常可以通过在冰上配制反应成分、后加入聚合酶以及将热循环仪预热至变性温度(95℃)后立即进行反应来避免非特异性产物的产生。
c.变性温度与时间:在PCR循环为了充分裂解血液细胞和释放/变性DNA,要求初始变性为95℃ 5分钟。
d.退火温度与时间:退火时间通常为30-1分钟。退火温度可以低于理论退火温度(Tm)5℃开始,通过梯度PCR进行优化。
e.延伸时间:延伸反应通常在72℃下进行。一般每250-500 bp延伸时间为1分钟。推荐72℃ 10分钟进行终延伸。
f.通常35-40个循环可以达到优扩增。
5、结果检测:反应结束后取5μl反应产物并加上电泳缓冲液一起电泳检测结果。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
注意事项:
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后,轻摇时*与细胞充分接触,然后倒掉大部分*,利用剩余的少量*再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。
二氧化双环戊二烯(内型和外型异构体混合物) 97%3(2H)-哒酮 98%
正戊 GCS, ≥99.5% (GC) R-1-苄氧羰基-羟基吡咯 95%
正戊 高纯,>99.5%(GC)四氟酸银 99%
正戊 GR,99%1-Cbz-4-酮 98%
正戊 AR,98%二甲基硅油DC-200 粘度~10 mPa.s, neat(25 °C)
正戊 ACS二甲基硅油DC-200 粘度~50 mPa.s, neat(25 °C)
正戊 分析标准品,≥99.8% (GC) 二甲基硅油DC-200 粘度~30000 mPa.s, neat(25 °C)
2-乙酰基吡 99%1-BOC-氮杂环丁烷-3-羧酸 98%
2-乙酰基吡 ≥99%,FG,FCC1-Boc-3-羟基吖丁啶 97%
乙酸对甲氧基苄酯 98%3-氨基-4,4,4-三氟酸乙酯 97%
乙酸对甲氧基苄酯 97%,FCC三氟酮酸甲酯 97%
3-乙酰氧基-2-丁酮 98%1,1,1-三氟-2-丁酮 96%
4-乙酰氧基-2, 5-二甲基 -3-呋喃酮 98%Cbz-L-苏氨酸苄酯 98%
黑胡椒油 食品叔丁氧羰酰基正亮氨酸二环己盐 ≥98.5%
布枯油 natural, FG2-溴苄基-N-琥珀酰亚基碳酸酯 99%
桂油 FCC1,2-二(4-吡啶基)乙烯 98%
全血Taq DNA聚合酶Epimedonin K
2222285-85-8
中文名:
别 名:
分子式:C30H34O6
性状:Powder
纯度:96.0%
Epimedonin G
2222285-80-3
中文名:
别 名:
分子式:C20H18O6
性状:Powder
纯度:97.0%

热门标签:全血Taq,DNA聚合酶

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