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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

第10年

当前位置: 阿仪网 > 上海谷研实业有限公司 > 产品展示 > 分子试剂 > 探针标记及检测 > 细胞内钙离子荧光探针(Fura-2 AM)

细胞内钙离子荧光探针(Fura-2 AM)

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/11/5 9:41:24

产品摘要:细胞内钙离子荧光探针(Fura-2 AM)正在出售的产品:髓鞘蛋白P0样蛋白2抗体Anti-GFR Alpha-1/GDNF /FITC 荧光素标记GDNF家族受体α-1抗体IgG
雌受体α抗体Anti-GFRA4/FITC 荧光素标记GDNF家族受体α

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旗舰版网址:http://www.elisaguyan.com

详细内容

实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2.在适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(*—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
产品属性:
中文名称:细胞内钙离子荧光探针(Fura-2 AM)
英文名称:Fura-2 pentakis ester
产品规格:50微升
产品货号:GOY-F10143
本品是常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一。 用于细胞内钙离子检测时,Fura-2 AM的常用浓度为0.5-5μM。通常用含有0.5-5μM的Fura-2 AM的适当溶液和细胞一起在4-37℃孵育15-60分钟,即可完成荧光探针的装载。 本Fura-2 AM(钙离子荧光探针)是配制于无水DMSO(anhydrous DMSO)中的储存液,浓度为2mM。
分子式:C44H47N3O24
分子量:1001.9
Fura-2 AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fura-2 AM的荧光比较弱,大激发波长为369nm,大发射波长为
478nm,并且其荧光不会随钙离子浓度改变而改变。Fura-2 AM进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成Fura-2,从而被滞留在细胞内。Fura-2可以和钙离子结合,结合钙离子后在330-350nm激发光下可以产生较的荧光,而在380nm激发光下则会导致荧光减弱。这样就可以使用340nm和380nm这两个荧光的比值来检测细胞内的钙离子浓度,可以消除不同细胞样品间荧光探针装载效率的差异,荧光探针的渗漏,细胞厚度差异等一些误差因素。Fura-2和钙离子结合后,大激发波长为335nm(大激发波长随离子浓度的的不同而有所不同),大发射波长为505nm。实际检测时推荐使用的激发波长为340nm,发射波长为510nm。如果做双波长检测,则推荐使用的激发波长为340nm和380nm。Fura-2的激发光谱参考下图,不同曲线表示不同钙离子浓度时的激发光谱。
Fura-2相对而言有较的抗荧光淬灭能力,在荧光显微镜或其它荧光检测设备上可以连续检测1小时而不明显影响其荧光效果。
注意事项:
1. 本Fura-2 AM在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
储存条件:-20℃,有效期6个月。
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
注意事项:
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后,轻摇时*与细胞充分接触,然后倒掉大部分*,利用剩余的少量*再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。
氧化铜 40nm 球形,99.5%3,4-苯并芘标准溶液 5.25μg/mL,基体:甲4-丁基-4'-羟基查耳酮(>98.0%(HPLC))
纳米三氧化二铁(α- Fe2O 30nm 球形,99.5%,α型正丁 for HPLC,≥99.7% (GC) 1,4-二乙炔基苯(>98.0%(GC))
纳米磁性氧化铁(γ-Fe2O3 20nm 球形,99.5%,γ型酸 SP4-乙炔基苯(>98.0%(HPLC))
氧化钆 9.8% metals basis,<100 nm (XRD) 异硫酸丁酯 99%1-乙炔基-4-己基苯(>95.0%(GC))
纳米氧化钬 99.9% metals basis,<100 nm particle size (BET)二 98%(剧品)4-(4-氟苯基乙炔基)苯酚(>98.0%(GC))
纳米四氧化三铁 99.5%,20nm 球形溴代硝烷 90%2-羟基查耳酮(>98.0%(GC)(T))
纳米四氧化三铁分散液 10-30 nm, 25% in H2O1,4-双(5-苯基-2-恶唑基)苯 98%2'-羟基查耳酮(>98.0%(HPLC))
氧化镧 99.99% metals basis,50nm4-丁基苯甲酸 99%6-羟基-2-萘甲(>98.0%(GC)(T))
氧化镁 99.99% metals basis1,2-双(氯二甲基硅烷基)乙烷 96%反-4-羟基环己烷羧酸(>95.0%(GC)(T))
纳米氧化镁 50nm,球形,99.9% metals basis异酸苯磺酰酯 95%2-[(4-甲氧基苯亚甲基)氨基]芴(>98.0%(T))
氧化镁 99%,50nm2-(2-溴乙基)-1,3-二恶烷 98%4-(三氟甲氧基)苯酸(含有数量不等的酸酐)
镁 99.5%,50nm,灰色苄氧基乙酰氯 95%4-溴氟苯(>98.0%(GC))
D-泛 98%4-苄基-4-羟基 97%2-氨基-5-硝基吡啶(>98.0%(T))
二氧化硅 轻质AR,99.5%2-溴苯 99%2-氨基-3-硝基吡啶(>97.0%(T))
纳米二氧化硅 99.5%,50±5nm3-溴-2- 98%4-氨基-4'-硝基联苯(>96.0%(T))
二氧化硅 99.5%,30±5nm4-溴间苯二甲酸 96%2-氯-4-硝基-N-(>98.0%(GC))
细胞内钙离子荧光探针(Fura-2 AM)Stigmastane-3β,5α,6β-triol
20835-91-0
中文名: 豆甾-3β,5α,6β-三醇
别 名:
分子式:C29H52O3
性状:Powder
纯度:96.5%
7α-Hydroxysitosterol
34427-61⁻⁷
中文名: 7α-羟基谷甾醇
别 名: Ikshusterol; Stigmast-5-ene-3β,7α-diol
分子式:C29H50O2
性状:Powder
纯度:95.0%

热门标签:细胞内钙离子荧光探针(Fura-2,AM)

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