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Granta-519-GFP-Puro稳转株
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详细内容
Granta-519-GFP-Puro稳转株
英文名称 | Granta-519-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1111 |
中文名称 | GFP 标记的 Granta-519 稳转株 |
Lot number | Granta-519-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T12.5细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | B细胞淋巴瘤 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

细胞背景
Granta-519 细胞是 1991 年从一位 70 岁的白人男性患者身上分离得到的。该患者最初被诊断为慢性淋巴细胞白血病(CLL),大约 2 年后转变为 B 细胞侵袭性急性淋巴细胞白血病,之后又被重新归类为套细胞淋巴瘤(MCL)。Granta-519 细胞属于人 B 细胞淋巴瘤细胞,常被用于淋巴瘤相关的研究,如疾病机制探讨、药物研发等。
构建过程
通常使用慢病毒载体进行构建。将包含绿色荧光蛋白(GFP)基因和嘌呤霉素抗性(Puro)基因的慢病毒载体转染到 Granta-519 细胞中。
慢病毒进入细胞后,其基因组会整合到 Granta-519 细胞的染色体上。
通过在培养基中添加嘌呤霉素进行筛选,只有成功整合了慢病毒载体并表达嘌呤霉素抗性基因的细胞才能存活,从而获得稳定表达 GFP 的 Granta-519-GFP-Puro 稳转株。
应用领域
细胞示踪与定位研究:利用 GFP 的荧光特性,可以方便地在显微镜下观察 Granta-519 细胞在体外培养条件下的生长、迁移、分化等行为,也可用于在动物模型中追踪细胞的分布和命运。例如,将稳转株注射到动物体内,通过检测 GFP 荧光来确定肿瘤细胞的转移情况。
药物研发与筛选:可以用于高通量药物筛选,通过观察药物处理后 GFP 的表达变化或细胞的荧光强度变化,来评估药物对 Granta-519 细胞生长、增殖、凋亡等的影响,快速筛选出具有潜在抗肿瘤活性的化合物。同时,也可用于研究药物的作用机制,如观察药物处理后细胞内 GFP 标记的特定蛋白的定位变化等。
信号通路与基因功能研究:通过将特定的基因与 GFP 融合表达,或者利用 RNA 干扰技术结合 GFP 报告基因,研究相关基因在 Granta-519 细胞中的功能以及信号通路的调控机制。例如,观察干扰某个基因表达后,细胞的 GFP 荧光变化以及相关表型的改变,来推断该基因在细胞中的作用。
培养与维护
培养条件:一般使用含有 10% 胎牛血清(FBS)的 RPMI 1640 培养基,在 37℃、5%CO2 的培养箱中培养。
传代与筛选:当细胞密度达到 80%-90% 汇合度时,进行传代培养。在传代过程中,需要持续使用含有嘌呤霉素的培养基进行筛选,以维持细胞对嘌呤霉素的抗性和 GFP 的稳定表达。
细胞冻存:为了长期保存细胞株,需要将细胞冻存。冻存液通常由 90% FBS 和 10% DMSO 组成,将细胞悬液分装到冻存管中,按照程序降温后,置于 - 80℃冰箱或液氮中保存。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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