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HEC-1-A-Puro+ffluc稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/16 11:04:28
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详细内容
HEC-1-A-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | HEC-1-A-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2429 |
中文名称 | ffluc 标记的 HEC-1-A 稳转株 |
Lot number | HEC-1-A-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | McCOY's5A + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
1. 基础信息
细胞株背景
HEC-1-A 细胞：
来源于人子宫内膜癌细胞，属于子宫内膜样腺癌亚型，通常用于子宫内膜癌的基础研究（如肿瘤增殖、侵袭机制、药物敏感性等）。
特点：贴壁生长，具有典型的上皮细胞形态，可在体外稳定传代。
稳转株构建：
通过基因工程技术将 Puromycin 抗性基因（Puro） 和 萤火虫荧光素酶基因（ffluc） 稳定整合到 HEC-1-A 细胞的基因组中，形成双标记稳转株。
Puromycin 抗性：用于稳转株的筛选和维持（通过 Puromycin 药物压力筛选阳性克隆）。
ffluc 荧光素酶：用于活体成像、细胞示踪、基因表达监测等，需配合荧光素底物（如 D - 荧光素）使用。
2. 主要应用场景
（1）肿瘤学研究
活体成像：
通过 ffluc 荧光素酶标记，可在小鼠等动物模型中实时监测肿瘤生长、转移及药物治疗效果（如肿瘤体积变化、转移灶定位）。
示例：将稳转株注射到小鼠体内，腹腔注射荧光素后，利用生物发光成像系统（BLI）观察肿瘤发光强度，量化肿瘤负荷。
药物筛选：
通过 Puromycin 抗性筛选稳定表达目的基因的细胞，结合 ffluc 信号强度评估药物对细胞增殖或基因表达的影响。
（2）分子生物学研究
基因表达调控：
利用 ffluc 作为报告基因，研究启动子活性、信号通路调控等（如将目的基因与 ffluc 融合，通过荧光强度变化反映基因表达水平）。
细胞示踪与迁移研究：
在体外或体内追踪细胞迁移路径（如 Transwell 实验、伤口愈合实验中检测 ffluc 信号）。
3. 培养与维护要点
（1）培养基与试剂
基础培养基：常用 DMEM 或 MEM 培养基，添加 10% 胎牛血清（FBS）、1% 双抗（青霉素 / 链霉素）。
筛选与维持：
筛选阶段：加入 Puromycin（浓度需预实验优化，通常为 1-5 µg/mL），培养 2-3 周直至单克隆形成。
维持培养：定期（每 2-3 代）添加低浓度 Puromycin（如 0.5 µg/mL）防止抗性基因丢失。
（2）培养条件
温度与气体：37℃，5% CO2 ，饱和湿度。
传代密度：当细胞融合度达 80%-90% 时传代，消化液常用 0.25% 胰酶 - EDTA。
注意事项：避免过度消化或密度过低导致细胞状态下降，定期检测 ffluc 活性（如通过荧光素酶检测试剂盒）。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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