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Jeko-1-GFP-Puro稳转株
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详细内容
Jeko-1-GFP-Puro稳转株
英文名称 | Jeko-1-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1113 |
中文名称 | GFP 标记的 Jeko-1 稳转株 |
Lot number | Jeko-1-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640+10%FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

细胞背景
Jeko - 1 细胞是人套细胞淋巴瘤细胞系,来源于人 B 细胞淋巴瘤。它具有典型的套细胞淋巴瘤细胞的生物学特性,常被用于套细胞淋巴瘤的发病机制、治疗靶点探索以及药物研发等方面的研究。
构建过程
一般是将携带绿色荧光蛋白(GFP)基因和嘌呤霉素抗性(Puro)基因的慢病毒载体转染到 Jeko - 1 细胞中。慢病毒载体能够将其基因组整合到 Jeko - 1 细胞的染色体上,使细胞获得新的遗传特性。
通过在细胞培养基中添加嘌呤霉素进行筛选。只有成功整合了慢病毒载体并表达嘌呤霉素抗性基因的 Jeko - 1 细胞才能在含有嘌呤霉素的环境中存活,从而得到稳定表达 GFP 的 Jeko - 1 - GFP - Puro 稳转株。
应用领域
细胞示踪与定位:利用 GFP 的荧光特性,可以在体外培养条件下方便地观察 Jeko - 1 细胞的生长、分裂、迁移等行为。在动物模型中,也可通过检测 GFP 荧光来追踪 Jeko - 1 细胞在体内的分布、转移以及与宿主组织的相互作用等,例如研究套细胞淋巴瘤细胞在小鼠体内的肿瘤形成过程和转移规律。
药物研发与筛选:可用于高通量药物筛选实验。通过观察药物处理后 Jeko - 1 - GFP - Puro 细胞的荧光强度变化、细胞形态改变以及细胞生长抑制情况等,来评估药物对 Jeko - 1 细胞的作用效果,快速筛选出对套细胞淋巴瘤具有潜在治疗作用的药物。同时,还可以研究药物的作用机制,比如观察药物处理后 GFP 标记的特定蛋白在细胞内的定位变化,以揭示药物对细胞信号通路和生物学功能的影响。
基因功能与信号通路研究:将特定的基因与 GFP 融合表达,或者利用 RNA 干扰技术结合 GFP 报告基因,在 Jeko - 1 - GFP - Puro 稳转株中研究相关基因的功能以及信号通路的调控机制。例如,通过干扰某个基因的表达,观察细胞的 GFP 荧光变化以及相关表型的改变,进而推断该基因在 Jeko - 1 细胞中的作用和参与的信号通路。
培养与维护
培养条件:通常使用含有 10% 胎牛血清(FBS)的 RPMI 1640 培养基,在 37℃、5%CO2 的培养箱中培养。
传代与筛选:当细胞密度达到 70% - 80% 汇合度时,进行传代培养。在传代过程中,需要持续使用含有嘌呤霉素的培养基进行筛选,以维持细胞对嘌呤霉素的抗性和 GFP 的稳定表达,确保稳转株的特性不丢失。
细胞冻存:为了长期保存细胞株,需要将细胞冻存。冻存液通常由 90% FBS 和 10% DMSO 组成,将细胞悬液分装到冻存管中,按照程序降温后,置于 - 80℃冰箱或液氮中保存。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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