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KARPASS-299-RFP-Puro稳转株
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详细内容
KARPASS-299-RFP-Puro稳转株
英文名称 | KARPASS-299-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1116 |
中文名称 | RFP 标记的 KARPASS-299 稳转株 |
Lot number | KARPASS-299-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640+10%FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

细胞背景
KARPASS - 299 细胞是从患有 T 细胞非霍奇金淋巴瘤的患者外周血中建立的人 T 细胞淋巴瘤细胞系,常被用于淋巴瘤相关研究。
构建过程
通常利用慢病毒载体系统进行构建。将携带 RFP 基因和 Puro 基因的慢病毒载体转染到 KARPASS - 299 细胞中,慢病毒载体基因组会整合到细胞染色体上。随后用嘌呤霉素筛选,只有成功整合载体并表达 Puro 基因的细胞才能在含嘌呤霉素的培养基中存活,经筛选和培养得到稳定表达 RFP 的 KARPASS - 299 - RFP - Puro 稳转株。
应用领域
细胞示踪与成像:在体外,可用荧光显微镜观察细胞的生长、分裂等行为。将其接种到动物模型后,能通过检测 RFP 荧光追踪细胞在体内的分布、转移及与宿主组织的相互作用,例如研究淋巴瘤细胞在小鼠体内的肿瘤形成和转移过程。
药物研发与筛选:可用于高通量药物筛选,通过观察药物处理后细胞的荧光强度变化、形态改变及生长抑制情况等,评估药物对 KARPASS - 299 细胞的作用效果,筛选潜在治疗药物。还可通过观察 RFP 标记蛋白的定位变化,研究药物作用机制。
基因功能与信号通路研究:可将特定基因与 RFP 融合表达,或利用 RNA 干扰技术结合 RFP 报告基因,在该稳转株中研究基因功能和信号通路调控机制。如干扰某个基因表达,观察细胞 RFP 荧光和相关表型变化,推断基因在细胞中的作用和参与的信号通路。
培养与维护
培养条件:一般使用含 20% 胎牛血清(FBS)的 RPMI 1640 培养基,添加 2mM 谷氨酰胺,在 37℃、5%CO2 培养箱中培养。也可根据需要使用含 10% 或 5% FBS 的培养基以调整细胞生长速度。
传代与筛选:细胞密度达到一定程度(通常维持细胞浓度在 0.5 - 2×106 cells/ml)时进行传代,一般每 2 - 3 天按 1:3 的比例对饱和培养物传代。传代过程中持续使用含嘌呤霉素的培养基筛选,维持细胞抗性和 RFP 稳定表达。
细胞冻存:为长期保存,将细胞用冻存液(通常由 90% FBS 和 10% DMSO 组成)分装到冻存管,程序降温后置于 - 80℃冰箱或液氮中。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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