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详细内容
Jurkat(E6)-GFP单克隆株
英文名称 | Jurkat(E6)-GFP monoclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1120 |
中文名称 | GFP 标记的 Jurkat(E6) 单克隆株 |
Lot number | Jurkat(E6)-18A4S |
细胞规格 | 复苏细胞(T12.5细胞瓶)或1 × 106 细胞冻存细胞。 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)采用无限稀释法筛选单克隆株; (5)单克隆株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

细胞背景
Jurkat (E6) 细胞特性:Jurkat 细胞是源自人急性 T 淋巴细胞白血病的永生细胞系,为悬浮细胞,具有 T 细胞特性。Jurkat (E6) 是其亚系,于 1970 年代中期由 Schneider 建立,来源于一名 14 岁白血病男孩的外周血,是 Jurkat-FHCRC 细胞株的一个克隆,经诱导后可产生大量 IL-2。
构建过程
通常是将携带 GFP 基因的慢病毒载体或逆转录病毒载体,通过病毒介导的基因转移方法导入 Jurkat (E6) 细胞。利用载体上的筛选标记,如嘌呤霉素抗性基因,在含有嘌呤霉素的培养基中进行筛选,只有成功整合了载体并表达 GFP 的细胞才能存活。再通过有限稀释法或流式细胞分选等技术进行单克隆化培养,获得 Jurkat (E6)-GFP 单克隆株。
应用领域
细胞生物学研究:借助 GFP 的荧光特性,可在荧光显微镜下实时观察 Jurkat (E6) 细胞的增殖、凋亡、迁移等过程,也可用于研究细胞内蛋白质的定位与转运等。例如,通过观察 GFP 标记的细胞在不同培养条件下的形态变化,来研究细胞的生长和分化机制。
免疫学研究:可用于研究 T 细胞相关的免疫反应机制,如 T 细胞受体信号传导、细胞因子分泌等。比如,通过观察 GFP 标记的 Jurkat (E6) 细胞在与抗原呈递细胞共培养时的行为变化,来了解 T 细胞的激活过程。
药物研发与筛选:可用于高通量筛选针对 T 细胞白血病的药物或小分子抑制剂。通过检测 GFP 荧光强度变化或结合细胞存活率检测方法,评估药物对 Jurkat (E6) 细胞的抑制效果和毒性作用。
培养与维护
培养基选择:通常使用含 10% 胎牛血清(FBS)的 RPMI 1640 培养基,并添加 1% 双抗(青霉素 / 链霉素)防止细菌污染。为维持细胞对筛选标记的抗性,可能需添加适量相应的筛选药物,如嘌呤霉素,一般浓度在 0.5 - 2 µg/mL,具体浓度需通过预实验优化。
培养条件:培养条件为 37℃、5%CO2 和饱和湿度的培养箱。
传代与密度:作为悬浮细胞,传代时细胞密度建议维持在 0.3 - 1×106 cells/mL,传代比例可按 1:3 - 1:5 进行稀释,每 2 - 3 天更换一次培养基。
冻存与复苏:冻存细胞时,使用含有 90% FBS 和 10% DMSO(或专用细胞冻存液)的冻存液,将细胞密度调整为 1 - 5×106 cells/mL。复苏细胞时,应快速将冻存管在 37℃水浴中解冻,离心去除冻存液后,加入含有筛选药物的新鲜培养基进行培养。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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