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A549-GFP-Puro单克隆株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:49
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详细内容
A549-GFP-Puro单克隆株
产品名称 | A549-GFP-Puro 单克隆细胞株 |
产品货号 | XY-H1127 |
中文名称 | GFP 标记的A549单克隆细胞株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转细胞株； （4）采用无限稀释法筛选单克隆细胞株； （5）单克隆细胞株质检（COA）。 |
完全培养基 | F-12K + 10 % FBS + 1 % P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
共享方式 | 公益性共享 |
A549-GFP-Puro 单克隆株概述
A549 细胞是源自人类肺癌（腺癌）的经典细胞系，常用于肿瘤生物学、药物筛选和基因表达研究。GFP（绿色荧光蛋白是一种常用的报告基因，其表达产物可在荧光显微镜下直观观察，用于追踪细胞、监测基因表达或蛋白定位。Puro（嘌呤霉素）是一种抗生素，常用于真核细胞的筛选，携带Puro 抗性基因的细胞可在含嘌呤霉素的培养基中存活。
A549-GFP-Puro 单克隆株是通过基因工程技术构建的稳定细胞株，具有以下特点：
GFP 稳定表达：细胞内整合了 GFP 基因，可持续表达绿色荧光蛋白，便于通过荧光成像技术进行实时追踪或分选。
嘌呤霉素抗性：细胞携带 Puro 抗性基因，可通过嘌呤霉素筛选维持单克隆的稳定性，避免非目标细胞的过度生长。
单克隆特性：由单个细胞克隆扩增而来，遗传背景均一，避免了多克隆细胞群体的异质性，实验结果重复性更高。
构建流程（典型步骤）
载体构建：
将 GFP 基因和 Puro 抗性基因插入到合适的质粒载体（如慢病毒载体、逆转录病毒载体）中，形成重组表达载体。
细胞转染 / 感染：
通过脂质体转染、电穿孔或病毒感染（如慢病毒）将重组载体导入 A549 细胞。
抗性筛选：
在培养基中添加嘌呤霉素，未成功整合抗性基因的细胞死亡，存活细胞为成功转染的单克隆候选群体。
单克隆化：
通过有限稀释法、流式细胞分选（FACS）或单细胞挑取技术，分离单个细胞并扩增，获得遗传均一的单克隆株。
鉴定与验证：
荧光显微镜观察 GFP 表达效率，通过 Western blot 或流式细胞术检测 GFP 蛋白水平；验证细胞在嘌呤霉素中的存活能力。
应用场景
细胞成像与追踪：
利用 GFP 荧光标记，在活细胞成像中观察细胞迁移、增殖或药物处理后的动态变化。
基因表达研究：
作为报告基因，监测目的基因的表达模式（如启动子活性、蛋白定位）。
药物筛选与毒性分析：
通过荧光强度变化评估药物对细胞功能的影响（如凋亡、代谢变化），或用于高通量筛选平台。
肿瘤模型构建：
接种至免疫缺陷小鼠（如裸鼠），建立荧光标记的移植瘤模型，用于体内肿瘤生长和转移的实时监测。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
热门标签：A549-GFP-Puro单克隆株,GFP,标记的A549单克隆细胞株,A549单克隆细胞株
