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THP-1-GFP-Puro单克隆株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:08:30
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详细内容
THP-1-GFP-Puro单克隆株
产品名称 | THP-1-GFP-Puro单克隆细胞株 |
产品货号 | XY-H1125 |
中文名称 | GFP 标记的 THP-1 单克隆细胞株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转细胞株； （4）采用无限稀释法筛选单克隆细胞株； （5）单克隆细胞株质检（COA）。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 0.05mM β-巯基乙醇 |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
共享方式 | 公益性共享 |
1. 背景与来源
亲本细胞株 THP-1：
THP-1 是一种人急性单核细胞白血病细胞株，源自一名 1 岁男性急性单核细胞白血病患者的外周血。该细胞具有单核细胞的特性，可通过诱导剂（如佛波酯，PMA）分化为类似巨噬细胞的表型，常用于免疫、炎症和癌症研究。
基因改造：
THP-1-GFP-Puro 单克隆株通过基因工程技术引入了两种关键元件：
GFP（绿色荧光蛋白）：作为报告基因，使细胞在荧光显微镜下发出绿色荧光，便于实时观察细胞形态、迁移、增殖或与其他分子的相互作用。
Puro（嘌呤霉素抗性基因）：用于筛选成功转染的细胞。嘌呤霉素是一种抗生素，可抑制原核和真核细胞的蛋白质合成，仅携带 Puro 抗性基因的细胞能在含嘌呤霉素的培养基中存活。
单克隆株特性：
单克隆株意味着该细胞群体源自单个细胞克隆，具有高度均一的遗传背景和荧光表达水平，避免了多克隆细胞株中可能存在的表达异质性。
2. 主要应用场景
（1）细胞成像与追踪
荧光显微镜观察：利用 GFP 的荧光特性，可直接在荧光显微镜下观察细胞的动态行为（如迁移、吞噬作用）或亚细胞结构（需与定位信号融合）。
活体成像研究：若用于动物模型（如免疫缺陷小鼠），GFP 信号可通过活体成像技术追踪肿瘤细胞的转移或免疫细胞的分布。
（2）基因表达与调控研究
启动子活性分析：将 GFP 编码序列与目标基因的启动子连接，通过荧光强度反映启动子的活性，研究基因转录调控机制。
蛋白定位与互作研究：构建 GFP 融合蛋白载体，观察目标蛋白在细胞内的定位（如细胞质、细胞核或细胞膜），或通过荧光共振能量转移（FRET）等技术研究蛋白 - 蛋白相互作用。
（3）细胞分选与筛选
流式细胞术（FACS）：利用 GFP 的荧光强度差异，通过流式细胞仪分选高表达 GFP 的细胞亚群，或用于纯化转基因细胞。
药物筛选：结合 Puro 抗性筛选，可在药物处理后富集存活的阳性细胞，用于研究药物对特定基因表达细胞的影响。
（4）肿瘤与免疫研究
肿瘤细胞模型：THP-1-GFP-Puro 可作为肿瘤细胞株，用于研究肿瘤细胞的增殖、凋亡或与免疫细胞的相互作用（如巨噬细胞极化）。
炎症模型：分化后的 THP-1 细胞（类似巨噬细胞）可用于模拟炎症微环境，通过 GFP 标记追踪炎症细胞的响应。
3. 培养与维护要点
培养基：通常使用 RPMI 1640 培养基，添加 10% 胎牛血清（FBS）、1% 青霉素 - 链霉素，以及适量嘌呤霉素（根据细胞抗性调整浓度，通常为 1-2 µg/mL）以维持筛选压力。
培养条件：37℃、5%CO2 的湿润培养箱，悬浮培养（THP-1 为悬浮细胞），定期传代以避免细胞密度过高（建议密度：1×105-1×106 cells/mL）。
荧光稳定性：长期培养时需注意 GFP 表达的稳定性，避免因传代次数过多导致基因丢失，可定期通过荧光显微镜或流式细胞术检测荧光强度。
分化诱导：如需诱导为巨噬细胞样细胞，可加入 PMA（如 50 ng/mL）处理 24 小时，诱导后细胞会贴壁并改变形态。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
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热门标签：THP-1-GFP-Puro单克隆株,GFP,标记的,THP-1,单克隆细胞株,单克隆细胞株
