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A549-eGFP稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:49
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详细内容
A549-eGFP稳转株
英文名称 | A549-eGFP polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1129 |
中文名称 | eGFP 标记的 A549 稳转株 |
Lot number | A549-51J7P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | F-12K + 10％ FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
A549-eGFP 稳转株概述
A549 细胞是来源于人类肺癌的永生化细胞系，属于非小细胞肺癌（NSCLC）的经典模型，因其易于培养和转染的特性，被广泛应用于癌症研究、药物筛选和基因功能分析等领域。
eGFP（增强型绿色荧光蛋白）*是一种常用的报告基因，其表达产物在蓝光或紫外光激发下会发出绿色荧光，便于通过荧光显微镜或流式细胞术等手段实时追踪细胞状态、定位目标蛋白或监测基因表达。
A549-eGFP 稳转株是通过基因工程技术将 eGFP 基因稳定整合到 A549 细胞基因组中，使细胞能够持续表达 eGFP 的细胞株。这类稳转株常用于需要长期观察荧光信号的实验，避免了瞬时转染效率低、荧光表达时间短的缺点。
构建方法
载体构建
设计包含 eGFP 基因的表达载体（如质粒），通常带有筛选标记（如嘌呤霉素、潮霉素抗性基因），以便后续筛选稳定转染的细胞。
载体中可能包含启动子（如 CMV 启动子）以驱动 eGFP 的持续表达。
细胞转染
使用脂质体转染、电穿孔或病毒介导（如慢病毒、逆转录病毒）等方法将载体导入 A549 细胞。
病毒介导的转染效率更高，尤其适用于难转染的细胞类型。
筛选与鉴定
转染后通过抗生素筛选（如添加嘌呤霉素）去除未成功整合载体的细胞，仅保留稳定表达抗性基因的细胞克隆。
通过荧光显微镜观察绿色荧光表达，或利用流式细胞术（FACS）分选高荧光强度的单克隆细胞，确保 eGFP 表达的均一性和稳定性。
应用场景
细胞追踪与成像
在肿瘤转移研究中，通过荧光信号追踪 A549 细胞在体内（如小鼠模型）的迁移和定植过程。
观察细胞形态变化、细胞周期或细胞凋亡等动态过程。
基因表达分析
将 eGFP 与目标基因的启动子连接，通过荧光强度反映目标基因的转录活性（如研究药物对特定基因表达的调控）。
药物筛选与毒性评估
在高通量筛选中，通过荧光强度变化快速评估药物对细胞增殖、存活的影响（如荧光强度降低可能提示细胞毒性）。
蛋白定位研究
构建 eGFP 与目标蛋白的融合表达载体，利用荧光共定位技术分析目标蛋白在细胞内的分布（如细胞质、细胞核或细胞器）。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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