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HuH7-RFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:49
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详细内容
HuH7-RFP-Puro稳转株
英文名称 | HuH7-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1151 |
中文名称 | RFP 标记的 HuH7 稳转株 |
Lot number | HuH7-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
HuH7-RFP-Puro 稳转株概述
HuH7 细胞是一种人肝癌细胞系，源自人类肝细胞癌组织，常用于肝癌研究、病毒感染机制、药物筛选等领域。
RFP（Red Fluorescent Protein，红色荧光蛋白）是一种报告基因，通过基因工程技术转入细胞后，可使细胞表达红色荧光蛋白，便于通过荧光显微镜或流式细胞术等手段进行实时观察、追踪或分选。
Puro（Puromycin，嘌呤霉素）是一种抗生素，常用于构建稳转株时的筛选标记。含有 Puro 抗性基因的细胞在嘌呤霉素存在的培养环境中可存活，而未成功转入目的基因的细胞会被淘汰，从而获得稳定表达目标基因的细胞株。
HuH7-RFP-Puro 稳转株的构建流程
载体构建
构建包含 RFP 基因和 Puro 抗性基因的重组质粒（如慢病毒载体、逆转录病毒载体等）。
质粒中通常还需包含启动子（如 CMV 启动子）以驱动基因表达。
细胞转染 / 感染
通过脂质体转染、电穿孔或病毒感染（如慢病毒）等方法，将重组质粒导入 HuH7 细胞。
嘌呤霉素筛选
转染 / 感染后的细胞在含有嘌呤霉素的培养基中培养，未成功整合质粒的细胞死亡，存活细胞即为稳定表达 RFP 和 Puro 抗性的稳转株。
单克隆化与鉴定
通过有限稀释法或流式细胞术筛选单克隆细胞，确保细胞株的遗传稳定性。
利用荧光显微镜观察 RFP 表达情况，通过 Western blot 或测序验证基因整合。
应用场景
细胞追踪与成像
RFP 的荧光特性可用于实时观察细胞在体外培养或体内（如动物模型）的迁移、增殖及分布，例如肝癌转移研究。
药物筛选与毒性评估
稳定表达 RFP 的细胞株可作为模型，通过荧光强度变化评估药物对细胞活性的影响（如细胞凋亡、增殖抑制）。
基因功能研究
结合 RNA 干扰（shRNA）或过表达技术，利用 RFP 标记追踪特定基因敲降或过表达后的细胞表型变化。
细胞分选与富集
通过流式细胞术（FACS）基于 RFP 荧光强度分选细胞，用于制备均一化的细胞群体或单细胞克隆。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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