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HepG2-RFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:49
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详细内容
HepG2-RFP-Puro稳转株
英文名称 | HepG2-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1154 |
中文名称 | RFP 标记的 HepG2 稳转株 |
Lot number | HepG2-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
HepG2-RFP-Puro 稳转株概述
HepG2-RFP-Puro 稳转株是基于人肝癌细胞系 HepG2 构建的稳定表达红色荧光蛋白（Red Fluorescent Protein, RFP）并携带嘌呤霉素（Puro）抗性基因的细胞株。这类稳转株常用于生物学研究，尤其是需要长期追踪细胞、研究基因表达或进行药物筛选的场景。
关键特性
细胞背景
来源：HepG2 细胞源自人肝细胞癌，是研究肝癌、代谢疾病及药物代谢的常用模型。
特性：贴壁生长，具有较高的转染效率，适合进行基因编辑或外源基因稳定表达。
荧光标记
RFP 表达：通过慢病毒感染或质粒转染等方式，将 RFP 基因整合到细胞基因组中，实现稳定表达。
应用优势：RFP 激发波长约 555 nm，发射波长约 584 nm，可通过荧光显微镜、流式细胞术等实时观察细胞定位、增殖或迁移，避免传统瞬转荧光蛋白的表达衰减问题。
抗性筛选标记
嘌呤霉素抗性：稳转株携带 Puro 抗性基因，可通过嘌呤霉素筛选培养基（通常浓度为 1-10 µg/mL）去除未成功整合外源基因的细胞，确保细胞群的均一性和稳定性。
主要应用场景
细胞示踪与成像
用于体内外细胞追踪，如肿瘤移植模型中观察癌细胞转移，或细胞共培养体系中区分不同细胞群体。
示例：将 HepG2-RFP-Puro 细胞注射到裸鼠体内，通过活体荧光成像监测肿瘤生长。
基因功能研究
作为载体用于过表达或敲低目标基因，结合 RFP 荧光信号验证转染效率，通过 Puro 筛选获得稳定克隆。
例如：研究某基因对 HepG2 细胞增殖的影响时，利用稳转株排除瞬转实验中基因表达不稳定的干扰。
药物筛选与毒性分析
基于稳转株构建高通量筛选模型，通过荧光强度变化或细胞存活率评估药物对特定细胞的作用。
如：利用 RFP 信号强度量化药物处理后细胞数量变化，筛选肝癌治疗候选化合物。
细胞生物学基础研究
用于细胞周期、凋亡、自噬等机制研究，结合荧光探针或其他标记实现多色成像分析。
培养与维护要点
培养基
常用 DMEM 培养基（高糖型），添加 10% 胎牛血清（FBS）、1% 双抗（青霉素 / 链霉素），并根据筛选需求加入嘌呤霉素（通常维持浓度为 1-2 µg/mL）。
培养条件
37℃、5%CO2 培养箱，贴壁培养时需定期传代，避免细胞密度过高导致分化或凋亡。
荧光稳定性验证
长期传代后建议通过荧光显微镜或流式细胞术检测 RFP 表达率，确保标记基因未丢失。
污染防控
嘌呤霉素对细菌、真菌无抑制作用，需严格无菌操作，避免微生物污染影响细胞状态。
购买与定制渠道
商业细胞库：如 ATCC、Sigma-Aldrich、中科院细胞库等可能提供商品化稳转株，或接受定制服务（需提供基因序列及筛选标记要求）。
科研机构合作：部分实验室可自主构建稳转株，通过慢病毒包装系统（如 pLVX-RFP-Puro 载体）转染 HepG2 细胞后筛选获得。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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