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PLC/PRF/5-RFP-Puro稳转株
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详细内容
PLC/PRF/5-RFP-Puro稳转株
英文名称 | PLC/PRF/5-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1160 |
中文名称 | RFP 标记的 PLC/PRF/5 稳转株 |
Lot number | PLC/PRF/5-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

构建原理:通常是将携带红色荧光蛋白(RFP)基因和嘌呤霉素抗性(Puro)基因的表达载体,通过转染或病毒感染等方法导入 PLC/PRF/5 细胞中。载体整合到细胞基因组后,使细胞能够稳定表达 RFP,并对嘌呤霉素产生抗性。利用嘌呤霉素进行筛选,只有成功整合了表达载体的细胞才能存活并形成稳定转染的细胞株,即 PLC/PRF/5-RFP-Puro 稳转株。
细胞特性:
形态:与原始的 PLC/PRF/5 细胞类似,呈上皮细胞样,贴壁生长。
荧光特性:在紫外光或特定波长的激发光照射下,能够发射出红色荧光。这是由于细胞稳定表达 RFP,RFP 来源于珊瑚虫,在紫外光的照射下可发射出红色荧光,相比于绿色荧光蛋白(GFP),它有更高的荧光强度,成像背景低,并能激发和发射更长的波长。
抗性:对嘌呤霉素具有抗性。在含有嘌呤霉素的培养基中,未成功转染的细胞会被杀死,而 PLC/PRF/5-RFP-Puro 稳转株能够正常生长。
培养条件:一般使用 90% MEM 培养基加上 10% 胎牛血清(FBS)进行培养。培养环境为气相 95% 空气加 5% 二氧化碳,温度 37℃。传代比例通常为 1∶2 至 1∶3,每周传代 3 次。
应用领域:
细胞示踪:在细胞生物学研究中,可利用其红色荧光对细胞进行标记和追踪。例如,研究 PLC/PRF/5 细胞在体内或体外的迁移、分化、增殖等过程,以及细胞与细胞之间的相互作用。
药物研发:作为肝癌细胞模型,用于筛选和评估针对肝癌的潜在治疗药物。通过观察药物对稳转株细胞生长、增殖、凋亡等方面的影响,以及红色荧光的变化,来判断药物的疗效和作用机制。
基因功能研究:可作为载体,用于研究特定基因在肝癌细胞中的功能。将目的基因导入稳转株中,通过观察细胞表型和红色荧光的变化,分析目的基因对 PLC/PRF/5 细胞生物学行为的影响。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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