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HEK-293T-RFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:08:30
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详细内容
HEK-293T-RFP-Puro稳转株
英文名称 | HEK-293T-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1210 |
中文名称 | RFP 标记的 HEK-293T 稳转株 |
Lot number | HEK-293T-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
HEK-293T-RFP-Puro 稳转株概述
HEK-293T 细胞是一种常用的人胚肾细胞系，具有生长快、转染效率高的特点，广泛应用于基因表达、病毒包装等研究。RFP（红色荧光蛋白）作为报告基因，可通过荧光显微镜或流式细胞术直观追踪细胞内基因表达或细胞定位。Puro（嘌呤霉素） 则是一种抗生素，用于稳转株筛选 —— 通过构建含嘌呤霉素抗性基因的载体，转染后用嘌呤霉素处理细胞，未成功整合目的基因的细胞会被杀死，存活细胞即为稳定表达目标基因（如 RFP）的稳转株。
关键特性与应用
1. 特性
荧光标记：稳定表达 RFP，细胞呈现红色荧光，便于实时观察细胞状态、迁移或共定位研究。
抗性筛选：含嘌呤霉素抗性基因，可通过药物压力维持稳转株的稳定性，避免传代过程中基因丢失。
高转染效率：继承 HEK-293T 细胞的优势，适合病毒载体（如慢病毒、腺病毒）的包装及外源基因的高效表达。
2. 应用场景
基因表达研究：验证基因功能、亚细胞定位（如与其他荧光蛋白共表达）。
细胞示踪：在体内外追踪细胞迁移（如肿瘤细胞转移、干细胞分化）。
病毒载体生产：作为宿主细胞包装携带 RFP 标记的病毒颗粒，用于感染其他细胞或动物模型。
药物筛选：结合荧光信号强度变化，高通量筛选影响基因表达或细胞功能的化合物。
构建流程（简要）
载体设计：构建含 RFP 基因、嘌呤霉素抗性基因（如 Puro 抗性基因表达盒）的质粒载体（如慢病毒载体）。
转染细胞：通过脂质体转染或电穿孔法将载体导入 HEK-293T 细胞。
抗性筛选：转染后 48⁻⁷2 小时加入嘌呤霉素（浓度需预实验优化，通常为 1-5 µg/mL），持续培养 1-2 周，杀死未整合载体的细胞。
单克隆筛选：通过有限稀释法或流式细胞术分选单克隆细胞，扩大培养后验证 RFP 表达稳定性（如荧光强度、传代后荧光保留率）。
鉴定与保存：通过荧光显微镜、流式细胞术确认阳性克隆，液氮冻存备用。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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