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HEK-293T-GFP-mRFP稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:08:30
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详细内容
HEK-293T-GFP-mRFP稳转株
英文名称 | HEK-293T-GFP-mRFP polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1211 |
中文名称 | GFP 和 mRFP 双标的 HEK-293T 稳转株 |
Lot number | HEK-293T-23J2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10％ FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
HEK-293T-GFP-mRFP 稳转株概述
HEK-293T 细胞是一种常用的人胚肾细胞系，具有生长快、转染效率高的特点，广泛应用于病毒包装、蛋白表达和基因编辑等研究。稳转株（稳定转染细胞株）是指通过基因工程手段将外源基因稳定整合到细胞基因组中，使其能够长期表达目标蛋白的细胞群体。
HEK-293T-GFP-mRFP 稳转株则是在 HEK-293T 细胞中同时稳定表达 ** 绿色荧光蛋白（GFP）和红色荧光蛋白（mRFP）** 的细胞株。这两种荧光蛋白常作为报告基因，用于可视化追踪细胞、监测基因表达或进行细胞分选等实验。
关键特性与应用
1. 荧光标记特性
GFP：激发波长约 488 nm，发射波长约 507 nm，呈现绿色荧光，常用于标记细胞结构或追踪基因表达。
mRFP：激发波长约 584 nm，发射波长约 607 nm，呈现红色荧光，可作为双标记系统中的对照，避免荧光干扰。
应用场景：
细胞成像：通过荧光显微镜观察细胞内蛋白定位或细胞动态。
细胞分选：利用流式细胞术（FACS）根据荧光强度筛选目标细胞。
基因表达验证：确认外源基因是否稳定整合并表达。
2. 稳转株构建方法
通常通过以下步骤获得：
载体构建：将 GFP 和 mRFP 的编码基因克隆到质粒载体（如慢病毒载体、逆转录病毒载体）中，同时引入抗性基因（如嘌呤霉素、潮霉素抗性）用于筛选。
细胞转染：使用脂质体转染、电穿孔或病毒感染（如慢病毒）将载体导入 HEK-293T 细胞。
抗性筛选：通过添加抗生素（如嘌呤霉素）杀死未成功整合外源基因的细胞，存活细胞形成稳转株。
单克隆化：通过有限稀释法或单细胞分选获得单克隆细胞，确保外源基因稳定遗传。
3. 优势与局限性
优势：
荧光信号稳定，适用于长期追踪实验（如细胞增殖、迁移研究）。
双荧光标记可实现多重实验设计（如共定位分析、细胞示踪对比）。
HEK-293T 细胞的高转染效率和易培养性简化了稳转株构建流程。
局限性：
荧光蛋白的表达可能受细胞状态（如密度、代谢）影响，需优化培养条件。
双标记可能增加载体大小，影响转染效率或整合稳定性。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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