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HK-2-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:49
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详细内容
HK-2-GFP-Puro稳转株
英文名称 | HK-2-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1205 |
中文名称 | GFP 标记的 HK-2 稳转株 |
Lot number | HK-2-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
HK-2-GFP-Puro 稳转株概述
HK-2 细胞是一种永生化的人近端肾小管上皮细胞系，常用于肾脏疾病、药物毒性、细胞生物学等研究。稳转株（稳定转染细胞株）是通过基因工程手段将外源基因稳定整合到细胞基因组中，使目的基因能够长期、稳定表达的细胞群体。
关键要素解析
GFP（绿色荧光蛋白）
功能：作为报告基因，用于可视化追踪细胞内基因表达、定位或细胞动态（如迁移、分化）。
应用：通过荧光显微镜或流式细胞术（FACS）直接观察细胞中 GFP 的表达，监测转染效率或筛选阳性细胞克隆。
Puro（嘌呤霉素）
作用：作为筛选标记，用于稳转株的构建过程。含有 Puro 抗性基因的细胞可在嘌呤霉素存在的培养基中存活，未成功转染的细胞则被淘汰。
优势：筛选效率高，操作相对简便，适用于真核细胞的稳定转染。
稳转株构建流程
载体设计：构建含 GFP 基因和 Puro 抗性基因的重组质粒（如慢病毒载体、质粒载体）。
转染 / 感染：通过脂质体转染、电穿孔或病毒感染（如慢病毒）将载体导入 HK-2 细胞。
筛选与扩增：使用嘌呤霉素培养基筛选存活细胞，经有限稀释法或单克隆挑选获得纯合稳转株。
鉴定：通过荧光检测、Western blot 或 qPCR 验证 GFP 的稳定表达。
应用场景
细胞示踪与成像研究
利用 GFP 荧光信号追踪 HK-2 细胞在体外培养或体内移植后的分布、增殖及形态变化（如肾脏损伤模型中的细胞迁移）。
药物筛选与毒性评估
结合 GFP 标记观察药物对 HK-2 细胞的影响（如细胞凋亡、形态改变），或通过 Puro 抗性筛选携带特定基因编辑（如 CRISPR-Cas9）的细胞株。
基因功能研究
过表达或敲低目标基因后，利用稳转株持续研究基因在肾脏细胞中的功能（如信号通路调控、代谢机制）。
共定位与互作分析
将 GFP 与其他荧光蛋白（如 RFP）联用，通过荧光共定位技术研究蛋白间相互作用或亚细胞定位。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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