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HK-2-RFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:49
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详细内容
HK-2-RFP-Puro稳转株
英文名称 | HK-2-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1206 |
中文名称 | RFP 标记的 HK-2 稳转株 |
Lot number | HK-2-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
HK-2 细胞：HK-2 细胞是一种人肾皮质近曲小管上皮细胞，源于正常肾的近曲小管细胞，通过导入 HPV - 16 E6/E7 基因而获得永生化。它具有上皮细胞样形态，呈贴壁生长，保留了指示分化良好的近曲小管细胞（PTCs）的表型和功能特征，在毒理学研究等方面有应用。
RFP：即红色荧光蛋白，属于荧光蛋白家族。在该稳转株中，RFP 基因通常是通过基因工程手段导入到 HK - 2 细胞中的，常被用作报告基因，可用于标记和追踪细胞、观察目标蛋白质在细胞内的定位、监测特定基因的表达水平等，便于在实验中对细胞进行可视化观察和分析。
Puro 抗性：嘌呤霉素是一种抗生素，能抑制细胞蛋白质合成，从而阻止细胞生长。构建 HK - 2 - RFP - Puro 稳转株时，会将含有抗嘌呤霉素基因（如编码嘌呤霉素 N - 乙酰转移酶的基因）的载体与 RFP 基因一起转入 HK - 2 细胞。在含有嘌呤霉素的培养基中，只有成功整合了抗嘌呤霉素基因的细胞才能存活并生长，未转染或未正确整合的细胞则会被杀死，这样就可以筛选和维持稳定表达 RFP 的细胞株。
构建方法：一般是先将包含 RFP 基因和嘌呤霉素抗性基因的载体构建好，然后通过慢病毒感染或转染等方法将载体导入 HK - 2 细胞。利用慢病毒感染法时，慢病毒可将目的基因整合到宿主细胞基因组中。之后，使用含有嘌呤霉素的培养基进行筛选，杀死未成功转入载体的细胞，最终得到稳定表达 RFP 且具有嘌呤霉素抗性的 HK - 2 - RFP - Puro 稳转株。
应用：在细胞生物学和医学研究中，该稳转株可用于研究肾皮质近曲小管上皮细胞的相关生理过程、药物对细胞的作用机制等。比如，通过 RFP 的荧光信号可以追踪细胞在体内外的迁移、增殖等行为；利用其嘌呤霉素抗性可在混合细胞中筛选出目的细胞，便于进行后续的实验研究。同时，也可用于研究与肾脏疾病相关的基因功能和病理机制等方面。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
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