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HuTK-143B-GFP-Puro稳转株
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详细内容
HuTK-143B-GFP-Puro稳转株
英文名称 | HuTK-143B-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1214 |
中文名称 | GFP 标记的 HuTK-143B 稳转株 |
Lot number | HuTK-143B-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

背景知识:
细胞来源:HuTK - 143B - GFP - Puro 稳转株中的 143B 细胞是一种人骨肉瘤细胞系。143B 细胞具有肿瘤细胞的特性,在细胞生物学和肿瘤研究等领域被广泛应用。
构建过程:通常是将含有绿色荧光蛋白(GFP)基因和嘌呤霉素(Puro)抗性基因的表达载体,通过转染或病毒感染等方法导入 HuTK - 143B 细胞中。表达载体进入细胞后,会整合到细胞的基因组中,使细胞能够稳定表达 GFP 和对嘌呤霉素产生抗性。
应用领域:
细胞示踪:由于细胞表达 GFP,在荧光显微镜下可以发出绿色荧光,因此可以方便地对细胞进行实时观察和追踪,了解细胞在体内或体外的生长、迁移、分化等行为。例如,在研究肿瘤细胞的转移机制时,可以将 HuTK - 143B - GFP - Puro 稳转株注射到动物模型中,通过观察绿色荧光来追踪肿瘤细胞在体内的扩散情况。
药物筛选:利用细胞对嘌呤霉素的抗性,可以在细胞培养过程中加入嘌呤霉素进行筛选,只有成功转染并稳定表达抗性基因的细胞才能存活,从而筛选出稳定表达目的基因的细胞株。此外,还可以利用该细胞株来筛选对肿瘤细胞生长有抑制作用的药物,通过观察药物处理后细胞的生长、凋亡等情况,评估药物的疗效。
基因功能研究:通过在 HuTK - 143B 细胞中稳定表达 GFP 或其他目的基因,可以研究该基因对细胞生物学行为的影响,如细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移等。同时,也可以利用 RNA 干扰等技术在该稳转株中沉默特定基因,进一步探讨基因的功能。
培养与维护:培养 HuTK - 143B - GFP - Puro 稳转株时,需要使用适合 143B 细胞生长的培养基,并添加适量的嘌呤霉素以维持细胞的抗性筛选压力。细胞培养条件通常为 37℃、5%CO2 的湿润环境。在传代过程中,要注意控制细胞的密度和传代比例,避免细胞过度生长或密度过低影响细胞的生长状态和基因表达稳定性。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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