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U87 MG-RFP-Puro稳转株
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详细内容
U87 MG-RFP-Puro稳转株
英文名称 | U87 MG-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1191 |
中文名称 | RFP 标记的 U87 MG 稳转株 |
Lot number | U87 MG-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

细胞来源:U87 MG 细胞是一种具有上皮形态的细胞系,从一名罹患恶性胶质瘤的白人男性中分离获得,也称为人脑星形胶质母细胞瘤细胞,表现出胶质母细胞瘤的许多标志性特征,是神经生物学、免疫肿瘤学和癌症研究中最广泛使用的细胞模型之一。
相关基因:
RFP 基因:即红色荧光蛋白基因,来源于珊瑚虫,是一种跟绿色荧光蛋白同源的荧光蛋白。在紫外光的照射下,可发射出红色荧光,相比于绿色荧光蛋白,它有更高的荧光强度,成像背景低,并能激发和发射更长的波长,具有较强的组织穿透性,便于对细胞进行标记和追踪观察。
Puro 基因:Puro 是嘌呤霉素(puromycin)的缩写,嘌呤霉素是一种抗生素,可用于阳性细胞筛选。在构建稳转株时,带有 Puro 抗性基因的载体被转染到 U87 MG 细胞中,整合到细胞染色体上。在含有嘌呤霉素的培养基中,只有成功转入并稳定表达 Puro 抗性基因的细胞才能存活,从而筛选出稳定表达目的基因(如 RFP 基因)的 U87 MG - RFP - Puro 稳转株。
构建方法:通常通过慢病毒转染的方式将 RFP 基因和 Puro 抗性基因导入 U87 MG 细胞。慢病毒载体可将外源基因整合到宿主细胞染色体上,使细胞能够长期稳定表达目的基因。转染后,利用嘌呤霉素进行筛选,获得稳定表达 RFP 的 U87 MG 细胞株,即 U87 MG - RFP - Puro 稳转株。
培养条件:U87 MG - RFP - Puro 稳转株的培养条件与普通 U87 MG 细胞类似。使用 DMEM 培养基,添加 10% 胎牛血清和 1% 双抗(青霉素 - 链霉素)。培养环境为气相 95% 空气、5% 二氧化碳,温度 37 摄氏度,培养箱湿度为 70% - 80%。若要求维持荧光强度,可在培养基中加入适量嘌呤霉素进行再次筛选。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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