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A2780-RFP-Puro稳转株
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详细内容
A2780-RFP-Puro稳转株
英文名称 | A2780-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1193 |
中文名称 | RFP 标记的 A2780 稳转株 |
Lot number | A2780-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

相关背景
A2780 细胞系:A2780 是一种人卵巢癌细胞系,来源于未经治疗的卵巢子宫内膜样腺癌患者的肿瘤组织,常被用于卵巢癌相关的研究,如毒性测试、癌症遗传学研究以及顺铂耐药机制的探讨等。
稳转株构建原理:利用慢病毒等载体将含有 RFP 基因和嘌呤霉素抗性基因的外源 DNA 导入 A2780 细胞,外源 DNA 整合到宿主细胞染色体上,使细胞可长期稳定表达 RFP,同时获得对嘌呤霉素的抗性,便于通过嘌呤霉素筛选出稳定转染的细胞。
筛选过程
确定药物筛选浓度:通过梯度实验,使用不同浓度的嘌呤霉素对 A2780 细胞进行处理,选择出在 10-14 天内使细胞全部死亡的最低嘌呤霉素浓度,作为筛选稳转株的最佳药物浓度。
细胞转染与筛选:将构建好的含 RFP 基因和嘌呤霉素抗性基因的载体,通过慢病毒感染等方法导入 A2780 细胞。感染后的细胞在含有筛选浓度嘌呤霉素的培养基中培养,未成功转染的细胞因不具有嘌呤霉素抗性而死亡,只有成功整合了外源 DNA 并稳定表达抗性基因的细胞才能存活,从而筛选得到 A2780-RFP-Puro 稳转株。
应用领域
细胞示踪与成像:RFP 作为一种荧光标记蛋白,可在荧光显微镜下发出红色荧光,便于对细胞进行实时观察和追踪。例如,在研究细胞的迁移、侵袭、分化等过程中,可以通过观察 RFP 的荧光信号来了解 A2780 细胞的动态变化。在体内实验中,将 A2780-RFP-Puro 稳转株接种到动物模型中,也可利用荧光成像技术监测肿瘤细胞在动物体内的生长、转移等情况。
药物研发与筛选:A2780 细胞系常用于卵巢癌药物的研发和筛选。A2780-RFP-Puro 稳转株可以作为模型细胞,在药物处理后,通过观察细胞的荧光变化、生长状态、凋亡情况等,评估药物对肿瘤细胞的作用效果,为筛选出有效的抗癌药物提供依据。同时,由于其对嘌呤霉素具有抗性,还可以在筛选过程中排除其他杂菌或非抗性细胞的干扰。
基因功能研究:可以将感兴趣的基因与 RFP 基因构建在同一载体上,通过观察 RFP 的表达情况来间接反映目的基因的表达和功能。例如,研究某些基因在 A2780 细胞中的过表达或沉默对细胞生物学行为的影响,为深入了解卵巢癌的发病机制和寻找潜在的治疗靶点提供实验基础。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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