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MV-4-11-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:49
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详细内容
MV-4-11-GFP-Puro稳转株
产品名称 | MV-4-11-GFP-Puro 稳转细胞株 |
产品货号 | XY-H1257 |
中文名称 | GFP 标记的 MV-4-11 稳转细胞株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转细胞株； （4）稳转细胞株质检（COA）。 |
完全培养基 | IMDM + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
共享方式 | 公益性共享 |
MV-4-11-GFP-Puro 稳转株概述
MV-4-11 细胞是一种来源于人类急性髓系白血病（AML）的细胞系，具有增殖能力强、易于基因操作等特点，常用于白血病研究、基因功能验证及药物筛选等领域。
**GFP（绿色荧光蛋白）** 作为报告基因，通过基因工程手段导入细胞后，可在荧光显微镜下直观观察细胞的存活、增殖及分布情况，便于实时追踪和分析。
Puro（嘌呤霉素）是一种抗生素，常用于筛选成功导入外源基因的稳转细胞株。含有 Puro 抗性基因的细胞可在含嘌呤霉素的培养基中存活，未成功转染的细胞则被淘汰，从而确保获得稳定表达目标基因的细胞群体。
构建流程与关键技术
载体构建
构建包含GFP 基因和Puro 抗性基因的重组质粒（如慢病毒载体、逆转录病毒载体等），通常通过分子克隆技术（PCR 扩增、酶切连接等）完成。
载体中需包含启动子（如 CMV 启动子）以驱动 GFP 基因的持续表达。
细胞转染 / 感染
根据细胞特性选择转染方法：
电穿孔法：适用于难转染的细胞，通过高压电脉冲增加细胞膜通透性。
病毒感染：利用慢病毒或逆转录病毒载体，感染效率高，尤其适合原代细胞或分裂缓慢的细胞。
嘌呤霉素筛选
转染 / 感染后，细胞在含嘌呤霉素的培养基中培养（浓度需通过预实验优化，通常为 0.5–2 µg/mL）。
未整合外源基因的细胞逐渐死亡，存活下来的细胞即为稳定表达 GFP 且具有 Puro 抗性的稳转株。
单克隆化与鉴定
通过有限稀释法或流式细胞分选术获得单细胞克隆，确保细胞群体的遗传均一性。
利用荧光显微镜观察 GFP 表达强度，通过 Western blot 或流式细胞术验证 GFP 蛋白的稳定表达。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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