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H9C2-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:49
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详细内容
H9C2-GFP-Puro稳转株
英文名称 | H9C2-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1247 |
中文名称 | GFP 标记的 H9C2 稳转株 |
Lot number | H9C2-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 成肌细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
H9C2-GFP-Puro 稳转株的构建流程
载体构建
将 GFP 基因与嘌呤霉素抗性基因（如puroR）插入到合适的表达载体（如质粒）中，形成重组载体。
载体需包含启动子（如 CMV）以驱动 GFP 和puroR基因的表达。
细胞转染
使用脂质体转染、电穿孔等方法将重组载体导入 H9C2 细胞。
转染后，细胞需在适宜条件下（如 37℃、5%CO2 ）培养。
嘌呤霉素筛选
转染后 48⁻⁷2 小时，向培养基中添加嘌呤霉素（浓度需预先通过梯度实验确定，通常为 1-10 µg/mL）。
未成功整合载体的细胞逐渐死亡，存活约 2 周后，获得稳定表达 GFP 的单克隆细胞株（稳转株）。
单克隆化与鉴定
通过有限稀释法或流式细胞分选（FACS）筛选单细胞克隆，确保细胞均一性。
利用荧光显微镜检测 GFP 表达强度，通过 Western blot 验证 GFP 蛋白水平，确认稳转株成功构建。
应用场景
细胞示踪与成像研究
利用 GFP 荧光特性，在活体或离体环境中追踪 H9C2 细胞的迁移、分化或凋亡过程（如在动物模型中研究心肌细胞再生）。
药物筛选与毒性评估
通过 GFP 荧光强度变化监测药物对心肌细胞的影响（如细胞形态改变、增殖抑制），结合嘌呤霉素筛选系统维持稳定表达。
基因功能研究
可进一步将目的基因与 GFP 融合表达，通过荧光共定位分析蛋白互作或亚细胞定位（如线粒体、细胞核靶向研究）。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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